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EV71 3D真核表达载体构建及相互作用蛋白筛选的实验研究

英汉缩略语名词对照第1-8页
摘要第8-10页
ABSTRACT第10-13页
前言第13-15页
第一部分 EV713D 真核表达载体的构建与鉴定第15-33页
 1 材料与方法第15-27页
   ·试剂与仪器第15-17页
     ·主要试剂第15-16页
     ·主要仪器第16页
     ·溶液配制第16-17页
   ·实验方法第17-27页
     ·EV71 病毒扩增及 RNA 提取第17-18页
     ·RT-PCR 扩增 3D 基因第18-21页
     ·重组质粒 pcDNA3.0-3D-Flag-HA 的构建与鉴定第21-26页
     ·重组质粒 pcDNA3.0-3D-Flag-HA 及空载体 pcDNA3.0-Flag-HA的扩大培养和大量抽提第26-27页
 2 实验结果第27-30页
   ·EV71 病毒 RNA 提取的浓度测定第27页
   ·RT-PCR 产物初步鉴定第27-28页
   ·PCR 扩增 EV713D 基因结果第28-29页
   ·重组质粒 pcDNA3.0-3D-Flag-HA 双酶切鉴定第29页
   ·重组质粒测序鉴定第29-30页
   ·重组质粒 pcDNA3.0-3D-Flag-HA 大量抽提结果第30页
 3 讨论第30-33页
第二部分 EV713D 相互作用蛋白的筛选与鉴定第33-50页
 1 材料和方法第33-44页
   ·试剂与仪器第33-36页
     ·主要试剂第33-34页
     ·主要仪器第34页
     ·溶液配制第34-36页
   ·实验方法第36-44页
     ·融合蛋白 3D-Flag-HA 在 RD 细胞中的表达检测第36-39页
     ·免疫荧光实验检测重组载体瞬时转染效率第39-40页
     ·串联亲和纯化技术筛选 3D 聚合酶相互作用蛋白第40-42页
     ·免疫共沉淀和荧光共定位实验验证蛋白质的相互作用第42-44页
 2 实验结果第44-47页
   ·融合蛋白 3D-Flag-HA 在 RD 细胞中的表达第44页
   ·重组载体瞬时转染效率第44-45页
   ·3D 聚合酶相互作用蛋白的筛选第45-46页
   ·3D 聚合酶与 Cyclin G1 相互作用的验证第46-47页
 3 讨论第47-50页
全文总结第50-51页
参考文献第51-53页
文献综述:肠道病毒 71 型研究综述第53-60页
 参考文献第58-60页
致谢第60-61页
攻读硕士学位期间所获研究成果及论文发表情况第61-62页

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