| 摘要 | 第1-7页 |
| ABSTRACT | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-42页 |
| ·引言 | 第12-15页 |
| ·研究背景 | 第12-14页 |
| ·研究目的和意义 | 第14-15页 |
| ·项目来源与经费支持 | 第15页 |
| ·国内外研究现状及评述 | 第15-40页 |
| ·植物脂肪酸合成分子生物学及相关基因的研究进展 | 第16-33页 |
| ·植物脂肪酸生物合成的基本途径 | 第17-20页 |
| ·植物脂肪酸合成相关酶 | 第20-25页 |
| ·植物脂肪酸生物合成的基因调控 | 第25-29页 |
| ·油酰磷脂酰胆碱去饱和酶(FAD2)研究进展 | 第29-33页 |
| ·柠条的生理学及遗传育种研究 | 第33-40页 |
| ·生长性状 | 第33-34页 |
| ·材性育种 | 第34-35页 |
| ·抗性育种 | 第35-37页 |
| ·食用和饲用育种的基础研究 | 第37-38页 |
| ·次生物质代谢 | 第38-39页 |
| ·问题和展望 | 第39-40页 |
| ·研究目标和主要研究内容 | 第40页 |
| ·研究目标 | 第40页 |
| ·主要研究内容 | 第40页 |
| ·本研究的技术路线 | 第40-42页 |
| 第二章 中间锦鸡儿油酸脱氢酶基因(FAD2)克隆 | 第42-54页 |
| ·材料和方法 | 第42-49页 |
| ·试验材料 | 第42页 |
| ·仪器和试剂 | 第42-43页 |
| ·试验方法 | 第43-49页 |
| ·总RNA提取及CDNA链的合成 | 第43页 |
| ·总RNA提取 | 第43页 |
| ·双链CDNA合成(用于扩增基因片段) | 第43-44页 |
| ·RT-PCR扩增FAD2基因片段 | 第44-45页 |
| ·cDNA3’/5’端的RACE | 第45-46页 |
| ·全长cDNA序列PCR扩增 | 第46页 |
| ·PCR产物的亚克隆 | 第46-49页 |
| ·结果与分析 | 第49-52页 |
| ·CAFAD2 cDNA特异性片断的RT-PCR扩增 | 第49-50页 |
| ·CAFAD2基因的组织表达谱分析 | 第50页 |
| ·CAFAD2基因的3’/5’-RACE扩增 | 第50-52页 |
| ·中间锦鸡儿FAD2基因全长序列的扩增 | 第52页 |
| ·小结与讨论 | 第52-54页 |
| ·中间锦鸡儿FAD2基因克隆试验材料的获取 | 第52页 |
| ·利用RACE获得基因序列的全长 | 第52-53页 |
| ·中间锦鸡儿CAFAD2基因的组织表达谱 | 第53-54页 |
| 第三章 中间锦鸡儿CAFAD2基因结构与功能预测 | 第54-62页 |
| ·研究方法 | 第54页 |
| ·结果与分析 | 第54-59页 |
| ·CAFAD2编码区全长序列分析 | 第54-55页 |
| ·中间锦鸡儿FAD2基因进化树分析 | 第55-56页 |
| ·CAFAD2基因编码蛋白质结构和功能域预测 | 第56-59页 |
| ·讨论 | 第59-60页 |
| ·小结 | 第60-62页 |
| 第四章 中间锦鸡儿CAFAD2基因反义表达载体构建、转化与表达 | 第62-76页 |
| ·材料和方法 | 第62-68页 |
| ·试验材料 | 第62页 |
| ·仪器和试剂 | 第62-63页 |
| ·试验方法 | 第63-68页 |
| ·CAFAD2反义表达载体的构建与转化农杆菌 | 第63-64页 |
| ·PBI121FAD2转化烟草和转基因烟草的再生 | 第64-65页 |
| ·转化再生烟草的PCR检测 | 第65页 |
| ·转基因烟草植株的SOUTHERN检测 | 第65-68页 |
| ·转反义基因烟草和对照的表型和脂肪酸分析 | 第68页 |
| ·转反义基因烟草的遗传稳定性分析 | 第68页 |
| ·结果与分析 | 第68-72页 |
