| 摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-13页 |
| 第一章 杀线虫活性物质研究进展 | 第13-53页 |
| ·植物线虫病害的危害和防治现状 | 第13-14页 |
| ·杀线虫的真菌类型及其次生代谢产物 | 第14-44页 |
| ·毒杀线虫的担子菌及其代谢物 | 第35-36页 |
| ·毒杀线虫的半知菌及其代谢物 | 第36-37页 |
| ·毒杀线虫的子囊菌及其代谢物 | 第37页 |
| ·毒杀线虫的接合菌及其代谢物 | 第37页 |
| ·目前已报道的新化合物及产生菌： | 第37-44页 |
| ·限制性内切酶介导的转化（Restriction Enzyme-Mediated Integration，REMI） | 第44-53页 |
| ·REMI 的原理 | 第44-46页 |
| ·REMI 技术的局限性 | 第46-47页 |
| ·REMI 技术的应用 | 第47-50页 |
| ·REMI 技术的其他用途 | 第50页 |
| ·REMI 技术的应用前景 | 第50-53页 |
| 第二章 杀线虫活性菌株的筛选与鉴定 | 第53-63页 |
| ·材料与方法 | 第53-57页 |
| ·土样的采集 | 第53页 |
| ·根结线虫卵囊、分散卵及 2 龄幼虫的获得 | 第53-54页 |
| ·土样中真菌的分离 | 第54页 |
| ·根结线虫寄生菌的分离纯化： | 第54页 |
| ·摇瓶发酵培养筛选杀线虫活性真菌菌株 | 第54-55页 |
| ·菌株 za-130 鉴定及对南方根结线虫活性的研究 | 第55-56页 |
| ·za-130 温室盆栽试验 | 第56页 |
| ·菌株 za-130 发酵液对大鼠急性经口毒性试验 | 第56-57页 |
| ·结果与分析 | 第57-60页 |
| ·真菌的分离 | 第57页 |
| ·摇瓶发酵初筛 | 第57页 |
| ·摇瓶发酵复筛 | 第57页 |
| ·菌株鉴定结果 | 第57-58页 |
| ·里西裸囊菌 za-130 对南方根结线虫的活性及对卵孵化的影响 | 第58-59页 |
| ·za-130 温室盆栽试验结果 | 第59-60页 |
| ·菌株 za-130 发酵液对大鼠急性经口毒性试验结果 | 第60页 |
| ·小结 | 第60-63页 |
| 第三章 里西裸囊菌杀线虫活性物质的分离纯化与结构解析 | 第63-91页 |
| ·材料与方法 | 第64-71页 |
| ·材料 | 第64页 |
| ·方法 | 第64-71页 |
| ·结果与分析 | 第71-89页 |
| ·菌丝体预处理 | 第71页 |
| ·发酵滤液预处理 | 第71页 |
| ·热稳定性试验结果 | 第71-72页 |
| ·pH 稳定性试验结果 | 第72页 |
| ·pH 稳定性试验结果 | 第72-73页 |
| ·紫外光稳定性实验结果 | 第73页 |
| ·日光稳定性测定 | 第73-74页 |
| ·不同极性溶剂萃取结果 | 第74页 |
| ·大孔树脂吸附试验结果 | 第74-76页 |
| ·硅胶柱层析洗脱剂的确定 | 第76页 |
| ·硅胶柱吸附与洗脱 | 第76-77页 |
| ·Sephadex LH-20 凝胶过滤法纯化 za-130 杀线活性物质粗品浓缩液 | 第77页 |
| ·HPLC 制备 za-130 杀线活性物质纯品 | 第77-79页 |
| ·紫外吸收光谱的测定结果（UV） | 第79页 |
| ·红外吸收光谱的测定结果（IR） | 第79-80页 |
| ·元素分析 | 第80页 |
| ·FT-MS 分析测定纯品分子式和分子量 | 第80-81页 |
| ·核磁共振测定 za-130 杀线虫活性物质纯品的结构（NMR） | 第81-88页 |
| ·za-130 杀线虫活性物质 EC50 测定及发酵液活性物质检测方法 | 第88-89页 |
| ·小结 | 第89-91页 |
| 第四章 里西裸囊菌生物学性质研究与发酵条件的优化 | 第91-110页 |
| ·材料与方法 | 第91-96页 |
