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菲牛蛭抗凝血肽的酶法制备及其活性研究

摘要第1-7页
Abstract第7-13页
第一章 绪论第13-28页
   ·菲牛蛭简介第13-17页
     ·菲牛蛭的分布与生活习性第13-14页
     ·菲牛蛭的医学价值第14页
     ·菲牛蛭的化学成分第14-16页
     ·菲牛蛭的研究利用现状第16-17页
   ·水蛭素简介第17-19页
     ·水蛭素的结构与性质第17-18页
     ·水蛭素的抗凝血机理第18-19页
   ·生物活性肽的研究现状第19-25页
     ·酶法制备生物活性肽的研究概况第19-22页
     ·抗凝血活性肽的研究现状第22-25页
   ·大孔吸附树脂分离纯化生物活性肽的研究进展第25-26页
   ·本课题的立题背景和研究意义第26-27页
   ·主要研究内容第27-28页
第二章 菲牛蛭理化性质及预处理研究第28-39页
   ·前言第28页
   ·实验材料与设备第28-30页
   ·实验方法第30-34页
     ·菲牛蛭的预处理第30页
     ·菲牛蛭主要化学成分的含量测定第30-32页
     ·福林酚法测定肽含量第32-33页
     ·体外抗凝血活性测定方法的优化第33-34页
       ·样品肽溶液浓度对抗凝血活性测定的影响第33页
       ·样品肽溶液pH对抗凝血活性测定的影响第33-34页
       ·环境温度对抗凝血活性测定的影响第34页
       ·纤维蛋白原溶液存放时间对抗凝血活性测定的影响第34页
   ·结果与讨论第34-38页
     ·菲牛蛭的主要化学成分含量第34-35页
     ·Folin-酚法测肽含量的标准曲线第35页
     ·样品肽溶液浓度对抗凝血活性测定的优化第35-36页
     ·样品肽溶液pH对抗凝血活性测定的优化第36-37页
     ·凝血酶环境存放温度对抗凝血活性测定的优化第37页
     ·纤维蛋白原溶液存放时间对抗凝血活性测定的优化第37-38页
   ·本章小结第38-39页
第三章 菲牛蛭抗凝血活性肽的酶解工艺研究第39-58页
   ·前言第39页
   ·实验材料与设备第39-40页
   ·实验方法第40-44页
     ·蛋白酶活力的测定第40-41页
     ·酶解过程中水解度的测定第41-42页
     ·体外抗凝血活性的测定第42页
     ·不同酶催化下菲牛蛭蛋白转化为可溶性肽的得率的测定第42-43页
     ·单酶催化菲牛蛭蛋白水解工艺的优化与确定第43页
     ·菲牛蛭酶解产物的分子量测定第43-44页
     ·菲牛蛭抗凝血肽的稳定性研究——人体内模拟消化实验第44页
   ·结果与讨论第44-57页
     ·六种蛋白酶的活力值第44-45页
     ·单酶种类对菲牛蛭蛋白水解反应的影响第45-48页
     ·加酶量对菲牛蛭蛋白酶解反应的影响第48-49页
     ·反应体系pH对菲牛蛭蛋白酶解反应的影响第49-50页
     ·底物浓度对菲牛蛭蛋白水解反应的影响第50-51页
     ·酶解时间对菲牛蛭蛋白水解反应的影响第51-52页
     ·反应温度对菲牛蛭蛋白酶解反应的影响第52-53页
     ·菲牛蛭蛋白水解反应的正交实验研究第53-55页
     ·菲牛蛭酶解产物的分子量分布第55页
     ·不同消化酶对酶解产物肽抗凝血活性的影响第55-57页
   ·本章小结第57-58页
第四章 菲牛蛭抗凝血肽活性与疏水性的关系研究第58-74页
   ·前言第58-59页
   ·实验材料与设备第59-60页
   ·实验方法第60-63页
     ·抗凝血肽氨基酸组分及含量的测定第60页
     ·肽分子量测定第60页
     ·大孔吸附树脂的预处理第60-61页
     ·大孔吸附树脂的静态吸附试验第61页
     ·大孔吸附树脂的解吸实验第61-62页
     ·大孔吸附树脂的筛选及其静态吸附动力学实验第62页
     ·大孔吸附树脂的动态吸附试验第62页
     ·菲牛蛭抗凝血肽的大孔吸附树脂动态乙醇分级洗脱第62-63页
     ·水解物及各乙醇浓度洗脱组分的疏水值计算第63页
     ·Sephadex G-15 凝胶层析分离纯化多肽第63页
   ·结果与讨论第63-72页
     ·大孔吸附树脂的筛选第63-65页
     ·DA201-C大孔吸附树脂对菲牛蛭抗凝血肽的静态吸附曲线第65-66页
     ·DA201-C大孔吸附树脂对菲牛蛭抗凝血肽的动态吸附第66-67页
     ·DA201-C大孔树脂分级洗脱及氨基酸组成分析第67-69页
     ·分级洗脱组分疏水性与抗凝血活性的关系第69-71页
     ·分级洗脱组分的分子量分布范围第71页
     ·T3-75的Sephadex G-15 凝胶层析纯化研究第71-72页
   ·本章小结第72-74页
第五章 不同来源抗凝血肽酶解制备的初步探讨第74-83页
   ·前言第74-75页
   ·实验材料与设备第75-76页
   ·实验方法第76-77页
     ·三种原料的预处理第76页
     ·三种原料主要化学成分的测定第76页
     ·三种原料抗凝血肽的酶法制备第76-77页
       ·地龙抗凝血肽的制备第76页
       ·宽体金线蛭抗凝血肽的制备第76-77页
       ·猪小肠抗凝血肽的制备第77页
   ·结果与讨论第77-81页
     ·三种原料的主要化学成分含量第77页
     ·地龙抗凝血肽的活性第77-79页
     ·宽体金线蛭抗凝血肽的活性第79-80页
     ·猪小肠抗凝血肽的活性第80-81页
     ·三种原料抗凝血肽与菲牛蛭抗凝血肽活性的比较第81页
   ·本章小结第81-83页
结论与展望第83-87页
参考文献第87-94页
攻读硕士学位期间取得的研究成果第94-95页
致谢第95-96页
附件第96页

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