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与传播水稻条纹病毒相关的灰飞虱蛋白质鉴定与功能研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 引言第13-31页
   ·水稻条纹病毒的研究进展第13-16页
     ·水稻条纹叶枯病的危害与流行第13页
     ·RSV 的基因组及粒体形态第13-15页
     ·RSV 的传播介体及其传毒特性第15-16页
   ·介体昆虫传植物病毒机制的研究进展第16-21页
     ·非持久和半持久性植物病毒的传毒机制研究第17-18页
     ·持久性植物病毒的传毒机制研究第18-20页
     ·纤细病毒属病毒的传毒机制研究第20-21页
   ·酵母双杂交系统及其在植物病毒研究中的应用第21-28页
     ·酵母双杂交系统第21-27页
     ·酵母双杂交系统在植物病毒研究中的应用第27-28页
   ·化学发光免疫共沉淀技术第28-29页
   ·本研究目的和意义及主要技术路线第29-31页
     ·本研究的目的和意义第29-30页
     ·本研究的主要技术路线第30-31页
第二章 利用酵母双杂核系统筛选与 RSV CP 和 SP 互作的灰飞虱蛋白第31-47页
   ·材料与方法第31-39页
     ·灰飞虱核系统 cDNA 文库的构建第31-33页
     ·文库质量和滴度检测第33页
     ·pGBKT7-CP 和 pGBKT7-SP 诱饵载体的构建第33-35页
     ·重组诱饵载体的表达、自激活和毒性检测第35-37页
     ·利用诱饵 RSV CP 和 SP 筛选灰飞虱 cDNA 文库第37-39页
   ·结果与分析第39-45页
     ·灰飞虱核系统 cDNA 文库的构建第39-40页
     ·文库质量和滴度检测第40页
     ·pGBKT7-CP 和 pGBKT7-SP 诱饵载体的构建第40-41页
     ·重组诱饵载体的表达、自激活和毒性检测第41-43页
     ·利用诱饵 pGBKT7-CP 和 pGBKT7-SP 筛选灰飞虱 cDNA 文库第43-45页
   ·讨论第45-47页
第三章 利用分离泛素酵母双杂膜系统筛选与 RSV CP 互作的灰飞虱蛋白第47-59页
   ·材料与方法第47-52页
     ·灰飞虱膜系统 cDNA 文库的构建第47-48页
     ·文库质量和滴度检测第48页
     ·pDHB1-CP 诱饵载体的构建第48-49页
     ·诱饵载体 pDHB1-CP 的表达和功能检测第49-50页
     ·利用诱饵 pDHB1-CP 筛选灰飞虱 cDNA 文库第50-52页
   ·结果与分析第52-58页
     ·灰飞虱膜系统 cDNA 文库的构建第52-53页
     ·文库质量和滴度检测第53-54页
     ·pDHB1-CP 诱饵载体的构建第54-55页
     ·诱饵载体 pDHB1-CP 的表达和功能检测第55-56页
     ·利用诱饵 pDHB1-CP 筛选灰飞虱 cDNA 文库第56-58页
   ·讨论第58-59页
第四章 化学发光免疫共沉淀验证互作蛋白第59-66页
   ·材料与方法第59-62页
     ·化学发光免疫共沉淀表达载体的构建第59页
     ·互作蛋白的化学发光免疫共沉淀检测第59-62页
   ·结果与分析第62-65页
     ·化学发光免疫共沉淀表达载体的构建第62-63页
     ·互作蛋白的化学发光免疫共沉淀检测第63-65页
   ·讨论第65-66页
第五章 灰飞虱蛋白编码基因及病毒的 qRT-PCR 步法的建立与应用第66-72页
   ·材料与方法第66-69页
     ·实验所用试剂及仪器第66页
     ·昆虫及植物组织总 RNA 的提取第66-67页
     ·步法 qRT-PCR 标准曲线的制作第67-69页
   ·结果与分析第69-71页
     ·目的基因引物扩增的溶解曲线第69页
     ·标准样品的扩增图第69-70页
     ·标准曲线的制作第70-71页
   ·讨论第71-72页
第六章 灰飞虱的种新表皮蛋白在 RSV 传播中的功能研究第72-89页
   ·材料与方法第72-80页
     ·NCuP 全长基因的扩增及进化树分析第72-75页
     ·NCuP 蛋白抗体的制备第75-76页
     ·RSV CP 与 NCuP 在 Sf9 细胞中的表达及共定位检测第76-78页
     ·RSV 与 NCuP 在灰飞虱细胞中的共定位检测第78页
     ·RSV 与 NCuP 在灰飞虱组织中的共定位检测第78-79页
     ·利用 RNAi 技术沉默 NCuP 的表达后对 RSV 的影响第79-80页
   ·结果与分析第80-87页
     ·NCuP 的生物信息学分析第80-82页
     ·NCuP 蛋白抗体的制备第82页
     ·RSV CP 与 NCuP 在 Sf9 细胞中的表达及共定位检测第82-83页
     ·RSV 与 NCuP 在灰飞虱细胞中的共定位检测第83-84页
     ·RSV 与 NCuP 在灰飞虱组织中的共定位检测第84-85页
     ·利用 RNAi 技术沉默 NCuP 的表达后对 RSV 的影响第85-87页
   ·讨论第87-89页
第七章 灰飞虱的卵黄蛋白原在 RSV 入卵传播中的功能研究第89-95页
   ·材料与方法第89-90页
     ·卵黄蛋白原全长基因的扩增第89页
     ·不同龄期灰飞虱 Vg 的表达水平检测第89-90页
     ·RSV 与 Vg 在灰飞虱卵巢内的共定位检测第90页
   ·结果与分析第90-93页
     ·Vg 全长基因的扩增与分析第90-91页
     ·不同龄期灰飞虱 Vg 的表达水平检测第91-92页
     ·RSV 与 Vg 在灰飞虱卵巢内的共定位检测第92-93页
   ·讨论第93-95页
第八章 全文总结第95-97页
参考文献第97-109页
致谢第109-110页
作者简历第110页

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