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PGE2高灵敏度ELISA检测方法的建立

英文缩写词表第1-8页
中文摘要第8-9页
Abstract第9-10页
前言第10-13页
 1. 前列腺素E_2第10页
 2. PGE_2测定的研究现状第10-11页
 3. 本研究测定PGE_2新方法建立的意义第11-12页
 参考文献第12-13页
第一部分:PGE_2单克隆抗体腹水的制备及其纯化第13-23页
   ·实验材料第13-15页
     ·实验仪器第13页
     ·实验试剂与耗材第13页
     ·实验试剂及配制第13-15页
   ·实验方法第15-18页
     ·实验原理第15页
     ·单克隆抗体腹水的制备第15-16页
     ·单克隆抗体亚类(型)的鉴定第16页
     ·间接ELISA法测定单克隆抗体效价第16页
     ·腹水型单克隆抗体纯化的操作步骤第16-17页
     ·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析纯化抗体纯度第17-18页
   ·实验结果与分析第18-20页
   ·实验结果讨论第20-22页
 参考文献第22-23页
第二部分:建立间接竞争ELISA法测定PGE_2第23-29页
   ·实验材料第23-24页
     ·实验仪器第23页
     ·实验试剂第23页
     ·实验试剂的配制第23-24页
   ·实验方法第24-26页
     ·实验原理第24-25页
     ·间接竞争ELISA法的建立第25-26页
   ·实验结果与分析第26-28页
     ·抗PGE_2单克隆抗体最佳工作浓度的确定第26页
     ·间接竞争ELISA标准曲线的建立第26-28页
   ·实验结果讨论第28页
 参考文献第28-29页
第三部分:建立直接竞争ELISA法测定PGE_2第29-46页
   ·实验材料第29-30页
     ·实验仪器第29页
     ·实验试剂第29页
     ·实验试剂的配制第29-30页
   ·实验方法第30-36页
     ·曼尼希反应(Mannich Reaction,MR)法制备酶标抗原第30-32页
     ·戊二醛(Glutaraldehyde Method,GA)法制备酶标抗原第32-33页
     ·直接ELISA法检测酶标记抗原是否成功第33页
     ·TNBS法测定偶联物PGE_2-AKP的偶联比率第33-35页
     ·直接竞争ELISA法的建立第35-36页
   ·结果讨论与分析第36-44页
     ·酶标抗原偶联结果鉴定第36-37页
     ·TNBS法测定PGE_2-AKP偶联率第37-41页
     ·直接竞争法ELISA检测PGE_2的标准曲线第41-42页
     ·直接竞争ELISA法的评价第42-44页
   ·实验结果讨论第44-45页
 参考文献第45-46页
第四部分:建立改良型直接竞争ELISA法(比色法)测定PGE_2第46-52页
   ·实验材料第46-47页
     ·实验仪器第46页
     ·实验试剂第46页
     ·实验试剂的配制第46-47页
   ·实验方法第47-49页
     ·实验原理第47-48页
     ·板底包被抗体—山羊抗小鼠IgM的浓度摸索第48页
     ·改良型直接竞争ELISA法(比色法)标准曲线的建立第48-49页
   ·实验结果与分析第49-51页
     ·板底包被抗体—山羊抗小鼠IgM的浓度摸索第49页
     ·改良型直接竞争ELISA法(比色法)标准曲线的建立第49-51页
   ·实验结果讨论第51页
 参考文献第51-52页
第五部分:建立改良型直接竞争ELISA法(荧光法)测定PGE_2第52-57页
   ·实验材料第52-53页
     ·实验仪器第52页
     ·实验试剂第52页
     ·实验试剂的配制第52-53页
   ·实验方法第53-54页
     ·实验原理第53页
     ·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)标准曲线的建立第53-54页
     ·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)标准曲线的建立第54页
   ·实验结果与分析第54-55页
     ·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)标准曲线的建立第54-55页
   ·实验结果讨论第55-56页
 参考文献第56-57页
第六部分:改良型直接竞争ELISA法(荧光法)测定原生痛对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞分泌PGE_2的影响第57-64页
   ·实验材料第57-58页
     ·实验仪器第57页
     ·药物与实验试剂第57页
     ·实验试剂的配制第57-58页
     ·细胞株第58页
   ·实验方法第58-60页
     ·85%乙醇提取原生痛第58页
     ·原生痛对RAW 264.7巨噬细胞24 h细胞毒作用第58-59页
     ·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)测定RAW 264.7细胞分泌PGE_2第59-60页
   ·实验结果与分析第60-63页
     ·85%乙醇提取原生痛得率第60页
     ·原生痛对RAW 264.7巨噬细胞24 h细胞毒作用第60-61页
     ·原生痛对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞分泌PGE_2影响的测定第61-63页
   ·实验结果讨论第63页
 参考文献第63-64页
讨论第64-69页
参考文献第69-71页
结论第71-72页
致谢第72-74页
文献综述一:前列腺素E_2的产生及意义第74-85页
 参考文献第80-85页
文献综述二:前列腺素E_2的检测第85-92页
 参考文献第89-92页
附:硕士期间完成的工作成果第92-97页

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