摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-20页 |
第一章 引言 | 第20-38页 |
·TTV 的发现 | 第20-23页 |
·病毒的发现历史和方法 | 第20页 |
·正在出现的病毒 | 第20-21页 |
·TTV 病毒的出现 | 第21页 |
·TTV 天然存在的证据 | 第21页 |
·TTV 的分类过程 | 第21-22页 |
·TTV 的感染性 | 第22-23页 |
·猪源TTV | 第23页 |
·人TTV 目前的研究现状 | 第23-33页 |
·人TTV 的基因组结构 | 第23-24页 |
·人TTV 的转录 | 第24-25页 |
·人TTV 阅读框分析 | 第25-27页 |
·人TTV 的结构 | 第27-28页 |
·TTV 复制的机制 | 第28页 |
·序列的变异性 | 第28-29页 |
·人TTV 的流行情况和传播方式 | 第29-31页 |
·TTV 的细胞嗜性 | 第31-32页 |
·人TTV 和疾病的关系 | 第32-33页 |
·猪源TTV 目前的研究现状 | 第33-36页 |
·猪源TTV 的分子生物学特征 | 第33-34页 |
·猪源TTV 的分类 | 第34页 |
·猪源TTV 的遗传变异 | 第34-35页 |
·猪源TTV 的流行 | 第35页 |
·猪源 TTV 的传播方式 | 第35-36页 |
·猪源TTV 的致病性 | 第36页 |
·反向遗传学 | 第36-37页 |
·目的意义 | 第37-38页 |
第二章 猪源 TTV1、TTV2 与 PCV2 的流行病学调查 | 第38-50页 |
·材料与方法 | 第39-42页 |
·样品采集 | 第39页 |
·菌株、质粒与试剂 | 第39页 |
·病料的处理 | 第39-40页 |
·病毒DNA 的提取 | 第40页 |
·检测引物的设计 | 第40-41页 |
·TTV1,TTV2 和PCV2 的检测 | 第41页 |
·TTV1 和TTV2 部分UTR 基因的扩增 | 第41页 |
·TTV1 和TTV2 部分UTR 基因的克隆 | 第41-42页 |
·序列测定 | 第42页 |
·序列分析 | 第42页 |
·结果 | 第42-48页 |
·采集样品的TTV 的PCR 检测结果 | 第42-43页 |
·采集样品的 PCV2 的 PCR 检测结果 | 第43-44页 |
·TTV1 和TTV2 部分UTR 基因序列分析 | 第44页 |
·采集样品TTV 检测结果统计分析 | 第44-48页 |
·讨论 | 第48-50页 |
第三章 猪源TTV1、TTV2 的全长序列分析 | 第50-67页 |
·材料与方法 | 第50-54页 |
·样品 | 第50页 |
·DNA 的提取 | 第50-51页 |
·TTV1 与TTV2 全长基因组的扩增,克隆和测序 | 第51页 |
·序列分析 | 第51页 |
·甲基化分析实验 | 第51-54页 |
·结果 | 第54-64页 |
·TTV1 和TTV2 分段扩增的结果 | 第54页 |
·测序结果 | 第54-55页 |
·猪源 TTV 的基本结构分析 | 第55页 |
·猪源 TTV 的阅读框分析 | 第55-56页 |
·TTV1,2 的全长基因组的变异性分析 | 第56-57页 |
·TTV1,2 的全长核苷酸比对和阅读框的氨基酸比对 | 第57-60页 |
·TTV1 和 TTV2 的碱基变异率分析 | 第60-62页 |
·猪源 TTV 的 GpG 在线查找和甲基化分析 | 第62-63页 |
·FJ/2010/China/TTV2/2 难测区和高 GC 区的二级结构预测 | 第63-64页 |
·TTV 全长进化树分析 | 第64页 |
·讨论 | 第64-67页 |
第四章 猪源TTV2 蛋白表达,抗体制作及细胞定位 | 第67-81页 |
·材料 | 第67-68页 |
·毒株、血清、菌株与载体 | 第67页 |
·试剂 | 第67页 |
·实验动物 | 第67-68页 |
·方法 | 第68-74页 |
·TTV2 中主要阅读框的预测 | 第68页 |
·TTV2 ORF1 的抗原性分析 | 第68页 |
·引物设计与合成 | 第68-69页 |
·原核重组表达质粒的构建和鉴定 | 第69-70页 |
·重组菌的诱导表达和纯化 | 第70-72页 |
·表达产物的SDS-PAGE 分析 | 第72页 |
·ORF1a,ORF2 蛋白抗血清的制备 | 第72-73页 |
·真核重组表达质粒的构建和鉴定 | 第73-74页 |
·真核质粒转染后的间接免疫荧光 | 第74页 |
·结果 | 第74-79页 |
·ORF1,ORF1a,ORF2,ORF3 基因的获得 | 第74-75页 |
·原核重组质粒的鉴定 | 第75-76页 |
·重组蛋白ORF1a 和ORF2 的表达和纯化 | 第76页 |
·重组蛋白ORF1a, ORF2 的多抗血清的ELISA 效价测定 | 第76页 |
·真核重组质粒的鉴定 | 第76-77页 |
·真核质粒转染细胞后的间接免疫荧光 | 第77-79页 |
·讨论 | 第79-81页 |
第五章 猪源TTV2 感染性克隆的构建和鉴定 | 第81-96页 |
·材料与方法 | 第82-90页 |
·病毒和细胞 | 第82页 |
·试验试剂和主要仪器设备 | 第82页 |
·TTV1.0,1.3,2.0 个全长质粒的构建 | 第82-87页 |
·TTV2 转录的研究 | 第87-89页 |
·TTV2 复制的研究 | 第89-90页 |
·结果 | 第90-94页 |
·TTV2 FJ/China/2010/TTV/2 的各片段的PCR 扩增结果 | 第90-91页 |
·TTV2 1.0,1.3,2.0 个全长的鉴定 | 第91-92页 |
·Northern Bot 杂交的结果 | 第92-93页 |
·Southern Blot 杂交结果 | 第93-94页 |
·间接免疫荧光的结果 | 第94页 |
·讨论 | 第94-96页 |
第六章 全文结论 | 第96-97页 |
参考文献 | 第97-107页 |
附录 | 第107-117页 |
致谢 | 第117-118页 |
作者简介 | 第118页 |