| ·中间锦鸡儿FAD2基因反义表达载体的构建与转化烟草 | 第68-69页 |
| ·转化再生烟草的PCR检测 | 第69-70页 |
| ·转基因烟草的SOUTHERN杂交检测 | 第70页 |
| ·转基因烟草的表型和种子脂肪酸分析 | 第70-72页 |
| ·转基因烟草的遗传稳定性分析 | 第72页 |
| ·讨论 | 第72-75页 |
| ·CAFAD2基因的组织特异性表达 | 第72-73页 |
| ·利用CAFAD2基因反义表达培育高单不饱和脂肪酸植物 | 第73页 |
| ·CAFAD2基因的反义表达效果与基因拷贝数的关系 | 第73-74页 |
| ·内源脂肪酸含量影响CAFAD2基因的反义表达 | 第74-75页 |
| ·小结 | 第75-76页 |
| 第五章 中间锦鸡儿CAFAD2基因的正义表达 | 第76-84页 |
| ·材料和方法 | 第76-78页 |
| ·试验材料和仪器 | 第76页 |
| ·试验方法 | 第76-78页 |
| ·中间锦鸡儿CAFAD2基因正义表达载体的构建 | 第76-77页 |
| ·目的基因的遗传转化和转基因烟草的再生 | 第77页 |
| ·转化再生烟草的PCR检测和SOUTHERN杂交 | 第77页 |
| ·定量PCR检测CAFAD2基因正义表达 | 第77-78页 |
| ·转基因烟草的冬季低温培养试验 | 第78页 |
| ·转基因烟草脂肪酸分析 | 第78页 |
| ·结果与分析 | 第78-81页 |
| ·中间锦鸡儿CAFAD2基因正义表达载体的构建及植物转化 | 第78页 |
| ·中间锦鸡儿CAFAD2基因正义表达的烟草分子检测 | 第78-79页 |
| ·中间锦鸡儿CAFAD2正义转基因烟草植株表型变化 | 第79页 |
| ·中间锦鸡儿CAFAD2正义转基因烟草植株脂肪酸含量变化 | 第79-81页 |
| ·CAFAD2正义转基因烟草MRNA表达丰度变化 | 第81页 |
| ·讨论 | 第81-83页 |
| ·CAFAD2基因在叶片和种子中正义表达的特性 | 第81-82页 |
| ·CAFAD2基因正义表达提高植物低温耐受力 | 第82-83页 |
| ·小结 | 第83-84页 |
| 第六章 中间锦鸡儿和大豆FAD2基因比较研究 | 第84-96页 |
| ·引言 | 第84页 |
| ·材料和方法 | 第84-87页 |
| ·大豆FAD2基因的克隆 | 第84-85页 |
| ·大豆FAD2基因正义表达载体的构建 | 第85-86页 |
| ·大豆FAD2基因转化烟草和转基因烟草的再生 | 第86页 |
| ·大豆FAD2正义转基因烟草的分子检测 | 第86页 |
| ·定量PCR检测转基因烟草中SOYFAD2基因的表达 | 第86-87页 |
| ·转基因烟草的表型观测和脂肪酸分析 | 第87页 |
| ·结果和分析 | 第87-92页 |
| ·大豆FAD2基因的克隆 | 第87页 |
| ·大豆SOYFAD2基因正义植物表达载体的构建及植物转化 | 第87-88页 |
| ·中间锦鸡儿和大豆FAD2基因序列比较 | 第88-89页 |
| ·中间锦鸡儿和大豆FAD2基因正义转基因烟草表型和生长性状比较 | 第89-90页 |
| ·中间锦鸡儿和大豆FAD2基因全长MRNA变化 | 第90-91页 |
| ·中间锦鸡儿和大豆FAD2正义转基因烟草不同器官中脂肪酸成分变化比较 | 第91-92页 |
| ·讨论 | 第92-94页 |
| ·CAFAD2基因和SOYFAD2基因表达差异分析 | 第92-93页 |
| ·同源基因表达异同性影响因素 | 第93-94页 |
| ·CAFAD2和SOYFAD2基因对木本油料植物脂肪酸的调控作用 | 第94页 |
| ·小结 | 第94-96页 |
| 第七章 结论与展望 | 第96-99页 |
| 1.结论 | 第96-97页 |
| 2.展望 | 第97-99页 |
| 参考文献 | 第99-112页 |
| 缩略词 | 第112-114页 |
| 在读期间的学术研究 | 第114-115页 |
| 致谢 | 第115页 |
