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人AFP免疫小鼠全套单链抗体基因文库的构建筛选及其基因序列分析和表达的研究

英文缩写词表第1-8页
中文摘要第8-12页
英文摘要第12-16页
前言第16-18页
文献回顾第18-46页
 一、基因工程抗体的研究第18-43页
  (一) 几种基因工程抗体的研究进展第20-31页
  (二) 全套抗体库克隆技术或全套抗体噬菌体表面呈现技术的研究第31-43页
 二、抗AFP基因工程抗体的研究第43-46页
材料与方法第46-57页
 一、主要实验材料第46-50页
 二、主要实验方法第50-57页
实验结果第57-85页
 一、人AFP免疫小鼠全套抗体(ScFv)基因噬菌体表面呈现文库的构建与筛选第57-62页
  (一) 人AFP免疫小鼠全套V_H和V_L基因片段的扩增和鉴定第57-58页
  (二) 全套ScFv基因的拼接和PCR扩增第58-59页
  (三) 全套ScFv基因的克隆和文库的构建第59页
  (四) ScFv重组噬菌体的表达和panning筛选富集第59-60页
  (五) ELISA法检测单个噬菌体克隆的AFP结合活性第60-62页
 二、两个抗AFP ScFv基因的序列测定和分析第62-75页
  (一) F3、B10噬菌粒中ScFv基因的核苷酸序列测定第62-66页
  (二) VHF3基因序列的计算机分析第66-69页
  (三) VLF3基因序列的计算机分析第69-72页
  (四) VLB10基因序列的计算机分析第72-75页
 三、两种不同的抗AFP ScFv基因在大肠杆菌中的表达和活性检测第75-85页
  (一) pF3和pB10噬菌粒的限制性内切酶图谱第75-76页
  (二) pFB噬菌粒的构建第76-78页
  (三) ScFv-F3和ScFv-FB在噬菌体表面的呈现表达和活性检测第78-80页
  (四) 可溶性ScFv-F3和ScFv-FB在E coliHB2151中的表达和活性检测第80-85页
讨论第85-95页
 一、全套抗体噬菌体表面呈现技术的某些重要环节第85-89页
 二、利用噬菌体表面呈现技术筛选抗AFP抗体的V区基因和单链抗体片段第89-95页
小结第95-96页
致谢第96-97页
参考文献第97-110页

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