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伊氏锥虫ELISA方法的建立及广西水牛伊氏锥虫感染的初步调查

摘要第1-6页
英文文摘第6-8页
目录第8-11页
文献综述第11-20页
 1 前言第11页
 2 病原学第11-13页
 3 伊氏锥虫变异规律第13-16页
 4 伊氏锥虫病的诊断学第16-20页
实验研究之一 伊氏锥虫连续多变体的采集及IFA检测第20-29页
 引言第20页
 1 材料第20-21页
   ·虫株第20页
   ·实验动物第20-21页
   ·主要试剂第21页
 2 方法第21-24页
   ·单虫克隆虫株的制备第21-22页
   ·伊氏锥虫单虫克隆虫株在4只兔子体内连续克隆群体的采集第22页
   ·伊氏锥虫的冷冻保存第22页
   ·伊氏锥虫特异抗血清及抗原涂片的制备第22-23页
   ·纯虫抗原涂片的制备第23页
   ·抗锥虫特异抗血清的制备第23页
   ·间接免疫荧光试验(IFA)第23-24页
 3 结果第24-26页
   ·单虫克隆第24页
   ·伊氏锥虫的冷冻保存第24-25页
   ·连续多变体的鉴定第25-26页
 4 讨论第26-29页
   ·单虫克隆第26页
   ·伊氏锥虫冷冻保存第26页
   ·伊氏锥虫的抗原变异第26-29页
实验研究之二 伊氏锥虫VSG的提纯与鉴定第29-39页
 引言第29页
 1 材料第29-32页
   ·虫株第29页
   ·实验动物第29页
   ·主要试剂第29-32页
   ·主要仪器设备第32页
 2 方法第32-35页
   ·虫体的复苏第32页
   ·虫体的增殖第32页
   ·虫体的纯化第32-33页
   ·伊氏锥虫VSG抗原的提纯第33页
   ·牛源抗伊氏锥虫血清的制备第33页
   ·VSG的SDS-PAGE电泳分析第33-34页
   ·Western-blot半干法第34-35页
 3 结果第35-36页
 4 讨论第36-39页
实验研究之三 水牛伊氏锥虫间接ELISA诊断方法的建立第39-49页
 引言第39页
 1 材料第39-41页
   ·虫株第39页
   ·实验动物第39-40页
   ·伊氏锥虫纯化主要试剂及材料第40页
   ·ELISA材料与试剂第40-41页
   ·主要仪器设备第41页
 2 方法第41-43页
   ·伊氏锥虫可溶性抗原的制备第41页
   ·伊氏锥虫可溶性蛋白浓度的测定第41页
   ·间接ELISA方法的建立第41-43页
 3 结果第43-47页
   ·可溶性抗原蛋白浓度的测定第43页
   ·可溶性抗原最佳稀释工作浓度的确定第43-44页
   ·阴阳参考血清与二抗的最佳稀释度的确定第44页
   ·阴阳性血清反应时间的确定第44页
   ·酶标二抗的作用时间第44-45页
   ·底物显色时间的确定第45页
   ·间接ELISA方法阴阳临界值的确定第45-46页
   ·间接ELISA特异性试验第46页
   ·血清样本的的初步检测第46-47页
 4 讨论第47-49页
实验研究之四 水牛实验感染伊氏锥虫的抗体消长规律及广西水牛伊氏锥虫血清流行病学的初步调查第49-57页
 引言第49页
 1. 材料第49-50页
   ·伊氏锥虫克隆群体:第49页
   ·KM小鼠第49-50页
   ·水牛第50页
   ·受检血清第50页
   ·ELISA相关试剂第50页
   ·主要设备仪器第50页
 2 方法第50-51页
   ·伊氏锥虫实验感染水牛第50页
   ·不同时期虫量计数第50页
   ·水牛实验感染血清的采集第50-51页
   ·临床样本的采集第51页
   ·间接ELISA检测方法第51页
 3 结果第51-55页
   ·不同时间段伊氏锥虫虫体数量的监测第51-52页
   ·水牛实验感染伊氏锥虫的抗体消长第52-53页
   ·临床血清样本的检测第53-55页
 4 讨论第55-57页
结论第57-58页
建议第58-59页
参考文献第59-67页
致谢第67-68页
个人简历第68页
攻读学位期间发表的论文情况第68-70页
附录第70-71页

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