| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-43页 |
| 1 流式细胞仪分离哺乳动物XY精子的研究概况和基本流程 | 第19-25页 |
| ·哺乳动物分离精子的研究概况 | 第19-24页 |
| ·流式细胞仪分离哺乳动物XY精子的基本流程 | 第24-25页 |
| 2 哺乳动物XY分离精子产业化存在的问题 | 第25-30页 |
| ·分离、冷冻程序对精子质量的影响 | 第26-30页 |
| ·分离精子性别控制技术成本高 | 第30页 |
| 3 哺乳动物XY分离精子技术体系的优化 | 第30-37页 |
| ·哺乳动物XY分离精子稀释液的优化 | 第30-34页 |
| ·哺乳动物XY分离精子技术与其它繁殖技术相结合应用于生产 | 第34-37页 |
| 4 哺乳动物XY分离精子损伤检测技术手段及研究现状 | 第37-43页 |
| ·荧光显微镜和流式细胞仪的应用 | 第38页 |
| ·拉曼光谱在生物学中的应用 | 第38-43页 |
| 第二章 水牛精子分离、冷冻对精子细胞器损伤程度的影响 | 第43-65页 |
| 前言 | 第43-44页 |
| 1 材料和方法 | 第44-48页 |
| ·主要试剂药品 | 第44页 |
| ·试验动物 | 第44页 |
| ·主要仪器设备 | 第44-45页 |
| ·材料获取 | 第45页 |
| ·精子的准备 | 第45页 |
| ·试验设计 | 第45-48页 |
| ·统计分析 | 第48页 |
| 2 结果 | 第48-59页 |
| ·运动特性的分析 | 第48-50页 |
| ·不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻过程中精子线粒体活性(HMMP)的检测 | 第50-52页 |
| ·不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻过程中精子凋亡的检测 | 第52-55页 |
| ·不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻过程中精子质膜完整性的检测 | 第55-58页 |
| ·精子线粒体膜电位、质膜完整性和凋亡的不同检测方法的比较 | 第58-59页 |
| ·水牛精子线粒体膜电位、质膜完整性和凋亡的相关性分析 | 第59页 |
| 3 讨论 | 第59-64页 |
| ·不同品种、不同个体的水牛精子分离冷冻对精子活力相关参数的影响 | 第59-60页 |
| ·分离过程对不同品种、个体的水牛精子质量的影响 | 第60-63页 |
| ·精子线粒体膜电位、质膜完整性和凋亡的不同检测方法比较 | 第63-64页 |
| 4 小结 | 第64-65页 |
| 第三章 拉曼光谱在水牛分离精子损伤检测体系中的应用 | 第65-93页 |
| 前言 | 第65-66页 |
| 1 材料和方法 | 第66-69页 |
| ·主要试剂药品 | 第66页 |
| ·试验动物 | 第66页 |
| ·主要仪器设备 | 第66页 |
| ·材料获取 | 第66页 |
| ·精子的准备 | 第66页 |
| ·细胞拉曼光谱数据的收集 | 第66-67页 |
| ·原始数据处理及多元分析 | 第67-68页 |
| ·试验设计 | 第68-69页 |
| ·统计分析 | 第69页 |
| 2 结果 | 第69-88页 |
| ·利用激光光镊拉曼光谱仪检测分离、冷冻过程对水牛精子质量的影响 | 第69-78页 |
| ·利用激光光镊拉曼光谱仪检测在分离、冷冻过程中不同个体水牛精子的损伤情况 | 第78-88页 |
| 3 讨论 | 第88-92页 |
| ·拉曼光谱分析分离、冷冻过程对水牛精子质量的影响 | 第88-90页 |
| ·拉曼光谱分析分离、冷冻过程中同一阶段对不同水牛精子质量的影响 | 第90页 |
| ·多元统计分析 | 第90-92页 |
| 4 小结 | 第92-93页 |
| 第四章 水牛精子分离、冷冻过程中添加不同物质对精子质量的影响 | 第93-138页 |
| 前言 | 第93-94页 |
| 1 材料和方法 | 第94-98页 |
| ·主要试剂药品 | 第94页 |
| ·试验动物 | 第94页 |
| ·主要仪器设备 | 第94-95页 |
| ·材料获取 | 第95页 |
| ·精子的准备 | 第95-96页 |
| ·细胞拉曼光谱数据的收集 | 第96页 |
| ·原始数据处理及多元分析 | 第96页 |
| ·试验设计 | 第96-98页 |
| ·统计分析 | 第98页 |
| 2 结果 | 第98-130页 |
| ·MLT、PCB、IGF-I孵育不同时间对精子线粒体活性的影响 | 第98-99页 |
| ·褪黑素(MLT)在水牛精子分离、冷冻中的抗氧化作用 | 第99-110页 |
| ·联合添加丙酮酸钠、过氧化氢酶和牛血清白蛋白(PCB)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子的保护作用 | 第110-120页 |
| ·添加胰岛素样生长因子I(IGF-I)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子质量的影响 | 第120-130页 |
| 3 讨论 | 第130-137页 |
| ·褪黑素(MLT)在水牛精子分离、冷冻中的抗氧化作用 | 第130-132页 |
| ·联合添加丙酮酸钠、过氧化氢酶和牛血清白蛋白(PCB)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子的保护作用 | 第132-135页 |
| ·添加胰岛素样生长因子I(IGF-I)在水牛精子分离、冷冻过程的各稀释液对精子质量的影响 | 第135-137页 |
| 4 小结 | 第137-138页 |
| 第五章 分离、冷冻各稀释液中添加不同抗氧化剂对水牛分离精子体外胚胎发育的影响 | 第138-160页 |
| 前言 | 第138页 |
| 1 材料和方法 | 第138-145页 |
| ·主要试剂药品 | 第138-139页 |
| ·试验动物 | 第139页 |
| ·主要仪器设备 | 第139页 |
| ·分离冻精材料获取 | 第139页 |
| ·发情牛血清的制备 | 第139-140页 |
| ·卵泡液的制备 | 第140页 |
| ·卵母细胞收集和体外成熟 | 第140-142页 |
| ·体外受精 | 第142页 |
| ·体外培养 | 第142-143页 |
| ·试验设计 | 第143-145页 |
| ·统计分析 | 第145页 |
| 2 结果 | 第145-153页 |
| ·成熟液中不同添加物对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 | 第145-150页 |
| ·上游法和精子洗涤法处理水牛分离精子对其体外受精胚胎发育的影响 | 第150页 |
| ·水牛分离和未分离精子体外受精后胚胎发育的比较 | 第150-151页 |
| ·水牛分离精液中添加不同抗氧化剂对分离精子体外受精的影响 | 第151-153页 |
| 3 讨论 | 第153-159页 |
| ·成熟液中不同添加物对水牛卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育的影响 | 第153-157页 |
| ·上游法和精子洗涤法处理水牛分离精子的体外受精比较 | 第157页 |
| ·水牛分离和未分离精子体外受精比较 | 第157-158页 |
| ·水牛分离精液中添加不同抗氧化剂对分离精子体外受精的影响 | 第158-159页 |
| 4 小结 | 第159-160页 |
| 参考文献 | 第160-197页 |
| 附表1 拉曼特征峰物质归属表 | 第197-200页 |
| 附表2 重要术语中英文对照 | 第200-203页 |
| 致谢 | 第203-205页 |
| 作者简介 | 第205-206页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文 | 第206-207页 |
