英文缩写词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9-10页 |
前言 | 第10-13页 |
1. 前列腺素E_2 | 第10页 |
2. PGE_2测定的研究现状 | 第10-11页 |
3. 本研究测定PGE_2新方法建立的意义 | 第11-12页 |
参考文献 | 第12-13页 |
第一部分:PGE_2单克隆抗体腹水的制备及其纯化 | 第13-23页 |
·实验材料 | 第13-15页 |
·实验仪器 | 第13页 |
·实验试剂与耗材 | 第13页 |
·实验试剂及配制 | 第13-15页 |
·实验方法 | 第15-18页 |
·实验原理 | 第15页 |
·单克隆抗体腹水的制备 | 第15-16页 |
·单克隆抗体亚类(型)的鉴定 | 第16页 |
·间接ELISA法测定单克隆抗体效价 | 第16页 |
·腹水型单克隆抗体纯化的操作步骤 | 第16-17页 |
·SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析纯化抗体纯度 | 第17-18页 |
·实验结果与分析 | 第18-20页 |
·实验结果讨论 | 第20-22页 |
参考文献 | 第22-23页 |
第二部分:建立间接竞争ELISA法测定PGE_2 | 第23-29页 |
·实验材料 | 第23-24页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·实验试剂 | 第23页 |
·实验试剂的配制 | 第23-24页 |
·实验方法 | 第24-26页 |
·实验原理 | 第24-25页 |
·间接竞争ELISA法的建立 | 第25-26页 |
·实验结果与分析 | 第26-28页 |
·抗PGE_2单克隆抗体最佳工作浓度的确定 | 第26页 |
·间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第26-28页 |
·实验结果讨论 | 第28页 |
参考文献 | 第28-29页 |
第三部分:建立直接竞争ELISA法测定PGE_2 | 第29-46页 |
·实验材料 | 第29-30页 |
·实验仪器 | 第29页 |
·实验试剂 | 第29页 |
·实验试剂的配制 | 第29-30页 |
·实验方法 | 第30-36页 |
·曼尼希反应(Mannich Reaction,MR)法制备酶标抗原 | 第30-32页 |
·戊二醛(Glutaraldehyde Method,GA)法制备酶标抗原 | 第32-33页 |
·直接ELISA法检测酶标记抗原是否成功 | 第33页 |
·TNBS法测定偶联物PGE_2-AKP的偶联比率 | 第33-35页 |
·直接竞争ELISA法的建立 | 第35-36页 |
·结果讨论与分析 | 第36-44页 |
·酶标抗原偶联结果鉴定 | 第36-37页 |
·TNBS法测定PGE_2-AKP偶联率 | 第37-41页 |
·直接竞争法ELISA检测PGE_2的标准曲线 | 第41-42页 |
·直接竞争ELISA法的评价 | 第42-44页 |
·实验结果讨论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-46页 |
第四部分:建立改良型直接竞争ELISA法(比色法)测定PGE_2 | 第46-52页 |
·实验材料 | 第46-47页 |
·实验仪器 | 第46页 |
·实验试剂 | 第46页 |
·实验试剂的配制 | 第46-47页 |
·实验方法 | 第47-49页 |
·实验原理 | 第47-48页 |
·板底包被抗体—山羊抗小鼠IgM的浓度摸索 | 第48页 |
·改良型直接竞争ELISA法(比色法)标准曲线的建立 | 第48-49页 |
·实验结果与分析 | 第49-51页 |
·板底包被抗体—山羊抗小鼠IgM的浓度摸索 | 第49页 |
·改良型直接竞争ELISA法(比色法)标准曲线的建立 | 第49-51页 |
·实验结果讨论 | 第51页 |
参考文献 | 第51-52页 |
第五部分:建立改良型直接竞争ELISA法(荧光法)测定PGE_2 | 第52-57页 |
·实验材料 | 第52-53页 |
·实验仪器 | 第52页 |
·实验试剂 | 第52页 |
·实验试剂的配制 | 第52-53页 |
·实验方法 | 第53-54页 |
·实验原理 | 第53页 |
·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)标准曲线的建立 | 第53-54页 |
·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)标准曲线的建立 | 第54页 |
·实验结果与分析 | 第54-55页 |
·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)标准曲线的建立 | 第54-55页 |
·实验结果讨论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-57页 |
第六部分:改良型直接竞争ELISA法(荧光法)测定原生痛对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞分泌PGE_2的影响 | 第57-64页 |
·实验材料 | 第57-58页 |
·实验仪器 | 第57页 |
·药物与实验试剂 | 第57页 |
·实验试剂的配制 | 第57-58页 |
·细胞株 | 第58页 |
·实验方法 | 第58-60页 |
·85%乙醇提取原生痛 | 第58页 |
·原生痛对RAW 264.7巨噬细胞24 h细胞毒作用 | 第58-59页 |
·改良型直接竞争ELISA法(荧光法)测定RAW 264.7细胞分泌PGE_2 | 第59-60页 |
·实验结果与分析 | 第60-63页 |
·85%乙醇提取原生痛得率 | 第60页 |
·原生痛对RAW 264.7巨噬细胞24 h细胞毒作用 | 第60-61页 |
·原生痛对LPS诱导的RAW 264.7巨噬细胞分泌PGE_2影响的测定 | 第61-63页 |
·实验结果讨论 | 第63页 |
参考文献 | 第63-64页 |
讨论 | 第64-69页 |
参考文献 | 第69-71页 |
结论 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-74页 |
文献综述一:前列腺素E_2的产生及意义 | 第74-85页 |
参考文献 | 第80-85页 |
文献综述二:前列腺素E_2的检测 | 第85-92页 |
参考文献 | 第89-92页 |
附:硕士期间完成的工作成果 | 第92-97页 |