摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-10页 |
1 前言 | 第10-17页 |
·内蒙古绒山羊的发展现状 | 第10-11页 |
·绒山羊 Y 染色体的研究进展 | 第11-12页 |
·热应激反应 | 第12-15页 |
·热应激蛋白家族(HSPs) | 第13页 |
·热休克转录因子基因 | 第13页 |
·热休克转录因子基因的类型和功能 | 第13-14页 |
·热激转录因子的转录调控 | 第14页 |
·热激转录因子的展望 | 第14-15页 |
·荧光原位杂交(FISH)概述 | 第15-16页 |
·荧光原位杂交(FISH)技术的建立 | 第15页 |
·荧光原位杂交(FISH)的原理 | 第15页 |
·荧光原位杂交(FISH)技术的应用 | 第15-16页 |
·荧光原位杂交(FISH)在绒山羊上的研究与应用前景 | 第16页 |
·本研究的目的和意义 | 第16-17页 |
2 成纤维细胞的培养、染色体核型条件的优化及细胞悬液的制备 | 第17-22页 |
·成纤维细胞的培养 | 第17-19页 |
·实验材料 | 第17-18页 |
·实验方法与操作步骤 | 第18-19页 |
·染色体核型制备条件的优化 | 第19-20页 |
·实验材料 | 第19-20页 |
·实验方法 | 第20页 |
·染色体悬液制备 | 第20-22页 |
·实验耗材与试剂 | 第20-21页 |
·实验方法与操作步骤 | 第21-22页 |
3 HSF-2 基因在内蒙古绒山羊 Y 染色体上的荧光原位杂交定位 | 第22-28页 |
·HSF-2 基因质粒提取 | 第22-24页 |
·实验耗材与试剂 | 第22-23页 |
·HSF-2 基因质粒提取步骤 | 第23-24页 |
·HSF-2 基因的探针制备 | 第24-25页 |
·随机引物标记法制备探针 | 第24-25页 |
·探针预处理 | 第25页 |
·荧光原位杂交 | 第25-28页 |
·实验耗材与试剂 | 第25-27页 |
·染色体标本变性 | 第27页 |
·原位杂交 | 第27页 |
·洗脱、免疫检测与信号放大 | 第27-28页 |
·显微观察及显微照相 | 第28页 |
·杂交信号的定位 | 第28页 |
4 结果 | 第28-33页 |
·成纤维细胞的培养 | 第28-29页 |
·染色体核型制备条件的优化结果 | 第29-31页 |
·正常细胞 G2/M 期比例 | 第29页 |
·秋水仙碱不同作用时间下 G2/M 期所占比例 | 第29-30页 |
·不同浓度 nocodazole 和不同处理时间下 G2/M 期所占比例 | 第30-31页 |
·染色体核型制备结果 | 第31-32页 |
·HSF-2 基因的 BAC 质粒提取鉴定 | 第32页 |
·荧光原位杂交(FISH)结果 | 第32-33页 |
5 讨论 | 第33-38页 |
·成纤维细胞的培养 | 第33-34页 |
·实验用具的清洗和消毒 | 第33-34页 |
·有丝分裂同步化条件摸索 | 第34-36页 |
·秋水仙碱对细胞周期同步化的作用研究 | 第35页 |
·nocodazole 对细胞周期同步化的作用研究 | 第35-36页 |
·有丝分裂抑制剂秋水仙碱和 nocodazole 的比较 | 第36页 |
·影响染色体悬液制备的因素 | 第36-37页 |
·影响染色体制片的因素 | 第36-37页 |
·影响荧光原位杂交的主要因素 | 第37-38页 |
·实验主要试剂与作用时间的摸索 | 第37页 |
·荧光原位杂交洗脱时的注意事项 | 第37页 |
·影响荧光原位杂交实验结果的其他因素 | 第37-38页 |
6 结论与展望 | 第38-39页 |
·结论 | 第38页 |
·展望 | 第38-39页 |
致谢 | 第39-40页 |
参考文献 | 第40-44页 |
作者简介 | 第44页 |