| 中文摘要 | 第1-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 符号说明 | 第15-18页 |
| 第一章 绪论 | 第18-39页 |
| ·糖类概述 | 第19-21页 |
| ·糖类的组成与分类 | 第20页 |
| ·糖类的结构多样性 | 第20-21页 |
| ·糖生物学平台技术 | 第21-28页 |
| ·糖生物学工具酶 | 第21-24页 |
| ·功能糖的分离纯化 | 第24-26页 |
| ·糖阵列技术 | 第26-28页 |
| ·糖类的合成 | 第28-31页 |
| ·寡糖的化学合成 | 第28-29页 |
| ·寡糖的酶法合成 | 第29-31页 |
| ·糖核苷酸及其合成 | 第31-37页 |
| ·生物体内的糖核苷酸 | 第31-32页 |
| ·糖核苷酸的化学合成 | 第32-34页 |
| ·糖核苷酸的生物合成途径 | 第34-37页 |
| ·非天然糖在糖生物学研究中的意义 | 第37-39页 |
| 第二章 一锅法合成糖核苷酸 | 第39-68页 |
| ·引言 | 第39-40页 |
| ·实验材料 | 第40-43页 |
| ·载体和菌株 | 第40-41页 |
| ·酶、试剂和耗材 | 第41页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第41-43页 |
| ·主要仪器 | 第43页 |
| ·实验方法 | 第43-55页 |
| ·拟南芥UDP-糖焦磷酸化酶基因(AtUSP)的克隆 | 第43-49页 |
| ·重组质粒pET15b/AtUSP转化E.coli BL21(DE3) | 第49页 |
| ·AtUSP和SpGa1K的诱导表达纯化 | 第49-53页 |
| ·AtUSP酶活检测 | 第53页 |
| ·薄层层析(TLC)检测酶活 | 第53页 |
| ·AtUSP酶活的毛细管电泳检测 | 第53-54页 |
| ·一锅法合成UDP-Gal验证 | 第54页 |
| ·一锅法合成合成UDP-糖条件探索 | 第54-55页 |
| ·一锅法合成不同UDP-糖 | 第55页 |
| ·结果与讨论 | 第55-67页 |
| ·AtUSP重组表达载体的构建 | 第55-57页 |
| ·AtUSP和SpGalK的表达纯化 | 第57-60页 |
| ·AtUSP酶活检测 | 第60-61页 |
| ·一锅法合成UDP-Gal验证 | 第61-63页 |
| ·一锅法反应条件优化 | 第63-64页 |
| ·一锅法合成多种UDP-糖 | 第64-67页 |
| ·本章小结 | 第67-68页 |
| 第三章 AtUSP的NTPs底物广泛性及动力学研究 | 第68-80页 |
| ·引言 | 第68页 |
| ·实验材料 | 第68-69页 |
| ·菌株 | 第68-69页 |
| ·试剂耗材 | 第69页 |
| ·培养基和缓冲液 | 第69页 |
| ·主要仪器 | 第69页 |
| ·实验方法 | 第69-73页 |
| ·AtUSP表达纯化 | 第69页 |
| ·AtUSP的NTPs底物特异性性研究 | 第69-70页 |
| ·AtUSP对UTP、dUTP和dTTP的动力学参数测定 | 第70-71页 |
| ·dUDP-Glc和dTDP-Glc的小规模制备 | 第71-73页 |
| ·结果和讨论 | 第73-78页 |
| ·AtUSP对NTPs底物识别特异性研究 | 第73-75页 |
| ·AtUSP对UTP、dUTP和dTTP的动力学参数测定 | 第75-78页 |
| ·dUDP-Glc和dTDP-Glc的小规模制备 | 第78页 |
| ·本章小结 | 第78-80页 |
| 全文总结 | 第80-82页 |
| 附录和附图 | 第82-89页 |
| 参考文献 | 第89-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第103-104页 |
| 附件 | 第104页 |
