图片目录 | 第1页 |
表格目录 | 第6-7页 |
中文摘要 | 第7-9页 |
英文摘要 | 第9-11页 |
第一章 一种简单有效的植物RNA提取方法 | 第11-21页 |
1 引言 | 第11-12页 |
2 材料和方法 | 第12-16页 |
·植物材料 | 第12页 |
·主要试剂 | 第12-13页 |
·皂土法 | 第12页 |
·TRIZOL试剂快速提取法 | 第12页 |
·异硫氰酸胍法 | 第12-13页 |
·SDS-KAc法 | 第13页 |
·主要仪器 | 第13页 |
·提取方法 | 第13-15页 |
·皂土法 | 第13-14页 |
·TRIZOL试剂快速提取法 | 第14页 |
·异硫氰酸胍法 | 第14-15页 |
·SDS-KAc法 | 第15页 |
·RNA完整性及质量检测 | 第15-16页 |
·RNA电泳分析 | 第15页 |
·RNA纯度鉴定 | 第15-16页 |
·RT-PCR | 第16页 |
3 实验结果 | 第16-18页 |
·皂土法中皂土浓度的确定 | 第16-17页 |
·RNA完整性分析 | 第17页 |
·RNA纯度检测 | 第17-18页 |
·RT-PCR | 第18页 |
4 讨论 | 第18-19页 |
参考文献 | 第19-21页 |
第二章 一种经济有效的提高小分子RNA分离效果的方法 | 第21-32页 |
1 引言 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-25页 |
·植物材料 | 第22页 |
·溶液和试剂 | 第22-23页 |
·实验仪器 | 第23页 |
·实验方法 | 第23-25页 |
·总RNA的提取 | 第23-24页 |
·张年辉RNA提取法 | 第23-24页 |
·改进RNA提取法 | 第24页 |
·Small RNA的纯化 | 第24-25页 |
·PAGE电泳分离small RNAs | 第24-25页 |
·small RNAs的洗脱回收 | 第25页 |
3 结果与讨论 | 第25-30页 |
·方法的建立 | 第25-26页 |
·最适条件的选择 | 第26-29页 |
·MgCl2浓度对RNA分离提取的影响 | 第26-28页 |
·不同沉淀时间和温度的分离纯化效果 | 第28页 |
·离心时间对RNA分离提取的影响 | 第28-29页 |
·small RNA的得率 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-32页 |
第三章 盐胁迫条件下水稻幼苗miRNA的克隆初探 | 第32-49页 |
1 引言 | 第32-33页 |
2 材料和方法 | 第33-41页 |
·实验材料 | 第33-36页 |
·植物材料 | 第33页 |
·菌株 | 第33页 |
·质粒 | 第33页 |
·培养基 | 第33-34页 |
·试剂盒及工具酶 | 第34页 |
·溶液试剂 | 第34-36页 |
·实验仪器 | 第36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·盐胁迫条件下水稻苗RNA的提取 | 第36-37页 |
·张年辉法 | 第36页 |
·改进RNA提取法 | 第36-37页 |
·Mir VanaTM RNA试剂盒提取法 | 第37页 |
·RNA完整性及质量检测 | 第37页 |
·RNA电泳分析 | 第37页 |
·RNA纯度鉴定 | 第37页 |
·Small RNA的纯化 | 第37-38页 |
·加Poly(A) | 第38页 |
·反转录,CDNA第一链的合成 | 第38页 |
·加poly(G) | 第38-39页 |
·PCR反应 | 第39页 |
·PCR产物的纯化回收 | 第39页 |
·纯化后PCR产物的连接反应 | 第39页 |
·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备 | 第39-40页 |
·重组子的转化 | 第40页 |
·重组子的鉴定 | 第40-41页 |
·菌落PCR | 第40页 |
·质粒DNA的提取及双酶切反应 | 第40-41页 |
3 结果与分析 | 第41-44页 |
·RNA质量分析 | 第41页 |
·RT-PCR产物的检验 | 第41-42页 |
·重组子转化结果 | 第42-44页 |
4 讨论 | 第44-46页 |
参考文献 | 第46-49页 |
文献综述 | 第49-68页 |
引言 | 第49页 |
1 miRNA的发现 | 第49-50页 |
2 miRNA的特点 | 第50-51页 |
3 miRNA的功能 | 第51-53页 |
4 miRNA的作用机制 | 第53-55页 |
5 miRNA与siRNA | 第55-57页 |
6 植物中的miRNA | 第57-62页 |
·植物miRNA的特点 | 第57-58页 |
·植物miRNA的形成 | 第58-60页 |
·植物miRNA的功能 | 第60-62页 |
·miRNA的负反馈调节 | 第60页 |
·负责mRNA的剪切 | 第60-61页 |
·导致基因沉默现象 | 第61页 |
·影响转座子功能 | 第61页 |
·miRNA与植物形态建成 | 第61-62页 |
7 研究意义与展望 | 第62页 |
参考文献 | 第62-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
在读期间发表论文情况 | 第69-70页 |