| ·供试菌种 | 第91页 |
| ·供试线虫 | 第91页 |
| ·培养基 | 第91页 |
| ·菌株 za-130 发酵液中杀线虫活性物质检测方法研究 | 第91页 |
| ·单因子对菌株 za-130 产杀线虫活性物质的影响 | 第91-93页 |
| ·微量元素对菌株 za-130 产杀线虫活性物质的影响 | 第93页 |
| ·发酵培养基优化 | 第93页 |
| ·培养条件对菌株 za-130 产杀线虫活性物质的影响 | 第93-94页 |
| ·发酵过程中的代谢变化 | 第94-96页 |
| ·结果与分析 | 第96-108页 |
| ·单因子对菌株 za-130 产杀线虫活性物质的影响 | 第96-101页 |
| ·微量元素对菌株 za-130 产杀线虫活性物质的影响 | 第101页 |
| ·发酵培养基优化 | 第101-103页 |
| ·培养条件对菌株 za-130 产杀线虫活性物质的影响 | 第103-107页 |
| ·发酵过程中的代谢变化 | 第107-108页 |
| ·结论与讨论 | 第108-110页 |
| 第五章 里西裸囊菌遗传转化体系的建立 | 第110-121页 |
| ·材料与方法 | 第110-114页 |
| ·材料 | 第110-111页 |
| ·DNA 提取方法 | 第111-112页 |
| ·新霉素敏感性测定 | 第112页 |
| ·里西裸囊菌原生质体制备与再生 | 第112-113页 |
| ·GFP 表达载体的转化 | 第113页 |
| ·里西裸囊菌 GFP 荧光标记菌株的验证 | 第113-114页 |
| ·结果与分析 | 第114-118页 |
| ·里西裸囊菌对新霉素敏感性的测定 | 第114页 |
| ·里西裸囊菌原生质体制备与再生的最适条件 | 第114-117页 |
| ·里西裸囊菌 GFP 荧光标记菌株的获得及验证 | 第117-118页 |
| ·讨论 | 第118-121页 |
| 第六章 里西裸囊菌杀线虫高效工程菌株的构建 | 第121-131页 |
| ·材料与方法 | 第121-125页 |
| ·材料 | 第121页 |
| ·里西裸囊菌对潮霉素敏感性测定 | 第121-122页 |
| ·里西裸囊菌插入突变体库的构建 | 第122页 |
| ·里西裸囊菌突变体库的评价 | 第122-124页 |
| ·杀线虫高活性工程菌株的筛选 | 第124-125页 |
| ·结果与分析 | 第125-129页 |
| ·里西裸囊菌 REMI 转化最适条件的建立 | 第125-127页 |
| ·里西裸囊菌 REMI 转化子库的构建及评价 | 第127-128页 |
| ·杀线虫高活性工程菌株的筛选 | 第128-129页 |
| ·讨论 | 第129-131页 |
| 第七章 za-130 中杀线虫活性物质产生途径相关基因的克隆 | 第131-135页 |
| ·材料与方法 | 第131-133页 |
| ·材料 | 第131页 |
| ·方法 | 第131-133页 |
| ·结果与分析 | 第133-134页 |
| ·杀线虫工程菌株 Gr-M286 质粒插入位置侧翼序列的获得 | 第133页 |
| ·杀线虫工程菌株 Gr-M286 质粒插入位点侧翼序列的测序及分析 | 第133-134页 |
| ·讨论 | 第134-135页 |
| 第八章 结论与讨论 | 第135-141页 |
| 1 目的生防菌的筛选与鉴定 | 第135-136页 |
| 2. 分离纯化及结构测定 | 第136-138页 |
| 3 菌株 za-13 0 发酵条件的研究 | 第138页 |
| 4 za-130 的防效试验和安全性评价 | 第138-139页 |
| 5 za-130 菌株杀线虫高效工程菌株的构建 | 第139页 |
| 6 杀线虫真菌代谢产物研究的意义与前景 | 第139-140页 |
| 7 展望及有待深入的几个问题 | 第140-141页 |
| 参考文献 | 第141-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第149-150页 |
