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pcDNA3.1-PDGF β -GAL在Neuro-2a细胞的表达及其对细胞增殖和周期的影响

中文摘要第1-8页
ABSTRACT第8-12页
前言第12-14页
材料和方法第14-43页
 1 实验材料第14-23页
   ·细胞第14页
   ·菌株和质粒第14页
   ·主要试剂第14-17页
   ·主要仪器第17-18页
   ·主要试剂配制第18-23页
 2 实验方法第23-43页
   ·目的片段 PDGF- GAL 的扩增第23-24页
   ·重组质粒PMDT-PDGF-GAL的构建及鉴定第24-28页
   ·重组表达质粒PCDNA 3.1-PDGF-GAL的构建第28-30页
   ·NEURO - 2 A细胞的常规培养第30-31页
   ·细胞生长曲线的绘制 ( MTT 法)第31页
   ·P CDNA 3.1-PDGF-GAL 瞬时转 染 NEURO- 2A(LIPFECTAMINE~(TM)2000 转染试剂 )第31-32页
   ·建立稳定转染小鼠 PDGF-GAL 的 NEURO-2A 细胞系:第32-33页
   ·细胞转录水平的鉴定(包括瞬时转染后和稳转单克隆细胞)第33-36页
   ·转染 后 GA L 蛋白水平的测定第36-41页
   ·内源性过表达 GA L 对 NE U RO -2 A细胞的增殖分析第41页
   ·内源性过表达 GA L 对 NE U RO -2 A细胞周期的分析第41-42页
   ·统计学处理第42-43页
结果第43-52页
 1 重组质粒PMDT-PDGF-GAL的鉴定第43页
 2 重组表达质粒PCDNA-PDGF-GAL的鉴定第43-44页
 3 NEURO-2A细胞生长曲线的绘制第44-45页
 4 脂质体法转染后GAL转录水平的鉴定第45-47页
   ·瞬时转染后不同时间段GAL转录水平测定第45-46页
   ·稳转后不同细胞克隆中转录水平的鉴定第46-47页
 5 脂质体法转染后GAL蛋白表达水平的鉴定第47-48页
   ·瞬时转染后不同时间 GAL 表达水平第47-48页
   ·细胞克隆中GAL 表达水平的鉴定第48页
 6 内源性过表达 GAL 对 NEURO-2A 细胞的增殖分析第48-49页
 7 内源性过表达 GAL 对 NEURO-2A 细胞周期分析第49-50页
 8 内源性过表达GAL以及外源GAL对NEURO-2A细胞的凋亡分析第50-51页
 9 转染前后细胞形态的变化第51-52页
讨论第52-56页
结论第56-57页
参考文献第57-60页
综述第60-69页
 参考文献第67-69页
个人简历第69-70页
致谢第70页

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