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奶牛性别控制技术研究

摘要第1-10页
abstract第10-12页
第一章 哺乳动物性别决定的分子机理及相关基因进展第12-23页
   ·性别决定分子机理第12-14页
     ·性别决定发育机理第13页
     ·性别决定遗传学机理第13-14页
   ·性别决定的相关基因第14-22页
     ·与XY性别发育相关的基因第14-20页
     ·与XX性别发育相关的基因第20-22页
   ·小结与展望第22-23页
第二章 性别控制与鉴定主要途经研究概述第23-33页
   ·分离X和Y精子的方法第23-26页
     ·电泳法第24页
     ·免疫学分离法第24页
     ·流式细胞分离法第24-26页
   ·早期胚胎性别鉴定的研究进展第26-30页
     ·细胞遗传学方法第26页
     ·免疫学方法第26-27页
     ·X染色体相关酶法第27页
     ·分子生物学方法第27-30页
   ·其他方法第30-31页
   ·应用与展望第31-33页
第三章 利用H-Y抗体实现奶牛早期胚胎性别控制的研究第33-43页
   ·材料第33-35页
     ·实验材料第33-34页
     ·试验试剂第34页
     ·仪器与设备第34-35页
   ·方法第35-38页
     ·抗原的制备第35页
     ·受体免疫第35-36页
     ·H-Y抗体的检测第36页
     ·牛跖胎的获得第36页
     ·与H-Y抗体的共培养以鉴定胚胎性别第36-37页
     ·PCR法鉴定奶牛早期胚胎性别第37-38页
   ·结果第38-40页
     ·直接凝集反应第38页
     ·不同免疫方法产生抗体的情况第38-39页
     ·与H-Y抗体共培养鉴定胚胎性别第39-40页
   ·讨论第40-42页
   ·小结第42-43页
第四章 性控精液体外生产奶牛胚胎的研究第43-54页
   ·材料与方法第43-46页
     ·主要试剂和仪器第43-44页
     ·牛卵母细胞的采集与体外成熟第44页
     ·精子获能与体外受精第44-45页
     ·胚胎培养第45页
     ·PCR技术鉴定IVF胚胎性别第45页
     ·实验设计第45-46页
     ·数据处理第46页
   ·结果第46-50页
     ·成熟液中添加EGF和IGF-Ⅰ对卵母细胞成熟和IVF胚胎发育的影响第46-47页
     ·性控精子处理方法对IVF胚胎发育的影响第47页
     ·性控精子密度对IVF胚胎发育的影响第47-48页
     ·不同培养液对性控胚胎体外发育的影响第48-49页
     ·性控精液与普通精液IVF胚胎发育率和性别鉴定第49-50页
   ·讨论第50-52页
   ·小结第52-54页
第五章 卵巢运输温度对性控精液体外受精及受精后胚胎发育的影响第54-63页
   ·材料和方法第55-58页
     ·主要仪器设备第55页
     ·主要试剂第55页
     ·卵母细胞的采集和分级第55-56页
     ·卵母细胞的体外成熟培养第56页
     ·卵母细胞核相染色及判断第56页
     ·精子获能与体外受精第56-57页
     ·受精胚胎的判断及培养第57页
     ·囊胚的凋亡染色第57页
     ·实时定量PCR第57-58页
     ·数据统计与分析第58页
   ·结果第58-60页
     ·卵巢运输温度对卵母细胞回收及成熟的影响第58-59页
     ·卵巢运输温度对性控精液体外受精及胚胎发育的影响第59页
     ·卵巢运输温度对性控精液体外受精囊胚内细胞凋亡的影响第59-60页
     ·卵巢运输温度对性控精液体外受精囊胚中Hsp70.1和Bax表达的影响第60页
   ·讨论第60-63页
第六章 牛性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎质量、胚胎发育及性控牛出生率的影响第63-74页
   ·材料与方法第64-68页
     ·主要试剂、仪器及材料第64-65页
     ·体外受精及其胚胎培养第65-66页
     ·牛胚胎的冷冻与复苏第66页
     ·囊胚的凋亡染色第66-67页
     ·囊胚细胞总数染色及差异染色第67页
     ·克隆囊胚的胚胎移植第67页
     ·实验设计第67-68页
     ·数据处理第68页
   ·结果第68-72页
     ·性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎体外发育的影响第68-69页
     ·性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎质量的影响--细胞凋亡检查第69-70页
     ·性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎质量的影响—囊胚细胞总数及ICM和TE细胞的比值(差异染色检查)第70-71页
     ·性别控制联合胚胎冷冻技术对胚胎体内发育及出生率的影响第71-72页
   ·讨论第72-74页
全文总结第74-75页
参考文献第75-87页
附录第87-92页
致谢第92-93页
作者简介第93页

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