中文摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-7页 |
中英文词汇简表 | 第7-10页 |
第一章 前言 | 第10-12页 |
·RNA干扰 | 第10页 |
·端粒、端粒酶和hTERT | 第10-12页 |
第二章 材料与方法 | 第12-26页 |
·材料 | 第12-18页 |
·细胞 | 第12页 |
·试剂 | 第12-17页 |
·U6/H1双启动子SECs合成及转染试剂 | 第12-15页 |
·细胞培养及转染所需试剂 | 第15页 |
·适时荧光定量hTERT mRNA表达检测所需试剂 | 第15-16页 |
·端粒酶活性检测试剂 | 第16-17页 |
·仪器 | 第17-18页 |
·方法 | 第18-26页 |
·U6/H1双启动子SECs的构建 | 第18-22页 |
·细胞培养、转染 | 第22-23页 |
·hTERT mRNA表达定量检测 | 第23-24页 |
·端粒酶活性的检测 | 第24-25页 |
·统计分析 | 第25-26页 |
第三章 结果 | 第26-34页 |
·U6/H1双启动子SECs的构建 | 第26-29页 |
·琼脂糖凝胶电泳结果 | 第26-27页 |
·第一步和第三步PCR反应产物DNA回收纯化后经紫外分光光度法定量分析 | 第27-28页 |
·U6/H1双启动子SECs测序结果 | 第28-29页 |
·适时荧光定量PCR法检测hTERT mRNA表达量 | 第29-32页 |
·总RNA提取和鉴定 | 第29-30页 |
·管家基因及hTERT mRNA扩增曲线及熔解曲线 | 第30-32页 |
·数据及分析 | 第32页 |
·双启动子SECs对HepG2细胞端粒酶活性的影响 | 第32-34页 |
第四章 讨论 | 第34-40页 |
·RNA干扰及U6/H1双启动子SECs的体外构建 | 第34-36页 |
·SECs体外对HepG2细胞hTERT的特异抑制作用 | 第36-39页 |
·问题与展望 | 第39-40页 |
第五章 结论 | 第40-41页 |
第六章 参考文献 | 第41-46页 |
第七章 综述 | 第46-62页 |
致谢 | 第62-63页 |
攻读学位期间研究成果 | 第63页 |