| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-12页 |
| 第一章 绪论 | 第12-23页 |
| ·猪瘟病毒概况 | 第12-13页 |
| ·猪瘟病毒结构蛋白的结构和功能 | 第13-14页 |
| ·猪瘟病毒抗原表位的研究进展 | 第14-16页 |
| ·抗原表位研究方法 | 第16-19页 |
| ·噬菌体展示技术在抗原表位研究中的应用 | 第19-21页 |
| ·研究内容和方法 | 第21-22页 |
| ·研究目的和意义 | 第22-23页 |
| 第二章 利用噬菌体展示随机肽库鉴定猪瘟病毒E2糖蛋白N-端一个线性B细胞抗原表位 | 第23-30页 |
| ·材料和方法 | 第23-25页 |
| ·肽库、菌株与单克隆抗体 | 第24页 |
| ·单抗的纯化 | 第24页 |
| ·噬菌体展示肽库的生物淘选 | 第24页 |
| ·噬菌体夹心ELISA | 第24页 |
| ·测序DNA模板的制备与序列测定 | 第24-25页 |
| ·表位多肽的抗原性验证 | 第25页 |
| ·结果 | 第25-28页 |
| ·单克隆抗体纯化结果 | 第25-26页 |
| ·淘选的产率 | 第26页 |
| ·噬菌体ELISA检测结果 | 第26-27页 |
| ·噬菌体展示一致序列LFDGSNP | 第27页 |
| ·~(772)LFDGTNp~(778)为一个线性B细胞表位 | 第27-28页 |
| ·讨论 | 第28-30页 |
| 第三章 猪瘟病毒E2单克隆抗体的制备及其抗原表位的初步鉴定 | 第30-48页 |
| ·材料与方法 | 第31-37页 |
| ·质粒、载体和生化试剂 | 第31页 |
| ·CSFV E2基因的PCR扩增和克隆 | 第31页 |
| ·蜂素信号肽的获得 | 第31-32页 |
| ·转移载体的构建与鉴定 | 第32页 |
| ·定点突变 | 第32页 |
| ·重组杆粒的制备 | 第32页 |
| ·重组杆状病毒的制备 | 第32页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第32-33页 |
| ·Westem blot分析 | 第33页 |
| ·ELISA检测 | 第33页 |
| ·重组E2蛋白的去糖基化 | 第33页 |
| ·小鼠免疫 | 第33-34页 |
| ·细胞融合 | 第34页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的筛选 | 第34-35页 |
| ·阳性杂交瘤细胞的克隆化 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的大量制备 | 第35页 |
| ·单克隆抗体的纯化 | 第35页 |
| ·Westem blot分析 | 第35-36页 |
| ·间接免疫荧光试验(IFA) | 第36页 |
| ·单克隆抗体的亚型鉴定 | 第36页 |
| ·噬菌体展示肽库的生物淘选 | 第36页 |
| ·噬菌体夹心ELISA | 第36-37页 |
| ·测序模板的制备与序列测定 | 第37页 |
| ·结果 | 第37-45页 |
| ·重组转移载体的获得 | 第37页 |
| ·重组杆粒的PCR鉴定 | 第37-38页 |
| ·E2蛋白的纯化 | 第38页 |
| ·重组E2蛋白可被猪瘟特异性抗体所识别 | 第38-39页 |
| ·重组E2蛋白可形成二聚体 | 第39-40页 |
| ·CSFV石门株和兔化弱毒疫苗株的重组E2蛋白分子量存在差异 | 第40页 |
| ·重组E2蛋白分子量的差异是由于糖基化程度不同 | 第40-41页 |
| ·~(986)N糖基化位点是功能性糖基化位点 | 第41页 |
| ·筛选出一株分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞 | 第41页 |
| ·单克隆抗体的Western blot检测 | 第41-42页 |
| ·单克隆抗体可以特异性识别猪瘟病毒 | 第42页 |
| ·单克隆抗体纯化结果 | 第42页 |
| ·淘选的产率 | 第42-44页 |
| ·噬菌体ELISA检测结果 | 第44页 |
| ·噬菌体展示一致序列YWH | 第44-45页 |
| ·讨论 | 第45-48页 |
| 第四章 全文结论 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-55页 |
| 致谢 | 第55-56页 |
| 作者简历 | 第56页 |
