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ω-醇溶蛋白基因的克隆及通过RNAi抑制小麦α-醇溶蛋白基因家族表达研究

摘要第1-8页
ABSTRACT第8-10页
符号说明第10-11页
第一章 文献综述第11-26页
   ·小麦种子储藏蛋白的组成及分类第11-12页
   ·小麦醇溶蛋白的染色体定位第12-13页
   ·α-、ω-醇溶蛋白的研究现状第13-19页
     ·α-醇溶蛋白第14-15页
     ·ω-醇溶蛋白第15-17页
     ·α-、ω-醇溶蛋白同乳糜泻疾病之间的关系第17-19页
   ·RNA干扰技术与小麦遗传育种的关系及应用第19-25页
     ·RNAi的分子机制及技术路线第20-21页
     ·RNAi技术在小麦功能基因组学研究中的应用第21-23页
     ·RNAi技术在小麦品质改良研究中的应用第23-24页
     ·RNAi在小麦研究中的不足第24-25页
   ·本研究的目的及意义第25-26页
第二章 小麦体细胞杂种及双亲ω-醇溶蛋白基因的分离第26-39页
   ·材料与方法第26-32页
     ·植物材料第26页
     ·ω-醇溶蛋白基因ORFs的克隆和测序第26-32页
   ·实验结果第32-37页
     ·小麦体细胞杂种渐渗系Ⅱ-12及双亲中ω-醇溶蛋白基因分离和序列分析第32-36页
     ·ω-醇溶蛋白基因家族的进化分析第36-37页
   ·讨论第37-39页
     ·利用PCR技术扩增ω-醇溶蛋白基因第37页
     ·来自于小麦体细胞杂种渐渗系Ⅱ-12的ω-醇溶蛋白基因的变异分析第37-38页
     ·ω-醇溶蛋白可能的功能第38-39页
第三章 α/β-醇溶蛋白基因RNAi载体的构建及转化小麦的研究第39-74页
   ·材料与方法第39-56页
     ·植物材料第39页
     ·RNA干扰载体pTCK303-Ubi-AR12和pTCK303-Ubi-AR34的构建第39-45页
     ·植物表达载体p3301-Ubi-AR12与p3301-Ubi-AR34的构建第45-47页
     ·农杆菌介导的小麦苗端转化第47-49页
     ·转基因植株的PCR筛选第49-50页
     ·转基因小麦籽粒醇溶蛋白的A-PAGE分析第50-53页
     ·利用SDS-PAGE分析籽粒麦谷蛋白的变化第53-56页
   ·结果第56-71页
     ·α-醇溶蛋白基因RNA干扰片段的确定第56-57页
     ·RNA干扰载体pTCK303-Ubi-AR12和pTCK303-Ubi-AR34的构建第57-64页
     ·植物表达载体p3301-ub-AR12与p3301-ubi-AR34的构建第64-66页
     ·苗端转化法转化小麦及转基因植株的检测第66-68页
     ·转基因小麦籽粒醇溶蛋白的A-PAGE条带分析第68-69页
     ·转基因小麦籽粒谷蛋白的SDS-PAGE分析第69-71页
   ·讨论第71-74页
     ·农杆菌转化问题第71页
     ·影响RNAi介导的基因沉默问题第71-74页
参考文献第74-84页
致谢第84-85页
硕士在读期间发表及投稿的文章第85页
硕士在读期间参加的学术会议第85页
硕士期间所获奖励第85-86页
学位论文评阅及答辩情况表第86页

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