| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-11页 |
| 第1章 绪言 | 第11-20页 |
| ·骨髓增殖性肿瘤概述 | 第11-13页 |
| ·真性红细胞增多症 | 第11页 |
| ·原发性血小板增多症 | 第11-12页 |
| ·原发性骨髓纤维化 | 第12页 |
| ·慢性髓细胞样白血病 | 第12页 |
| ·肥大细胞增多症 | 第12页 |
| ·慢性嗜酸性粒细胞白血病 | 第12-13页 |
| ·慢性中性粒细胞白血病 | 第13页 |
| ·TET 原癌基因家族成员 2（TET2）概述 | 第13-15页 |
| ·TET 原癌基因家族 | 第13页 |
| ·TET 原癌基因家族成员 2（TET2） | 第13-14页 |
| ·TET2 突变与骨髓增殖性肿瘤 | 第14-15页 |
| ·哺乳动物中的 DNA 甲基化和去甲基化 | 第15-19页 |
| ·DNA 的甲基化 | 第15-16页 |
| ·DNA 的去甲基化机制 | 第16-19页 |
| ·研究意义 | 第19-20页 |
| 第2章 TET2 C 末端的克隆表达 | 第20-26页 |
| ·实验材料 | 第20-21页 |
| ·实验材料 | 第20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·引物设计 | 第21页 |
| ·TET2 C 末端片段的克隆 | 第21页 |
| ·pKS-TET2C 重组质粒的构建 | 第21-22页 |
| ·pGex-TET2C 重组质粒的构建 | 第22-23页 |
| ·pGex-TET2C 质粒的转化和表达 | 第23页 |
| ·结果与讨论 | 第23-25页 |
| ·TET2 C 末端片段的克隆 | 第23-24页 |
| ·pKS-TET2C 重组质粒的构建 | 第24页 |
| ·pGex-TET2 C 重组质粒的构建 | 第24页 |
| ·pGex-TET2C 质粒的转化和表达 | 第24-25页 |
| ·本章小结 | 第25-26页 |
| 第3章 GST-TET2C 融合蛋白的分离纯化 | 第26-30页 |
| ·实验材料 | 第26-27页 |
| ·实验试剂 | 第26页 |
| ·缓冲液配方 | 第26页 |
| ·实验仪器 | 第26-27页 |
| ·实验方法 | 第27页 |
| ·目的蛋白的粗提取 | 第27页 |
| ·包涵体蛋白预处理 | 第27页 |
| ·制备电泳柱胶及仪器安装 | 第27页 |
| ·目的蛋白的分离 | 第27页 |
| ·SDS-PAGE 样品检测 | 第27页 |
| ·目的蛋白的浓缩 | 第27页 |
| ·结果与讨论 | 第27-29页 |
| ·蛋白分离纯化电泳结果 | 第27-29页 |
| ·目的蛋白浓缩 | 第29页 |
| ·本章小结 | 第29-30页 |
| 第4章 Anti-TET2C 多克隆抗体的制备 | 第30-35页 |
| ·实验用品 | 第30页 |
| ·实验动物 | 第30页 |
| ·主要试剂 | 第30页 |
| ·主要仪器 | 第30页 |
| ·实验方法 | 第30-33页 |
| ·免疫新西兰白兔 | 第30-31页 |
| ·Anti-TET2C 多克隆抗体效价的检测 | 第31页 |
| ·Anti-TET2C 多克隆抗体灵敏度的检测 | 第31页 |
| ·Anti-TET2C 多克隆抗体的纯化 | 第31-32页 |
| ·纯化后 Anti-TET2C 多克隆抗体特异性的检测 | 第32-33页 |
| ·实验结果与讨论 | 第33-34页 |
| ·免疫前后兔血清抗体的效价检测 | 第33页 |
| ·免疫前后兔血清对 GST-TET2C 的灵敏度 | 第33页 |
| ·纯化后抗体特异性的检测 | 第33-34页 |
| ·本章小结 | 第34-35页 |
| 第5章 Anti-TET2C 单克隆抗体的制备 | 第35-43页 |
| ·实验用品 | 第35-36页 |
| ·实验动物 | 第35页 |
| ·主要试剂 | 第35页 |
| ·主要仪器 | 第35-36页 |
| ·实验方法 | 第36-40页 |
| ·实验动物 BALB/c 小鼠的免疫 | 第36页 |
| ·小鼠脾细胞、骨髓瘤细胞(SP2/0)、饲养层细胞的制备 | 第36-37页 |
| ·细胞融合 | 第37-38页 |
| ·筛选杂交瘤细胞 | 第38-39页 |
| ·杂交瘤细胞单克隆化 | 第39页 |
| ·小鼠腹水的制备 | 第39-40页 |
| ·检测小鼠腹水效价 | 第40页 |
| ·纯化单克隆抗体 | 第40页 |
| ·单克隆抗体特异性的检测 | 第40页 |
| ·实验结果与讨论 | 第40-41页 |
| ·杂交瘤细胞的筛选及单克隆化 | 第40页 |
| ·小鼠腹水抗体效价的检测 | 第40-41页 |
| ·SDS-PAGE 检测单克隆抗体的纯度 | 第41页 |
| ·Western blot 检测单克隆抗体的特异性 | 第41页 |
| ·本章小结 | 第41-43页 |
| 第6章 结论 | 第43-44页 |
| ·TET2 C 末端蛋白的克隆表达 | 第43页 |
| ·GST-TET2C 蛋白的分离纯化 | 第43页 |
| ·Anti-TET2C 多克隆抗体的制备及纯化 | 第43页 |
| ·Anti-TET2C 单克隆抗体的制备及纯化 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-51页 |
| 附录 | 第51-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 致谢 | 第59页 |
