| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 名词缩写 | 第8-9页 |
| 第一章 综述 | 第9-28页 |
| 1.铁元素在植物中的重要作用及缺铁的危害 | 第9-10页 |
| 2.缺铁胁迫诱导的膜泡运输与铁的转运 | 第10-15页 |
| 3.三价铁转运体与YS基因家族 | 第15-18页 |
| 4.非损伤性离子扫描技术的研究进展 | 第18-25页 |
| 5.本实验研究意义及技术路线 | 第25-28页 |
| 第二章 材料及试剂 | 第28-31页 |
| 1.植物材料的培养与处理 | 第28-30页 |
| 2.常用溶液、培养基及试剂的配制方法 | 第30页 |
| 3.引物合成及测序 | 第30页 |
| 4.主要实验仪器 | 第30-31页 |
| 第三章 实验方法 | 第31-43页 |
| 1.RNA的小量提取 | 第31页 |
| 2.两步法RT-PCR | 第31-32页 |
| 3.琼脂糖凝胶电泳 | 第32页 |
| 4.目的片段的回收、纯化 | 第32页 |
| 5.PCR产物与pMD-18 T Vector的连接、转化、蓝白筛选 | 第32页 |
| 6.质粒的提取 | 第32页 |
| 7.质粒的双酶切鉴定 | 第32页 |
| 8.序列测定与分析 | 第32-33页 |
| 9.OsYSL1基因植物表达载体的构建 | 第33-36页 |
| 10.亚细胞定位观察 | 第36-37页 |
| 11.转基因烟草的鉴定 | 第37-40页 |
| 12.转OsSec27p基因烟草的抗性苗筛选 | 第40页 |
| 13.不同pH培养条件下转OsSec27p基因烟草的形态学观察 | 第40页 |
| 14.pH值测定 | 第40页 |
| 15.非损伤氢微电极检测T_2代转基因植株的H~+的分泌 | 第40-41页 |
| 16.植物组织内叶绿素的定量测定 | 第41页 |
| 17.烟草植株铁含量的测定 | 第41-42页 |
| 18.根癌农杆菌侵染水稻愈伤法转基因方法 | 第42-43页 |
| 第四章 结果与讨论 | 第43-72页 |
| 1.OsSec27p基因的研究结果及讨论 | 第43-57页 |
| ·pCAMBIA1302-OsSec27p植物表达载体的构建 | 第43页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1302-OsSec27p的农杆菌转化及分子鉴定 | 第43-44页 |
| ·pCAMBIA1302-OsSEC27p∷GFP的亚细胞定位 | 第44-46页 |
| ·OsSec27p T_1代转基因烟草的鉴定及生理指标检测 | 第46-50页 |
| ·OsSec27p T_2代转基因烟草的鉴定及生理指标检测 | 第50-54页 |
| ·关于OsSec27p基因的讨论 | 第54-57页 |
| 2.OsYSL1基因的研究结果及讨论 | 第57-72页 |
| ·两步法RT-PCR扩增OsYSL1基因 | 第57页 |
| ·OsYSL1基因与pMD18-T载体的连接 | 第57-58页 |
| ·OsYSL1基因序列的测定 | 第58页 |
| ·植物表达载体pCAMBIA1302-OsYSL1-gfp的构建 | 第58-60页 |
| ·OsYSL1基因的亚细胞定位 | 第60-65页 |
| ·植物表达载体pGPTV-AGPp-BAR-OsYSL1的构建 | 第65-66页 |
| ·转pGPTV-AGPp-BAR-OsYSL1水稻抗性愈伤组织的获得 | 第66-67页 |
| ·OsYSL1基因的序列分析及结构预测 | 第67-70页 |
| ·关于OsYSL1基因的讨论 | 第70-72页 |
| 第五章 小结和展望 | 第72-74页 |
| 1.小结 | 第72-73页 |
| ·有关OsSec27p基因的工作 | 第72页 |
| ·有关OsYSL1基因的工作 | 第72-73页 |
| 2.展望 | 第73-74页 |
| ·对OsSec27p基因工作的展望 | 第73页 |
| ·对OsYSL1基因工作的展望 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-79页 |
| 附录 | 第79-82页 |
| 致谢 | 第82页 |
