摘要 | 第1-7页 |
Abstract | 第7-13页 |
第一章 引言 | 第13-31页 |
·水稻条纹病毒的研究进展 | 第13-16页 |
·水稻条纹叶枯病的危害与流行 | 第13页 |
·RSV 的基因组及粒体形态 | 第13-15页 |
·RSV 的传播介体及其传毒特性 | 第15-16页 |
·介体昆虫传植物病毒机制的研究进展 | 第16-21页 |
·非持久和半持久性植物病毒的传毒机制研究 | 第17-18页 |
·持久性植物病毒的传毒机制研究 | 第18-20页 |
·纤细病毒属病毒的传毒机制研究 | 第20-21页 |
·酵母双杂交系统及其在植物病毒研究中的应用 | 第21-28页 |
·酵母双杂交系统 | 第21-27页 |
·酵母双杂交系统在植物病毒研究中的应用 | 第27-28页 |
·化学发光免疫共沉淀技术 | 第28-29页 |
·本研究目的和意义及主要技术路线 | 第29-31页 |
·本研究的目的和意义 | 第29-30页 |
·本研究的主要技术路线 | 第30-31页 |
第二章 利用酵母双杂核系统筛选与 RSV CP 和 SP 互作的灰飞虱蛋白 | 第31-47页 |
·材料与方法 | 第31-39页 |
·灰飞虱核系统 cDNA 文库的构建 | 第31-33页 |
·文库质量和滴度检测 | 第33页 |
·pGBKT7-CP 和 pGBKT7-SP 诱饵载体的构建 | 第33-35页 |
·重组诱饵载体的表达、自激活和毒性检测 | 第35-37页 |
·利用诱饵 RSV CP 和 SP 筛选灰飞虱 cDNA 文库 | 第37-39页 |
·结果与分析 | 第39-45页 |
·灰飞虱核系统 cDNA 文库的构建 | 第39-40页 |
·文库质量和滴度检测 | 第40页 |
·pGBKT7-CP 和 pGBKT7-SP 诱饵载体的构建 | 第40-41页 |
·重组诱饵载体的表达、自激活和毒性检测 | 第41-43页 |
·利用诱饵 pGBKT7-CP 和 pGBKT7-SP 筛选灰飞虱 cDNA 文库 | 第43-45页 |
·讨论 | 第45-47页 |
第三章 利用分离泛素酵母双杂膜系统筛选与 RSV CP 互作的灰飞虱蛋白 | 第47-59页 |
·材料与方法 | 第47-52页 |
·灰飞虱膜系统 cDNA 文库的构建 | 第47-48页 |
·文库质量和滴度检测 | 第48页 |
·pDHB1-CP 诱饵载体的构建 | 第48-49页 |
·诱饵载体 pDHB1-CP 的表达和功能检测 | 第49-50页 |
·利用诱饵 pDHB1-CP 筛选灰飞虱 cDNA 文库 | 第50-52页 |
·结果与分析 | 第52-58页 |
·灰飞虱膜系统 cDNA 文库的构建 | 第52-53页 |
·文库质量和滴度检测 | 第53-54页 |
·pDHB1-CP 诱饵载体的构建 | 第54-55页 |
·诱饵载体 pDHB1-CP 的表达和功能检测 | 第55-56页 |
·利用诱饵 pDHB1-CP 筛选灰飞虱 cDNA 文库 | 第56-58页 |
·讨论 | 第58-59页 |
第四章 化学发光免疫共沉淀验证互作蛋白 | 第59-66页 |
·材料与方法 | 第59-62页 |
·化学发光免疫共沉淀表达载体的构建 | 第59页 |
·互作蛋白的化学发光免疫共沉淀检测 | 第59-62页 |
·结果与分析 | 第62-65页 |
·化学发光免疫共沉淀表达载体的构建 | 第62-63页 |
·互作蛋白的化学发光免疫共沉淀检测 | 第63-65页 |
·讨论 | 第65-66页 |
第五章 灰飞虱蛋白编码基因及病毒的 qRT-PCR 步法的建立与应用 | 第66-72页 |
·材料与方法 | 第66-69页 |
·实验所用试剂及仪器 | 第66页 |
·昆虫及植物组织总 RNA 的提取 | 第66-67页 |
·步法 qRT-PCR 标准曲线的制作 | 第67-69页 |
·结果与分析 | 第69-71页 |
·目的基因引物扩增的溶解曲线 | 第69页 |
·标准样品的扩增图 | 第69-70页 |
·标准曲线的制作 | 第70-71页 |
·讨论 | 第71-72页 |
第六章 灰飞虱的种新表皮蛋白在 RSV 传播中的功能研究 | 第72-89页 |
·材料与方法 | 第72-80页 |
·NCuP 全长基因的扩增及进化树分析 | 第72-75页 |
·NCuP 蛋白抗体的制备 | 第75-76页 |
·RSV CP 与 NCuP 在 Sf9 细胞中的表达及共定位检测 | 第76-78页 |
·RSV 与 NCuP 在灰飞虱细胞中的共定位检测 | 第78页 |
·RSV 与 NCuP 在灰飞虱组织中的共定位检测 | 第78-79页 |
·利用 RNAi 技术沉默 NCuP 的表达后对 RSV 的影响 | 第79-80页 |
·结果与分析 | 第80-87页 |
·NCuP 的生物信息学分析 | 第80-82页 |
·NCuP 蛋白抗体的制备 | 第82页 |
·RSV CP 与 NCuP 在 Sf9 细胞中的表达及共定位检测 | 第82-83页 |
·RSV 与 NCuP 在灰飞虱细胞中的共定位检测 | 第83-84页 |
·RSV 与 NCuP 在灰飞虱组织中的共定位检测 | 第84-85页 |
·利用 RNAi 技术沉默 NCuP 的表达后对 RSV 的影响 | 第85-87页 |
·讨论 | 第87-89页 |
第七章 灰飞虱的卵黄蛋白原在 RSV 入卵传播中的功能研究 | 第89-95页 |
·材料与方法 | 第89-90页 |
·卵黄蛋白原全长基因的扩增 | 第89页 |
·不同龄期灰飞虱 Vg 的表达水平检测 | 第89-90页 |
·RSV 与 Vg 在灰飞虱卵巢内的共定位检测 | 第90页 |
·结果与分析 | 第90-93页 |
·Vg 全长基因的扩增与分析 | 第90-91页 |
·不同龄期灰飞虱 Vg 的表达水平检测 | 第91-92页 |
·RSV 与 Vg 在灰飞虱卵巢内的共定位检测 | 第92-93页 |
·讨论 | 第93-95页 |
第八章 全文总结 | 第95-97页 |
参考文献 | 第97-109页 |
致谢 | 第109-110页 |
作者简历 | 第110页 |