马鼻肺炎灭活疫苗的研制及其免疫效果的研究
| 摘要 | 第1-11页 |
| Abstract | 第11-13页 |
| 1. 引言 | 第13-21页 |
| ·马鼻肺炎简介 | 第13页 |
| ·马疱疹病毒简介 | 第13-16页 |
| ·马疱疹病毒分离 | 第13-14页 |
| ·病毒的鉴定 | 第14页 |
| ·病原检测 | 第14-15页 |
| ·病毒粒子结构 | 第15页 |
| ·病毒生物学特性 | 第15-16页 |
| ·病毒理化特性 | 第16页 |
| ·马鼻肺炎流行病学 | 第16-17页 |
| ·国外流行情况 | 第16-17页 |
| ·国内流行情况 | 第17页 |
| ·马鼻肺炎的诊断与预防 | 第17-19页 |
| ·马鼻肺炎的诊断方法 | 第17-18页 |
| ·马鼻肺炎的预防 | 第18-19页 |
| ·疫苗株病毒 | 第19页 |
| ·目的与意义 | 第19-21页 |
| 2. 材料与方法 | 第21-32页 |
| ·细胞株、病毒株和实验动物 | 第21页 |
| ·实验所用菌种和质粒 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21-22页 |
| ·主要酶类及生化试剂 | 第21-22页 |
| ·主要细胞培养试剂 | 第22页 |
| ·主要试剂的配制 | 第22-23页 |
| ·实验仪器 | 第23页 |
| ·灭活疫苗制备工艺 | 第23-26页 |
| ·疫苗株繁育 | 第23-24页 |
| ·疫苗株鉴定 | 第24-25页 |
| ·疫苗株灭活 | 第25页 |
| ·疫苗株纯化 | 第25-26页 |
| ·荧光定量PCR检测方法建立 | 第26-28页 |
| ·引物设计 | 第26页 |
| ·目的片段扩增 | 第26-27页 |
| ·标准品制备与标准曲线绘制 | 第27页 |
| ·特异性试验 | 第27-28页 |
| ·敏感性试验 | 第28页 |
| ·重复性试验 | 第28页 |
| ·人工感染BALB/c小鼠检测试验 | 第28页 |
| ·间接ELISA检测方法建立 | 第28-30页 |
| ·疫苗株病毒的纯化及浓度测定 | 第28-29页 |
| ·抗原包被浓度和一抗血清最佳反应浓度 | 第29页 |
| ·抗原包被时间选择 | 第29页 |
| ·一抗血清最佳孵育时间选择 | 第29页 |
| ·酶标抗体最佳工作浓度选择 | 第29页 |
| ·酶标抗体最佳孵育时间选择 | 第29页 |
| ·最佳显色时间选择 | 第29页 |
| ·间接ELISA特异性试验 | 第29-30页 |
| ·BALB/c小鼠保护模型 | 第30-31页 |
| ·小鼠抗体消长规律试验 | 第30页 |
| ·疫苗株感染小鼠试验 | 第30-31页 |
| ·小鼠血清病毒中和试验 | 第31页 |
| ·不同佐剂免疫效果试验 | 第31页 |
| ·马体试验 | 第31-32页 |
| 3. 结果 | 第32-44页 |
| ·灭活疫苗制备工艺 | 第32-35页 |
| ·疫苗株繁育 | 第32-33页 |
| ·疫苗株鉴定 | 第33-34页 |
| ·疫苗株灭活 | 第34-35页 |
| ·疫苗株纯化 | 第35页 |
| ·荧光定量PCR检测方法建立 | 第35-38页 |
| ·EHV-8 gB基因扩增 | 第35页 |
| ·标准品制备及标准曲线绘制 | 第35-36页 |
| ·特异性试验 | 第36页 |
| ·敏感性试验 | 第36-37页 |
| ·重复性试验 | 第37页 |
| ·人工感染BALB/c小鼠检测试验 | 第37-38页 |
| ·间接ELISA检测方法建立 | 第38-40页 |
| ·疫苗株病毒的纯化及浓度测定 | 第38页 |
| ·抗原包被浓度和一抗血清最佳反应浓度 | 第38页 |
| ·抗原包被时间选择 | 第38页 |
| ·一抗血清最佳孵育时间选择 | 第38-39页 |
| ·酶标抗体最佳工作浓度选择 | 第39页 |
| ·酶标抗体最佳孵育时间选择 | 第39页 |
| ·最佳显色时间选择 | 第39-40页 |
| ·间接ELISA特异性试验 | 第40页 |
| ·BALB/c小鼠保护模型 | 第40-43页 |
| ·小鼠体内抗体消长规律 | 第40页 |
| ·小鼠二、三免后抗体水平检测 | 第40-41页 |
| ·攻毒后小鼠体重变化 | 第41页 |
| ·攻毒后小鼠肺组织内病毒DNA含量测定 | 第41-42页 |
| ·小鼠血清病毒中和试验 | 第42页 |
| ·不同佐剂免疫效果试验 | 第42-43页 |
| ·马体免疫试验 | 第43-44页 |
| 4. 讨论 | 第44-47页 |
| ·灭活疫苗制备工艺 | 第44页 |
| ·荧光定量PCR检测方法建立 | 第44-45页 |
| ·间接ELISA检测方法建立 | 第45页 |
| ·BALB/c小鼠保护模型建立 | 第45-46页 |
| ·马体免疫试验 | 第46-47页 |
| 5. 结论 | 第47-48页 |
| 致谢 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 附录 | 第55-56页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |
