| 摘要 | 第1-8页 |
| Abstract | 第8-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-17页 |
| ·乙型脑炎的流行病学 | 第11-12页 |
| ·流行特征 | 第11页 |
| ·易感群体 | 第11-12页 |
| ·传播媒介与宿主 | 第12页 |
| ·乙型脑炎病毒的生物学特性 | 第12-14页 |
| ·乙型脑炎病毒的形态及基因组的结构和功能 | 第12-14页 |
| ·乙型脑炎病毒的入侵和合成过程 | 第14页 |
| ·乙型脑炎病毒的毒株间变异 | 第14页 |
| ·乙型脑炎的临床症状和病理变化 | 第14-15页 |
| ·乙型脑炎病毒的致病机理 | 第14-15页 |
| ·乙型脑炎的病理变化 | 第15页 |
| ·乙型脑炎的临床症状 | 第15页 |
| ·乙型脑炎诊断技术的研究进展 | 第15-16页 |
| ·病毒的分离和鉴定 | 第15页 |
| ·免疫学诊断 | 第15-16页 |
| ·研究目的与意义 | 第16-17页 |
| 第二章 日本乙型脑炎病毒NS5蛋白单克隆抗体的制备及其特性分析 | 第17-37页 |
| ·实验材料 | 第17-19页 |
| ·质粒、菌株、细胞系和实验动物 | 第17页 |
| ·主要药品、试剂和仪器 | 第17页 |
| ·使用的培养基和其配制方法 | 第17-18页 |
| ·缓冲液(溶液)和其配制 | 第18-19页 |
| ·实验方法 | 第19-25页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第19-20页 |
| ·诱导表达产物的SDS-PAGE分析 | 第20页 |
| ·免疫原与检测抗原的制备 | 第20页 |
| ·动物免疫 | 第20页 |
| ·间接ELISA检测方法的建立 | 第20-21页 |
| ·间接ELISA法检测小鼠的免疫效果 | 第21页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的准备 | 第21页 |
| ·免疫脾细胞的准备 | 第21页 |
| ·饲养细胞的准备 | 第21-22页 |
| ·细胞融合 | 第22页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第22页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的亚克隆 | 第22-23页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第23页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第23页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第23页 |
| ·单克隆抗体的IFA分析 | 第23页 |
| ·单克隆抗体的Western blot分析 | 第23页 |
| ·单克隆抗体靶抗原表位区域的分析 | 第23-24页 |
| ·JEV不同毒株NS5蛋白氨基酸序列的比对 | 第24页 |
| ·3C4株单抗靶抗原表位的三维结构分析 | 第24页 |
| ·多肽的设计和合成 | 第24页 |
| ·3C4株单抗与合成多肽的反应检测 | 第24-25页 |
| ·结果与分析 | 第25-34页 |
| ·NS5蛋白的纯化鉴定 | 第25页 |
| ·免疫小鼠血清效价的测定 | 第25-26页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第26页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第26-27页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第27页 |
| ·单克隆抗体的IFA检测 | 第27-28页 |
| ·单克隆抗体的Western blot分析 | 第28-29页 |
| ·单克隆抗体靶抗原表位区域的分析 | 第29-30页 |
| ·3C4株单抗与不同的JEV毒株的反应 | 第30-31页 |
| ·JEV SX09S-1株与SA14-14-2株、P3株NS5蛋白氨基酸序列的比对 | 第31页 |
| ·JEV SX09S-1株与SA14-14-2株、P3株NS5蛋白差异氨基酸 | 第31-32页 |
| ·WNV NS5蛋白RdRp区3D结构图 | 第32-33页 |
| ·3C4株单抗与多肽的ELISA检测结果 | 第33页 |
| ·432位氨基酸在NS5蛋白三维结构中的位置 | 第33-34页 |
| ·讨论 | 第34-35页 |
| ·小结 | 第35-37页 |
| 第三章 日本乙型脑炎病毒E蛋白单克隆抗体制备及其特性分析 | 第37-48页 |
| ·实验材料 | 第37-39页 |
| ·毒株、细胞系和实验动物 | 第37页 |
| ·主要药品、试剂和仪器 | 第37页 |
| ·使用的培养基和其配制方法 | 第37-38页 |
| ·缓冲液(溶液)和其配制 | 第38-39页 |
| ·实验方法 | 第39-42页 |
| ·病毒的扩增 | 第39页 |
| ·小鼠免疫 | 第39页 |
| ·小鼠免疫效果检测 | 第39页 |
| ·SP2/0骨髓瘤细胞的准备 | 第39-40页 |
| ·免疫脾细胞的准备 | 第40页 |
| ·饲养细胞的准备 | 第40页 |
| ·细胞融合 | 第40-41页 |
| ·阳性株的筛选和亚克隆 | 第41页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第41页 |
| ·单抗亚型的鉴定 | 第41页 |
| ·单抗生物学特性的分析 | 第41-42页 |
| ·单抗中和活性的检测 | 第42页 |
| ·结果与分析 | 第42-46页 |
| ·免疫小鼠血清效价的测定 | 第42-43页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第43-44页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第44页 |
| ·单克隆抗体的IFA检测 | 第44-45页 |
| ·单克隆抗体的Western blot分析 | 第45页 |
| ·JEV单抗中和活性的检测 | 第45-46页 |
| ·讨论 | 第46-47页 |
| ·小结 | 第47-48页 |
| 结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55页 |
