拟态弧菌OmpU抗原模拟表位的筛选鉴定及其免疫特性分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 图表目录 | 第9-10页 |
| 本论文常用中英文缩写词 | 第10-11页 |
| 文献综述 | 第11-17页 |
| 1 拟态弧菌的研究进展 | 第11页 |
| 2 抗原表位的研究 | 第11-12页 |
| 3 噬菌体随机肽库技术的筛选原理、方法与应用 | 第12-15页 |
| 4 展望 | 第15-17页 |
| 引言 | 第17-18页 |
| 1 材料与方法 | 第18-28页 |
| ·实验菌株与噬菌体随机肽库试剂盒 | 第18页 |
| ·酶类与主要试剂 | 第18页 |
| ·实验动物 | 第18页 |
| ·主要培养基与溶液的配制 | 第18-20页 |
| ·LB 培养基 | 第18页 |
| ·蛋白电泳检测所需溶液 | 第18-19页 |
| ·Protein G 亲和层析所需溶液 | 第19页 |
| ·噬菌体肽库筛选所需溶液 | 第19-20页 |
| ·ELISA 实验所需溶液 | 第20页 |
| ·主要仪器 | 第20页 |
| ·兔抗重组 OmpUa 抗体的提纯 | 第20-22页 |
| ·免疫血清硫酸铵分级沉淀 | 第20-21页 |
| ·透析除盐 | 第21页 |
| ·IgG 的纯化 | 第21页 |
| ·纯化后抗体的浓度、纯度和效价测定 | 第21-22页 |
| ·OmpU 蛋白模拟表位的筛选与鉴定 | 第22-25页 |
| ·噬菌体的滴度测定 | 第22页 |
| ·抗体的包被及封闭 | 第22页 |
| ·亲和筛选 | 第22-23页 |
| ·洗脱噬菌体的扩增与纯化 | 第23页 |
| ·重复筛选 | 第23页 |
| ·噬菌体贮液的制备 | 第23-24页 |
| ·噬菌体阳性克隆的鉴定 | 第24-25页 |
| ·阳性噬菌体克隆 DNA 测序与序列分析 | 第25-26页 |
| ·阳性噬菌体克隆单链 DNA 的提取 | 第25页 |
| ·序列测定与分析 | 第25-26页 |
| ·模拟表位噬菌体克隆的免疫特性测定 | 第26-28页 |
| ·模拟表位噬菌体克隆的免疫原性测定 | 第26-27页 |
| ·模拟表位噬菌体克隆的免疫保护性测定 | 第27-28页 |
| 2 结果与分析 | 第28-36页 |
| ·兔抗重组 OmpUa 抗体的纯化 | 第28页 |
| ·噬菌体肽库的筛选效率 | 第28-29页 |
| ·多抗筛选克隆的双夹心 ELISA 鉴定结果 | 第29-30页 |
| ·阳性噬菌体克隆的竞争 ELISA 鉴定结果 | 第30-32页 |
| ·多抗筛选鉴定的阳性噬菌体克隆的序列分析 | 第32-33页 |
| ·模拟表位的免疫原性 | 第33-34页 |
| ·模拟表位的免疫保护性 | 第34-36页 |
| 3 讨论 | 第36-39页 |
| ·影响兔抗重组 OmpUa 多克隆抗体纯化的因素 | 第36页 |
| ·噬菌体肽库筛选的靶分子选择与筛选条件优化 | 第36-37页 |
| ·阳性噬菌体克隆的鉴定与模拟表位的确定 | 第37-38页 |
| ·携带模拟表位的噬菌体克隆的免疫特性 | 第38-39页 |
| 结论 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-45页 |
| 附录 | 第45-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
