| 中文摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 第一章 文献综述 | 第8-23页 |
| 1 一氧化氮与过氧亚硝酸 | 第8-10页 |
| 2 3-硝基化酪氨酸及其产生机理 | 第10-12页 |
| 3 3-硝基化酪氨酸的生物学效应以及疾病 | 第12-13页 |
| 4 琥珀酰辅酶A转移酶性质和功能 | 第13-17页 |
| 5 琥珀酰辅酶A转移酶疾病 | 第17-19页 |
| 6 硝基化酪氨酸研究策略 | 第19-23页 |
| ·蛋白质分离与富集策略 | 第19-21页 |
| ·质谱技术分析酪氨酸硝基化蛋白质/肽段 | 第21-23页 |
| 第二章 SCOT特异性硝基化Tyr~4、Tyr~(76)单克隆抗体制备和筛选 | 第23-39页 |
| 1 材料与试剂 | 第23页 |
| 2 实验方法 | 第23-28页 |
| ·半抗原设计和合成 | 第23-24页 |
| ·MALDI-TOF/TOF鉴定半抗原 | 第24页 |
| ·半抗原偶联钥孔血蓝蛋白 | 第24-25页 |
| ·小鼠免疫 | 第25页 |
| ·细胞融合 | 第25-26页 |
| ·杂交瘤细胞克隆化 | 第26页 |
| ·间接酶联免疫吸附法(ELISA)分析法测定抗体效价 | 第26-27页 |
| ·抗体亚类测定 | 第27页 |
| ·细胞冻存,复苏 | 第27页 |
| ·蛋白质的浓度测定(Bradford法) | 第27-28页 |
| 3 结果与分析 | 第28-36页 |
| ·MALDI-TOF/TOF检测半抗原 | 第28-30页 |
| ·半抗原偶联 | 第30-31页 |
| ·小鼠血清效价测定 | 第31-33页 |
| ·单克隆杂交瘤细胞第一次筛选 | 第33-34页 |
| ·单克隆杂交瘤细胞第二次筛选以及亚类测定 | 第34-36页 |
| 4 讨论 | 第36-39页 |
| 第三章 抗体CE-9、CE-14、CN-10、CN-11特异性描述 | 第39-52页 |
| 1 材料和试剂 | 第39页 |
| 2 实验方法(部分和第二章相同) | 第39-43页 |
| ·腹水的制备 | 第39页 |
| ·Protein A柱纯化抗体 | 第39-40页 |
| ·BL21大肠杆菌扩大培养 | 第40页 |
| ·重组SCOT蛋白表达纯化 | 第40-41页 |
| ·重组SCOT蛋白透析脱盐 | 第41页 |
| ·SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE) | 第41-42页 |
| ·考马斯亮蓝染色 | 第42页 |
| ·Western blot(湿转) | 第42-43页 |
| 3 结果和分析 | 第43-50页 |
| ·Sarkosyl纯化体外重组蛋白SCOT | 第43-44页 |
| ·过氧亚硝酸硝化体外重组蛋白SCOT | 第44页 |
| ·四株纯化抗体效价测定 | 第44-45页 |
| ·Western blot检测4株纯化抗体和硝基化/未硝基化SCOT之间的反应 | 第45-46页 |
| ·ELISA检测4株纯化抗体和4个SCOT硝基化位点之间的交叉反应 | 第46-47页 |
| ·Western blot,ELISA检测4株纯化抗体和多种硝基化蛋白之间的交叉反应 | 第47-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第四章 结论和展望 | 第52-53页 |
| 结论 | 第52页 |
| 展望 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录 | 第60-62页 |
| 致谢 | 第62-64页 |
| 作者简介 | 第64页 |
