| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 一、文献综述 | 第9-14页 |
| 1 基因选择性表达 | 第9页 |
| 2 LHR研究进展 | 第9-11页 |
| ·LHR基因的生理作用 | 第9页 |
| ·LHR基因的结构和LHR蛋白质结构 | 第9-11页 |
| 3 黑线仓鼠研究现状 | 第11-12页 |
| 4 实时荧光定量PCR技术及其应用 | 第12-13页 |
| ·荧光定量PCR技术的原理 | 第12页 |
| ·实时荧光定量PCR染料 | 第12-13页 |
| ·实时荧光定量技术的定量法 | 第13页 |
| ·实时荧光定量技术实验条件的优化 | 第13页 |
| 5 研究目的及意义 | 第13-14页 |
| 二、研究报告 | 第14-44页 |
| (一) 黑线仓鼠睾丸曲细精管的形态学观察 | 第14-17页 |
| 1 材料与方法 | 第14-15页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第14页 |
| ·组织取材 | 第14页 |
| ·石蜡包埋与切片 | 第14-15页 |
| ·切片和裱片 | 第15页 |
| ·HE染色 | 第15页 |
| 2 实验结果 | 第15-16页 |
| 3 分析讨论 | 第16-17页 |
| (二) 黑线仓鼠LHR部分序列的克隆与分析 | 第17-31页 |
| 1 材料与方法 | 第17-21页 |
| ·采样 | 第17页 |
| ·主要试剂及仪器 | 第17-18页 |
| ·黑线仓鼠基因组DNA的提取 | 第18-19页 |
| ·LHR引物设计 | 第19页 |
| ·LHR目的片段的扩增及回收 | 第19-20页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备 | 第20-21页 |
| ·阳性克隆的鉴定及测序 | 第21页 |
| ·数据分析 | 第21页 |
| 2 实验结果 | 第21-23页 |
| ·黑线仓鼠基因组DNA提取结果 | 第22页 |
| ·引物退火温度检测结果 | 第22页 |
| ·LHR外显子11部分序列PCR扩增结果 | 第22-23页 |
| ·LHR外显子11部分序列菌液PCR扩增结果 | 第23页 |
| ·测序结果 | 第23页 |
| 3 分析及讨论 | 第23-31页 |
| ·测序及序列分析 | 第23-24页 |
| ·氨基酸的理化性质及三级结构 | 第24-25页 |
| ·同源序列比对 | 第25-26页 |
| ·进化树分析 | 第26-29页 |
| ·核苷酸序列建树分析 | 第26-28页 |
| ·氨基酸序列建树分析 | 第28-29页 |
| ·讨论 | 第29-31页 |
| (三) 黑线仓鼠LHR在不同组织器官中的表达差异 | 第31-44页 |
| 1 材料与试剂 | 第31-32页 |
| ·材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31-32页 |
| ·主要溶液的配制 | 第32页 |
| ·实验用具处理 | 第32页 |
| 2 方法 | 第32-35页 |
| ·各组织器官总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·检测总RNA的质量 | 第33页 |
| ·总RNA的反转录 | 第33页 |
| ·LHR目的片段的扩增及内参基因检测cDNA的完整性 | 第33-34页 |
| ·目的片段的回收、连接、转化及序列测定 | 第34页 |
| ·标定cDNA浓度 | 第34-35页 |
| ·实时荧光定量PCR反应条件的优化 | 第35页 |
| ·实时荧光定量PCR反应体系及反应条件 | 第35页 |
| 3 实验结果 | 第35-43页 |
| ·总RNA琼脂糖凝胶电泳图 | 第35-36页 |
| ·LHR目的片段和内参扩增电泳图片 | 第36页 |
| ·测序结果 | 第36页 |
| ·LHR扩增效率曲线和标准曲线 | 第36-37页 |
| ·LHR和内参融解曲线 | 第37-38页 |
| ·各组织器官循环数与荧光强度的关系 | 第38-41页 |
| ·秋、冬季LHR在各组织器官中相对表达量的比较 | 第41-42页 |
| ·秋、冬季LHR在不同器官的相对表达量 | 第42-43页 |
| 4 讨论 | 第43-44页 |
| 论文的创新点 | 第44-45页 |
| 参考文献 | 第45-50页 |
| 硕士期间主要工作 | 第50-51页 |
| 致谢 | 第51页 |