猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白单克隆抗体制备与鉴定
| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 第一部分 文献综述 | 第11-25页 |
| 1 PRRSV病原学 | 第11-12页 |
| ·猪繁殖与呼吸综合征病毒的发现 | 第11页 |
| ·PRRSV的分类 | 第11页 |
| ·PRRSV的理化及生物学特性 | 第11-12页 |
| ·PRRSV的培养与增殖 | 第12页 |
| 2 PRRSV的分子生物学特性 | 第12-16页 |
| ·PRRSV的基因组 | 第12-13页 |
| ·病毒蛋白和功能 | 第13-15页 |
| ·病毒的生物学特性 | 第15-16页 |
| 3 流行病学及危害 | 第16页 |
| 4 PRRSV的致病机理 | 第16页 |
| 5 PRRSV对免疫系统的影响 | 第16-17页 |
| ·体液免疫 | 第16-17页 |
| ·细胞免疫 | 第17页 |
| 6 PRRSV的检测方法研究进展 | 第17-21页 |
| ·病原学方法 | 第17-18页 |
| ·血清学方法 | 第18-20页 |
| ·分子生物学诊断 | 第20-21页 |
| 7 PRRSV的免疫防治 | 第21-22页 |
| 8 PRRSV的抗原表位 | 第22-23页 |
| 9 PRRSV单克隆抗体研究进展 | 第23-24页 |
| ·单克隆抗体技术概述 | 第23页 |
| ·PRRSV单克隆抗体研究进展 | 第23-24页 |
| 10 本研究的目的意义 | 第24-25页 |
| 第二部分 猪繁殖与呼吸综合征病毒GP5蛋白的制备 | 第25-35页 |
| 1 材料与方法 | 第25-28页 |
| ·材料 | 第25页 |
| ·试剂配制 | 第25-27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-30页 |
| ·重组融合蛋白PET-GP5的诱导表达及检测 | 第28页 |
| ·重组融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达条件优化 | 第28页 |
| ·表达蛋白的SDS-PAGE检测 | 第28页 |
| ·表达蛋白的Western blot分析 | 第28-29页 |
| ·重组蛋白的制备 | 第29-30页 |
| 3 结果与分析 | 第30-33页 |
| ·重组融合蛋白在大肠杆菌中的诱导表达条件优化 | 第30-32页 |
| ·重组蛋白PRRSV-GP5的可溶性分析 | 第32-33页 |
| ·重组蛋白的Western-Blot分析 | 第33页 |
| ·重组蛋白复性产率 | 第33页 |
| 4 讨论 | 第33-35页 |
| 第三部分 单抗筛选方法的建立 | 第35-43页 |
| 1 材料与试剂 | 第35-36页 |
| ·材料 | 第35页 |
| ·主要试剂的配制 | 第35-36页 |
| 2 方法 | 第36-39页 |
| ·病毒培养 | 第36-37页 |
| ·病毒TCID_(50)的测定 | 第37页 |
| ·阻断ELISA检测方法的建立 | 第37-38页 |
| ·间接免疫荧光试验和免疫过氧化物酶单层试验 | 第38-39页 |
| 3 结果与分析 | 第39-42页 |
| ·病毒的培养 | 第39页 |
| ·病毒TCID50的测定 | 第39-40页 |
| ·阻断ELISA检测方法的建立 | 第40-41页 |
| ·免疫组化条件的优化 | 第41-42页 |
| 4 讨论 | 第42-43页 |
| 第四部分 PRRSV GP5蛋白单克隆抗体的制备 | 第43-52页 |
| 1 材料与试剂 | 第43-44页 |
| ·主要试验材料 | 第43页 |
| ·主要试剂配制 | 第43-44页 |
| 2 方法 | 第44-47页 |
| ·小鼠的免疫 | 第44页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第44-46页 |
| ·单克隆抗体的扩大培养 | 第46页 |
| ·鉴定杂交瘤细胞株 | 第46-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-50页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第47-48页 |
| ·单克隆抗体的IFA与IPMA测定 | 第48-49页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-52页 |
| 第五部分 全文总结 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-60页 |
| 附录：英文缩略词表 | 第60-61页 |
| 致谢 | 第61-62页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文及研究成果 | 第62页 |
