| 中文摘要 | 第1-10页 |
| Abstract | 第10-12页 |
| List of abbreviations | 第12-16页 |
| Introduction | 第16-19页 |
| Aims and objectives of the study | 第17-19页 |
| Chapter One Literature review | 第19-48页 |
| 1.Ⅰ Gene expression changes as a biomarker to evaluate the toxic effect of hepatitis Bvaccine in vivo | 第19-32页 |
| 1.Ⅰ.1 Requirements for vaccine safety | 第19-20页 |
| 1.Ⅰ.2 Abnormal toxicity test | 第20-21页 |
| 1.Ⅰ.3 Parameters monitored | 第21页 |
| 1.Ⅰ.4 Refinement, Reduction, and Replacement of Animal Use | 第21-22页 |
| 1.Ⅰ.5 Clinical study of Hepatitis B effects | 第22-23页 |
| 1.Ⅰ.6 In vivo study of Adjuvant effects | 第23-24页 |
| 1.Ⅰ.7 Biomarkers | 第24页 |
| 1.Ⅰ.8 Gene expression techniques for vaccine safety testing | 第24-25页 |
| 1.Ⅰ.9 Inflammation genes | 第25-30页 |
| 1.Ⅰ.9.1 SAA genes | 第26-27页 |
| 1.Ⅰ.9.2 S100A8/S100A9 genes | 第27-29页 |
| 1.Ⅰ.9.3 Fgl1 gene | 第29-30页 |
| 1.Ⅰ.10 Metabolism genes | 第30-32页 |
| 1.Ⅰ.10.1 Acaa1a, Acaa1b genes | 第30页 |
| 1.Ⅰ.10.2 PCK gene | 第30-32页 |
| Ⅱ In vitro and in vivo studies of Apoptosis induced by hepatitis B vaccine | 第32-48页 |
| 1.Ⅱ.1 Apoptosis | 第32页 |
| 1.Ⅱ.2 Distinguishing Apoptosis from Necrosis | 第32-35页 |
| 1.Ⅱ.3 Mechanisms of Apoptosis | 第35-40页 |
| 1.Ⅱ.3.1 Extrinsic Pathway | 第36-37页 |
| 1.Ⅱ.3.2 Intrinsic Pathway | 第37-38页 |
| 1.Ⅱ.3.3 Perforin/granzyme Pathway | 第38-39页 |
| 1.Ⅱ.3.4 Execution Pathway | 第39-40页 |
| 1.Ⅱ.4 Malfunctioning of apoptosis and pathogenesis | 第40-41页 |
| 1.Ⅱ.5 Assays for Apoptosis | 第41-46页 |
| 1.Ⅱ.5.1 Cytomorphological Alterations | 第41-42页 |
| 1.Ⅱ.5.2 DNA Fragmentation | 第42-43页 |
| 1.Ⅱ.5.3 Detection of Caspases, Cleaved Substrates, Regulators, and Inhibitors | 第43-44页 |
| 1.Ⅱ.5.4 Membrane Alterations | 第44页 |
| 1.Ⅱ.5.5 Detection of Apoptosis in Whole Mounts | 第44-45页 |
| 1.Ⅱ.5.6 Mitochondrial Assay | 第45-46页 |
| 1.Ⅱ.6 Vaccine additives induce apoptosis In vivo and In vitro | 第46-48页 |
| Chapter Two Materials &Methods | 第48-59页 |
| 2.Ⅰ Gene expression changes as a biomarker to evaluate the toxic effect of hepatitis Bvaccine in vivo | 第48-53页 |
| 2.Ⅰ.1 Vaccine | 第48页 |
| 2.Ⅰ.2 Animals | 第48页 |
| 2.Ⅰ.3 RNA preparation | 第48-49页 |
| 2.Ⅰ.4 RNA qualification | 第49-50页 |
| 2.Ⅰ.4.1 RNA purity and quantity | 第49-50页 |
| 2.Ⅰ.5 RT-PCR | 第50页 |
| 2.Ⅰ.6 DNA microarray analysis | 第50-51页 |
| 2.Ⅰ.7 Primers of toxicity biomarker genes | 第51-52页 |
| 2.Ⅰ.8 Quantitative Real time PCR | 第52-53页 |
| 2.Ⅰ.9 Statistical analysis | 第53页 |
| 2.Ⅱ In vitro and in vivo studies of Apoptosis induced by hepatitis B vaccine | 第53-59页 |
| 2.Ⅱ.1 Cell culture and treatment | 第53页 |
| 2.Ⅱ.2 Determination of cell viability | 第53-54页 |
| 2.Ⅱ.3 Flow cytometry | 第54页 |
| 2.Ⅱ.4 TUNEL assay | 第54-55页 |
| 2.Ⅱ.5 RNA preparation& qualification | 第55页 |
| 2.Ⅱ.6 Quantitative RT-PCR | 第55-56页 |
| 2.Ⅱ.7 Western blot analysis | 第56页 |
| 2.Ⅱ.8 Vaccination of Mice | 第56页 |
| 2.Ⅱ.9 Caspase-3 immunohistochemistry | 第56-57页 |
| 2.Ⅱ.10 In Situ Cell Death Detection | 第57-58页 |
| 2.Ⅱ.11 Statistical analysis | 第58-59页 |
| Chapter Three Results | 第59-82页 |
| 3.Ⅰ Gene expression changes as a biomarker to evaluate the toxic effect of hepatitis Bvaccine in vivo | 第59-69页 |
| 3.Ⅰ.1 Assays for RNA Integrity | 第59页 |
| 3.Ⅰ.2 Identification of differentially expressed (DE) genes by microarray analysis in mouse liver following hepatitis B vaccination | 第59-64页 |
| 3.Ⅰ.3 Quantification of inflammation and metabolism genes | 第64-69页 |
| 3.Ⅱ In vitro and In vivo studies of Apoptosis induced by hepatitis B vaccine | 第69-82页 |
| 3.Ⅱ.1 Effect of vaccine on cell viability | 第69-73页 |
| 3.Ⅱ.2 Vaccine treatment induces cell death | 第73-74页 |
| 3.Ⅱ.3 DNA fragmentation | 第74-76页 |
| 3.Ⅱ.4 Vaccine treatment leads to caspase 3 activation | 第76页 |
| 3.Ⅱ.5 Vaccine upregulation of apoptosis-related gene expression | 第76-79页 |
| 3.Ⅱ.6 Caspase-3 Immunohistochemical | 第79-80页 |
| 3.Ⅱ.7 In Situ Cell Death Detection | 第80-82页 |
| Chapter Four Discussion | 第82-89页 |
| 4.Ⅰ Gene expression changes as a biomarker to evaluate the toxic effect of hepatitis Bvaccine in vivo | 第82-85页 |
| 4.Ⅱ In vitro and In vivo studies of Apoptosis induced by hepatitis B vaccine | 第85-89页 |
| 5. Conclusions | 第89-90页 |
| Conclusion Ⅰ | 第89页 |
| Conclusion Ⅱ | 第89-90页 |
| 6. Future work | 第90-91页 |
| 7. Bibliography | 第91-117页 |
| 8. Acknowledgements | 第117-118页 |
| 9. Appendix | 第118-122页 |
| ·List of publications | 第118-119页 |
| 附件 2型糖尿病GLUT4的转运及CHC22对其的影响 | 第119-122页 |
| 参考文献 | 第122页 |
