| 目录 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-16页 |
| 材料和方法 | 第16-50页 |
| 一、实验材料 | 第16-32页 |
| 1. 组织和细胞系 | 第16-20页 |
| 2. 工具酶及分子量 Marker | 第20页 |
| 3. 主要生化试剂 | 第20-22页 |
| 4. 试剂盒 | 第22页 |
| 5. 质粒 | 第22-27页 |
| 6. 引物 | 第27-28页 |
| 7. 生物信息学分析软件 | 第28页 |
| 8. 主要仪器 | 第28-32页 |
| 二. 实验方法 | 第32-50页 |
| 1. 细胞实验 | 第32-37页 |
| ·细胞培养 | 第32页 |
| ·细胞复苏 | 第32页 |
| ·细胞传代和扩大培养 | 第32页 |
| ·细胞冻存 | 第32-33页 |
| ·细胞转染 | 第33-34页 |
| ·细胞增殖检测 | 第34-35页 |
| ·侵袭和迁移实验 | 第35页 |
| ·流式检测细胞凋亡 | 第35-36页 |
| ·流式检测细胞周期 | 第36-37页 |
| 2. Real-time PCR | 第37-40页 |
| ·Trizol 法提取组织和细胞总 RNA | 第37-38页 |
| ·RNA 质量的检测 | 第38页 |
| ·M-MLV 合成 cDNA 第一链 | 第38-40页 |
| 3. Western blot | 第40-42页 |
| ·蛋白的提取及定量 | 第40页 |
| ·蛋白质电泳 | 第40页 |
| ·蛋白质电转移 | 第40-41页 |
| ·PVDF 膜封闭及目的抗体孵育 | 第41-42页 |
| 4. miRNA 的 PAGE 及 Northern 杂交 | 第42-45页 |
| 5. 琼脂糖凝胶电泳及其胶产物回收 | 第45页 |
| 6. 质粒的提取及大肠杆菌感受态细胞的制备及转化 | 第45-48页 |
| 7. HE 染色 | 第48-49页 |
| 8. 双荧光报告实验 | 第49页 |
| 9. 统计学分析 | 第49-50页 |
| 结果 | 第50-66页 |
| 1. HE 染色比较脑胶质瘤组织与瘤旁组织的形态差异 | 第50页 |
| 2. 通过 miRNA 芯片挑选出表达明显上调的 miR-23a | 第50-52页 |
| 3. 实时荧光定量 PCR 技术检测 100 对胶质瘤标本中 miR-23a 的表达情况 | 第52-54页 |
| 4. 调查 miR-23a 在胶质瘤细胞系中的表达情况 | 第54-55页 |
| 5. 在胶质瘤细胞 U87 中敲低 miR-23a 的表达 | 第55-56页 |
| 6. 敲低 miR-23a 能抑制 U87 细胞的增殖 | 第56页 |
| 7. 敲低 miR-23a 能抑制 U87 细胞的周期 | 第56-57页 |
| 8. 敲低 miR-23a 能抑制 U87 细胞的凋亡 | 第57-58页 |
| 9. 敲低 miR-23a 能抑制 U87 细胞的迁移 | 第58-59页 |
| 10. 敲低 miR-23a 能抑制 U87 细胞的侵袭 | 第59-60页 |
| 11. 预测 miR-23a 的靶基因并通过双荧光报告实验验证 | 第60-62页 |
| 12. Western Blot 验证 APAF1 是 miR-23a 的靶基因 | 第62-63页 |
| 13 过表达 APAF1 能够抑制 U87 细胞的增殖和促进细胞凋亡 | 第63-66页 |
| 讨论 | 第66-72页 |
| 结论 | 第72-73页 |
| 本研究的创新点 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-78页 |
| 综述 | 第78-85页 |
| 参考文献 | 第82-85页 |
| 附录 | 第85-87页 |
| 个人简介 | 第87-88页 |
| 致谢 | 第88页 |
