| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-11页 |
| 1 前言 | 第11-16页 |
| ·植物双元表达载体的组成、构建机制和研究进展 | 第11-12页 |
| ·植物双元表达载体的组成及构建机制 | 第11页 |
| ·植物双元载体构建的研究基础及进展 | 第11-12页 |
| ·位点特异性重组系统及融合PCR技术 | 第12-14页 |
| ·位点特异性重组系统 | 第12-13页 |
| ·载体构建技术-融合PCR | 第13-14页 |
| ·真核生物启动子结构概况 | 第14-15页 |
| ·基于AlcR的alc乙醇诱导系统 | 第15-16页 |
| ·本试验的研究目的和意义 | 第16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-29页 |
| ·植物材料、菌株、载体、酶和试剂 | 第16页 |
| ·pYBA双元载体的构建 | 第16-27页 |
| ·载体骨架的构建 | 第17-19页 |
| ·LoxP-FRT融合位点和多克隆位点MCS的添加 | 第19-20页 |
| ·植物选择标记基因的改造 | 第20-22页 |
| ·植物筛选标记基因表达框的构建 | 第22-24页 |
| ·新双元载体pYBA系列的离体删除验证 | 第24页 |
| ·拟南芥的转化与鉴定 | 第24-27页 |
| ·基于AlcR的alcM乙醇诱导系统的构建 | 第27-29页 |
| ·报告基因gus的插入和alcM(SM)启动子的克隆 | 第27页 |
| ·SM启动子序列分析 | 第27页 |
| ·含转录调节基因AlcR表达框的pBBBast-SMGR载体构建 | 第27页 |
| ·pBBBast-SMGR载体的拟南芥转化及转基因阳性苗筛选检测 | 第27-28页 |
| ·转基因植株的GUS鉴定 | 第28页 |
| ·GUS诱导表达的检测 | 第28-29页 |
| 3 结果与分析 | 第29-39页 |
| ·pYBA双元载体 | 第29-34页 |
| ·pYBA载体骨架的构建 | 第29-31页 |
| ·LoxP-FRT融合位点、MCS和植物筛选标记基因表达框的添加 | 第31-32页 |
| ·pYBA载体系列的离体删除鉴定 | 第32-33页 |
| ·pYBA载体系列的植物转化与鉴定 | 第33-34页 |
| ·基于AlcR的SM醇诱导系统 | 第34-39页 |
| ·SM启动子及序列分析 | 第34-36页 |
| ·基于AlcR的SM醇诱导系统的构建 | 第36-37页 |
| ·pBBBast-SMGR转基因植株筛选及PCR检测 | 第37-38页 |
| ·转基因植株的GUS鉴定 | 第38页 |
| ·GUS诱导表达检测 | 第38-39页 |
| 4 讨论 | 第39-42页 |
| ·pYBA新双元载体系列 | 第39-41页 |
| ·源于构巢曲霉的SM启动子 | 第41页 |
| ·基于AlcR的SM醇诱导系统 | 第41-42页 |
| 5 结论 | 第42-43页 |
| 致谢 | 第43-44页 |
| 参考文献 | 第44-53页 |
| 附录 | 第53-54页 |
| 作者简介 | 第54页 |
