英文缩写词表 | 第1-8页 |
中文摘要 | 第8-12页 |
英文摘要 | 第12-16页 |
前言 | 第16-18页 |
文献回顾 | 第18-46页 |
一、基因工程抗体的研究 | 第18-43页 |
(一) 几种基因工程抗体的研究进展 | 第20-31页 |
(二) 全套抗体库克隆技术或全套抗体噬菌体表面呈现技术的研究 | 第31-43页 |
二、抗AFP基因工程抗体的研究 | 第43-46页 |
材料与方法 | 第46-57页 |
一、主要实验材料 | 第46-50页 |
二、主要实验方法 | 第50-57页 |
实验结果 | 第57-85页 |
一、人AFP免疫小鼠全套抗体(ScFv)基因噬菌体表面呈现文库的构建与筛选 | 第57-62页 |
(一) 人AFP免疫小鼠全套V_H和V_L基因片段的扩增和鉴定 | 第57-58页 |
(二) 全套ScFv基因的拼接和PCR扩增 | 第58-59页 |
(三) 全套ScFv基因的克隆和文库的构建 | 第59页 |
(四) ScFv重组噬菌体的表达和panning筛选富集 | 第59-60页 |
(五) ELISA法检测单个噬菌体克隆的AFP结合活性 | 第60-62页 |
二、两个抗AFP ScFv基因的序列测定和分析 | 第62-75页 |
(一) F3、B10噬菌粒中ScFv基因的核苷酸序列测定 | 第62-66页 |
(二) VHF3基因序列的计算机分析 | 第66-69页 |
(三) VLF3基因序列的计算机分析 | 第69-72页 |
(四) VLB10基因序列的计算机分析 | 第72-75页 |
三、两种不同的抗AFP ScFv基因在大肠杆菌中的表达和活性检测 | 第75-85页 |
(一) pF3和pB10噬菌粒的限制性内切酶图谱 | 第75-76页 |
(二) pFB噬菌粒的构建 | 第76-78页 |
(三) ScFv-F3和ScFv-FB在噬菌体表面的呈现表达和活性检测 | 第78-80页 |
(四) 可溶性ScFv-F3和ScFv-FB在E coliHB2151中的表达和活性检测 | 第80-85页 |
讨论 | 第85-95页 |
一、全套抗体噬菌体表面呈现技术的某些重要环节 | 第85-89页 |
二、利用噬菌体表面呈现技术筛选抗AFP抗体的V区基因和单链抗体片段 | 第89-95页 |
小结 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-110页 |