| 符号说明 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 第一部分 TLR4基因编码区非同义SNPS对LPS刺激反应的研究 | 第11-53页 |
| ·前言 | 第11-13页 |
| ·材料与方法 | 第13-34页 |
| ·实验主要仪器 | 第13-14页 |
| ·实验主要试剂与材料 | 第14-16页 |
| ·菌株与细胞株 | 第14页 |
| ·实验用质粒 | 第14页 |
| ·实验用试剂盒 | 第14页 |
| ·实验用酶 | 第14-15页 |
| ·一般试剂 | 第15-16页 |
| ·主要试剂配制 | 第16-18页 |
| ·主要实验方法 | 第18-33页 |
| ·主要信息资源及分析工具 | 第18页 |
| ·huTLR4相关质粒构建 | 第18-28页 |
| (1) pEGFP-huTLR4基础质粒的构建 | 第18-25页 |
| (2) huTLR4突变质粒的构建 | 第25-28页 |
| ·细胞转染 | 第28-30页 |
| ·双荧光素酶报告基因活性检测 | 第30-31页 |
| ·Real-time FQ-PCR检测TNF-α、IL-6表达 | 第31-33页 |
| ·统计学分析 | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-50页 |
| ·人TLR4基因SNPs的基本概况 | 第34-35页 |
| ·huTLR4基因编码区非同义SNP生物信息学分析 | 第35-36页 |
| ·pEGFP-huTLR4基因的构建及鉴定 | 第36-40页 |
| ·pEGFP-huTLR4基因相关突变质粒的构建及鉴定 | 第40-46页 |
| ·双荧光素酶NF-κ B报告基因活性检测结果 | 第46-48页 |
| ·Real-time FQ-PCR检测TNF-α、IL-6变化 | 第48-50页 |
| ·讨论 | 第50-53页 |
| ·TLR4基因多态性与脓毒症 | 第50页 |
| ·TLR4信号通路与脓毒症 | 第50-52页 |
| ·A896G、C1196T、A2081G对LPS刺激呈低反应性 | 第52-53页 |
| 第二部分 MFHAS1调控TLR4信号通路的研究 | 第53-79页 |
| ·前言 | 第53-55页 |
| ·材料与方法 | 第55-69页 |
| ·实验主要仪器 | 第55-56页 |
| ·实验主要试剂与材料 | 第56-57页 |
| ·实验用小鼠 | 第56页 |
| ·实验用试剂盒 | 第56页 |
| ·WB相关抗体 | 第56页 |
| ·一般试剂 | 第56-57页 |
| ·主要试剂配制 | 第57-59页 |
| ·主要实验方法 | 第59-68页 |
| ·小鼠腹腔单核巨噬细胞培养及提取 | 第59-60页 |
| ·Real-time FQ-PCR检测MFHAS1表达 | 第60-63页 |
| ·RNA干扰技术 | 第63-66页 |
| ·WesternBlot印迹 | 第66-68页 |
| ·Real-time FQ-PCR检测TNF-α、IL-6、IL-12表达 | 第68页 |
| ·统计学分析 | 第68-69页 |
| ·结果 | 第69-76页 |
| ·TLR4~(-/-)小鼠腹腔单核巨噬细胞中MFHAS1表达下调 | 第69-70页 |
| ·RNA干扰效果检测 | 第70-72页 |
| ·TLR4基因敲除后p-P65、p-P38、pJNK、pERK表达减弱 | 第72-73页 |
| ·MFHAS1沉默后p-P65、p-P38、pJNK、pERK表达增强 | 第73-74页 |
| ·MFHAS1沉默后TNF-α、IL-6、IL-12表达量增加 | 第74-76页 |
| ·讨论 | 第76-79页 |
| ·MFHAS1与LRR结构域 | 第76页 |
| ·MFHAS1负调控TLR4信号通路 | 第76-79页 |
| 全文总结 | 第79-80页 |
| 参考文献 | 第80-86页 |
| 综述 | 第86-103页 |
| 参考文献 | 第95-103页 |
| 附录 | 第103-104页 |
| 致谢 | 第104-105页 |
