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甘薯抗线虫病基因的分子检测

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-9页
1 前言第9-17页
 1.1 线虫病研究现状第9页
 1.2 生物技术在基因检测中的应用第9-14页
  1.2.1 PCR技术第9-11页
  1.2.2 RAPD技术第11-12页
  1.2.3 Southern杂交技术第12页
  1.2.4 抗线虫基因克隆研究进展第12-14页
 1.3 甘薯抗病鉴定的现状第14页
 1.4 作物抗线虫基因定位的研究现状第14-17页
2 材料和方法第17-22页
 2.1 植物材料第17页
 2.2 方法第17-22页
  2.2.1 DNA提取方法第18页
   2.2.1.1 CTAB法第18页
   2.2.1.2 SDS法第18页
  2.2.2 引物设计第18-19页
  2.2.3 PCR扩增和电泳第19页
   2.2.3.1 PCR反应体系第19页
   2.2.3.2 反应程序第19页
   2.2.3.3 结果记录第19页
  2.2.4 PCR-Southern杂交第19-22页
   2.2.4.1 转膜第19-20页
   2.2.4.2 探针制作第20-21页
   2.2.4.3 杂交第21页
   2.2.4.4 洗膜第21-22页
   2.2.4.5 显色第22页
3 结果与分析第22-29页
 3.1 甘薯基因组DNA提取方法的比较第22-23页
 3.2 PCR特异扩增影响因素分析第23-26页
  3.2.1 模板DNA浓度的影响第23-24页
  3.2.2 Taq酶浓度的影响第24页
  3.2.3 引物浓度的影响第24-25页
  3.2.4 Mg~(2+)浓度的影响第25页
  3.2.5 dNTP浓度的影响第25-26页
 3.3 引物筛选第26-27页
 3.4 11个经常规鉴定的甘薯品种PCR特异扩增产物的分析第27页
 3.5 PCR-Southern杂交结果的分析第27-28页
 3.6 11个未鉴定的甘薯主栽品种PCR特异扩增产物的分析第28-29页
4 讨论第29-32页
 4.1 CTAB法与SDS法的比较第29页
 4.2 影响PCR反应的几个因素第29-30页
 4.3 PCR技术对甘薯品种抗线虫病基因检测的可行性第30页
 4.4 PCR引物的特异性第30页
 4.5 PCR-Southern杂交结果的验证性第30-31页
 4.6 评价11份未经常规鉴定的甘薯主栽品种对线虫病的抗性第31-32页
参考文献第32-36页
附录1第36-37页
附录2第37-38页
致谢第38页

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