中文摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-9页 |
第一章 前言 | 第9-18页 |
·植物糖代谢途径总述 | 第9-10页 |
·尿苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶(UGPase)及其研究进展 | 第10-17页 |
·UGPase的基本生物学功能 | 第10-13页 |
·UGPase的拷贝数及同源性分析 | 第13页 |
·UGPase三维结构模拟及结构分析 | 第13-15页 |
·UGPase的定位及酶学特征 | 第15-16页 |
·分子生物学研究 | 第16-17页 |
·本实验的研究意义 | 第17-18页 |
第二章 材料和方法 | 第18-31页 |
·植物材料 | 第18页 |
·质粒及菌株 | 第18页 |
·酶与试剂盒 | 第18页 |
·主要化学品 | 第18-19页 |
·主要激素和抗生素 | 第19页 |
·分析软件 | 第19页 |
·主要的仪器设备 | 第19页 |
·胡杨/灰杨叶片和愈伤组织总RNA提取 | 第19-21页 |
·溶液配制 | 第19-20页 |
·RNA提取注意事项 | 第20页 |
·提取方法(LiCl沉淀法) | 第20-21页 |
·检测所提取的总RNA质量 | 第21页 |
·测定所提取RNA的OD260值 | 第21页 |
·用RT-PCR方法获得PeUGP和PrUGP全长基因 | 第21-26页 |
·cDNA第一条链的合成 | 第21-22页 |
·PCR反应 | 第22-23页 |
·切胶回收PCR产物目的片段 | 第23页 |
·将回收的PeUGP和PrUGP目的片段克隆到pMD18-TVector | 第23页 |
·感受态细胞制备 | 第23-24页 |
·质粒转化 | 第24页 |
·菌液PCR鉴定阳性克隆及测序 | 第24-25页 |
·质粒提取 | 第25-26页 |
·表达载体构建 | 第26-27页 |
·质粒和载体分布酶切 | 第26-27页 |
·连接反应 | 第27页 |
·质粒转化及阳性克隆鉴定 | 第27页 |
·胡杨/灰杨UGPase在愈伤组织中的基本生理特性分析 | 第27-31页 |
·胡杨/灰杨愈伤组织继代 | 第27-28页 |
·胡杨/灰杨愈伤组织盐胁迫处理 | 第28-29页 |
·胡杨/灰杨愈伤组织总RNA提取和Na~+与K~+含量测定 | 第29页 |
·实时荧光定量PCR | 第29-31页 |
第三章 研究结果 | 第31-47页 |
·胡杨/灰杨继代愈伤组织 | 第31页 |
·胡杨4个正选择候选基因(ESTs)注释信息 | 第31-32页 |
·PeUGP和PrUGP表达信息 | 第32页 |
·PeUGP和PrUGP Nr/Swissprot注释信息 | 第32-33页 |
·胡杨/灰杨总RNA的提取 | 第33-34页 |
·PeUGP和PrUGP cDNA序列全长扩增结果和序列分析 | 第34-37页 |
·所有克隆PeUGPs和PrUGPs对应氨基酸序列比对差异结果 | 第37-39页 |
·PeUGP和PrUGP稳定SNPs差异汇总 | 第39-40页 |
·PeUGP和PrUGP系统发育树 | 第40-41页 |
·PeUGPase和PrUGPase保守结构和三维结构模拟分析 | 第41-43页 |
·盐胁迫下胡杨/灰杨Na~+,K~+离子含量及K~+/Na~+比 | 第43-45页 |
·PeUGP和PrUGP Real-Time PCR结果 | 第45-46页 |
·PeUGP和PrUGP TA载体和pET28(a~+)表达载体构建 | 第46-47页 |
第四章 讨论 | 第47-49页 |
·材料的选取 | 第47页 |
·PeUGP和PrUGP扩增与进化分析 | 第47-48页 |
·PeUGPase和PrUGPase功能分析 | 第48-49页 |
第五章 结论 | 第49-51页 |
附录:PeUGP和PrUGP所有克隆核苷酸序列比对结果 | 第51-62页 |
参考文献 | 第62-65页 |
在读期间参与学术成果 | 第65-66页 |
致谢 | 第66页 |