| 中文摘要 | 第1-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-17页 |
| 第一部分 CXCL1基因在卵巢癌细胞中的表达及小干扰RNA的筛选 | 第17-35页 |
| 1 材料和仪器 | 第17-19页 |
| ·材料 | 第17-18页 |
| ·仪器 | 第18-19页 |
| ·统计学分析软件 | 第19页 |
| 2 方法 | 第19-25页 |
| ·细胞培养 | 第19-20页 |
| ·CXCL1基因在卵巢癌细胞中的表达 | 第20-23页 |
| ·siRNA筛选 | 第23-25页 |
| ·统计分析 | 第25页 |
| 3 结果 | 第25-30页 |
| ·CXCL1基因在卵巢癌细胞中的表达测定 | 第25-26页 |
| ·siRNA筛选测定 | 第26-30页 |
| 4 讨论 | 第30-31页 |
| ·CXCL1基因在卵巢癌中的作用和意义 | 第30页 |
| ·siRNA干扰机制与肿瘤治疗研究 | 第30-31页 |
| 5 小结 | 第31-33页 |
| 参考文献 | 第33-35页 |
| 第二部分 针对CXCL1基因的RNA干扰质粒构建与鉴定 | 第35-55页 |
| 1 材料和仪器 | 第35-37页 |
| ·材料 | 第35-36页 |
| ·仪器 | 第36-37页 |
| ·统计学分析软件 | 第37页 |
| 2 方法 | 第37-45页 |
| ·针对CXCL1_siRNA4靶序列构建重组质粒 | 第37-40页 |
| ·重组质粒的转化及抽提 | 第40-41页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第41-42页 |
| ·重组质粒体外转染 | 第42-43页 |
| ·CXCL1基因mRNA表达检测 | 第43-44页 |
| ·统计分析 | 第44-45页 |
| 3 结果 | 第45-51页 |
| ·重组质粒的质量鉴定及测序 | 第45-47页 |
| ·重组质粒体外干扰效果评估 | 第47-51页 |
| 4 讨论 | 第51-52页 |
| ·真核表达质粒载体的选择 | 第51页 |
| ·靶序列特异引物设计 | 第51页 |
| ·RNA干扰作用机制 | 第51-52页 |
| ·转染及RNA干扰效果 | 第52页 |
| 5 小结 | 第52-54页 |
| 参考文献 | 第54-55页 |
| 第三部分 卵泡刺激素多肽修饰聚乙二醇-聚乙烯亚胺共聚物作为RNA干扰递送载体的构建及鉴定 | 第55-84页 |
| 第一节 FSH多肽-聚乙二醇-聚乙烯亚胺的合成与鉴定 | 第56-63页 |
| 1 材料与仪器 | 第56页 |
| ·材料 | 第56页 |
| ·仪器 | 第56页 |
| 2 方法 | 第56-57页 |
| ·FSH多肽合成 | 第56页 |
| ·FSH多肽与NHS-PGE-MAL的连接 | 第56-57页 |
| ·不同PEG接枝量的F-PEG-PEI的制备 | 第57页 |
| ·不同PEG接枝量的PEG-PEI的制备 | 第57页 |
| ·结构鉴定 | 第57页 |
| 3 结果 | 第57-62页 |
| ·FSH多肽合成 | 第57-58页 |
| ·~1H-NMR图谱分析 | 第58-62页 |
| 4 讨论 | 第62页 |
| 5 小结 | 第62-63页 |
| 第二节 F-PEG-PEI/DNA纳米复合物制备及性质检测 | 第63-69页 |
| 1 材料与仪器 | 第63页 |
| ·材料 | 第63页 |
| ·仪器 | 第63页 |
| ·统计学分析软件 | 第63页 |
| 2 方法 | 第63-64页 |
| ·F-PEG-PEI/DNA纳米复合物的制备 | 第63-64页 |
| ·凝胶电泳阻滞分析 | 第64页 |
| ·复合物包封率测试 | 第64页 |
| ·复合物粒径电位测试 | 第64页 |
| 3 结果 | 第64-67页 |
| ·凝胶电泳阻滞分析 | 第64-65页 |
| ·复合物包封率测定 | 第65页 |
| ·复合物粒径电位测定 | 第65-67页 |
| 4 讨论 | 第67-68页 |
| ·F-PEG-PEI/DNA纳米复合物的制备 | 第67页 |
| ·F-PEG-PEI/DNA纳米复合物性质考察 | 第67-68页 |
| 5 小结 | 第68-69页 |
| 第三节 F-PEG-PEI/DNA纳米复合物的细胞毒性测试与体外转染效率 | 第69-76页 |
| 1 材料与仪器 | 第69页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·仪器 | 第69页 |
| ·统计学分析软件 | 第69页 |
| 2 方法 | 第69-71页 |
| ·F-PEG-PEI/DNA复合物细胞毒性检测 | 第69-70页 |
| ·F-PEG-PEI/DNA复合物细胞转染效率检测 | 第70-71页 |
| ·统计分析 | 第71页 |
| 3 结果 | 第71-75页 |
| ·细胞毒性测定 | 第71-72页 |
| ·体外转染效率测定 | 第72-75页 |
| 4 | 第75页 |
| ·细胞转染 | 第75页 |
| 5 小结 | 第75-76页 |
| 第四节 靶向RNA干扰纳米系统对CXCL1基因mRNA表达和蛋白表达的影响 | 第76-83页 |
| 1 材料与仪器 | 第76页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·仪器 | 第76页 |
| ·统计学分析软件 | 第76页 |
| 2 方法 | 第76-79页 |
| ·F-PEG-PEI/DNA纳米复合物制备 | 第76-77页 |
| ·细胞转染 | 第77页 |
| ·RNA抽提 | 第77页 |
| ·CXCL1基因mRNA表达检测 | 第77-78页 |
| ·ELISA检测CXCL1基因蛋白表达 | 第78-79页 |
| ·统计分析 | 第79页 |
| 3 结果 | 第79-81页 |
| ·CXCL1基因mRNA表达测定 | 第79-80页 |
| ·CXCL1基因蛋白表达测定 | 第80-81页 |
| 4 讨论 | 第81-82页 |
| 5 小结 | 第82-83页 |
| 参考文献 | 第83-84页 |
| 第四部分 卵泡刺激素多肽修饰的纳米复合物对卵巢癌细胞的生物学影响 | 第84-92页 |
| 1 材料与仪器 | 第84-85页 |
| ·材料 | 第84-85页 |
| ·仪器 | 第85页 |
| ·统计学分析软件 | 第85页 |
| 2 方法 | 第85-87页 |
| ·细胞生长曲线 | 第85-86页 |
| ·细胞迁移能力检测 | 第86页 |
| ·细胞侵袭能力检测 | 第86-87页 |
| ·统计分析 | 第87页 |
| 3 结果 | 第87-91页 |
| ·细胞增殖能力测定 | 第87-88页 |
| ·细胞迁移能力测定 | 第88-89页 |
| ·细胞侵袭能力测定 | 第89-91页 |
| 5 小结 | 第91-92页 |
| 参考文献 | 第92-94页 |
| 总结 | 第94-96页 |
| 创新点 | 第96-97页 |
| 后续工作及展望 | 第97-98页 |
| 综述 | 第98-122页 |
| 参考文献 | 第109-122页 |
| 致谢 | 第122-123页 |
