中文摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第1章 引言 | 第12-18页 |
1. hPL 的结构 | 第12-15页 |
·hPL 基因 | 第12-14页 |
·hPL 分子 | 第14-15页 |
2. hPL 的生理作用 | 第15-16页 |
·生长促进作用 | 第15页 |
·催乳作用 | 第15页 |
·外周血管收缩作用 | 第15-16页 |
·对瘦素分泌的影响 | 第16页 |
·对单核细胞 CD163、CD14 表达的影响 | 第16页 |
3. hPL 的临床意义 | 第16-17页 |
4. 本研究的主要内容 | 第17-18页 |
第2章 材料方法 | 第18-37页 |
1. 主要材料试剂及实验设备 | 第18-24页 |
·菌株和质粒 | 第18页 |
·主要试剂 | 第18-19页 |
·各种试剂的配制 | 第19-23页 |
·实验动物 | 第23页 |
·主要仪器设备 | 第23-24页 |
2. 实验方法 | 第24-37页 |
·hPL 基因的克隆及原核表达载体 pQE30-hPL 的构建 | 第24-30页 |
·hPL 的表达、纯化、复性及其活性鉴定 | 第30-35页 |
·hPL 多克隆抗体的制备 | 第35-37页 |
第3章 实验结果 | 第37-49页 |
1. hPL 基因的克隆 | 第37页 |
2. TA 克隆 | 第37-39页 |
·pMD18-T 克隆载体 | 第37-38页 |
·重组克隆载体 pMD18-T-hPL 鉴定 | 第38-39页 |
3. 原核表达载体 PQE-30-hPL 的构建 | 第39-43页 |
·pQE-30 质粒 | 第39-40页 |
·重组质粒的酶切鉴定 | 第40-41页 |
·重组质粒的测序鉴定 | 第41页 |
·hPL-A 基因 CDS 序列 | 第41-42页 |
·hPL 的氨基酸序列及分子内二硫键 | 第42-43页 |
4. hPL 的表达 | 第43-44页 |
·表达产物的鉴定 | 第43-44页 |
·诱导剂浓度及诱导时间的确定 | 第44页 |
5. 包涵体 hPL 蛋白的纯化鉴定 | 第44-46页 |
6. 原核表达 hPL 蛋白的特异性鉴定 | 第46-47页 |
·Western blot 分析 | 第46页 |
·ELISA 分析 | 第46-47页 |
7. 原核表达 hPL 蛋白的复性鉴定 | 第47页 |
8. hPL 多克隆抗体的检测 | 第47-49页 |
第4章 讨论 | 第49-53页 |
第5章 结论 | 第53-54页 |
参考文献 | 第54-61页 |
作者简介及在学期间所取得的科研成果 | 第61-62页 |
致谢 | 第62页 |