| 中文摘要 | 第1-6页 |
| 英文摘要 | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-13页 |
| 前言 | 第13-15页 |
| 文献综述 | 第15-27页 |
| 第一节 禽呼肠孤病毒病概况 | 第15-21页 |
| 1 流行病学 | 第15页 |
| 2 病原学 | 第15-17页 |
| ·分类、形态与特性 | 第16页 |
| ·化学组成和理化性质 | 第16-17页 |
| ·抗原性 | 第17页 |
| ·致病性 | 第17页 |
| 3 分子生物学研究 | 第17-20页 |
| ·基因组及编码的蛋白 | 第18页 |
| ·S1基因 | 第18-19页 |
| ·δ3蛋白 | 第18页 |
| ·P10和P17蛋白 | 第18-19页 |
| ·S2基因编码的δ2蛋白 | 第19页 |
| ·S4基因编码的δNS蛋白 | 第19页 |
| ·M3基因编码的μNS蛋白 | 第19-20页 |
| 4 防制方法 | 第20-21页 |
| 5 诊断技术概况 | 第21页 |
| 第二节 大肠杆菌表达系统的研究 | 第21-23页 |
| 1 非融合型表达 | 第22页 |
| 2 融合型表达 | 第22-23页 |
| 3 分泌型表达 | 第23页 |
| 第三节 EUSA诊断方法研究概况 | 第23-27页 |
| ·双抗夹心法检测抗原 | 第24页 |
| ·双抗夹心法检测抗体 | 第24页 |
| ·间接法检测抗体 | 第24-25页 |
| ·竞争法检测抗体 | 第25页 |
| ·竞争法检测抗原 | 第25页 |
| ·捕获包被法测抗体 | 第25页 |
| ·ABS-ELISA法 | 第25-26页 |
| ·PCR-ELISA法 | 第26-27页 |
| 试验研究之一 禽呼肠孤病毒P10、P17非结构蛋白基因的克隆及序列分析 | 第27-35页 |
| 1 材料和方法 | 第28-29页 |
| ·病毒 | 第28页 |
| ·主要试剂 | 第28页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第28页 |
| ·ARV P10、P17蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第28-29页 |
| ·PCR产物的克隆及序列测定 | 第29页 |
| ·P10、P17基因序列比较分析 | 第29页 |
| 2 结果 | 第29-33页 |
| ·RT-PCR扩增克隆与鉴定 | 第29-30页 |
| ·测序结果 | 第30页 |
| ·P10、P17蛋白氨基酸序列比较分析 | 第30页 |
| ·P10、P17蛋白基因核苷酸及推导的氨基酸序列的同源性分析 | 第30-32页 |
| ·P10、P17蛋白遗传树分析 | 第32-33页 |
| 3.讨论 | 第33-35页 |
| 试验研究之二 禽呼肠孤病毒非结构蛋白P17基因的原核表达及其鉴定 | 第35-40页 |
| 1 材料和方法 | 第36-37页 |
| ·病毒、菌种及抗体 | 第36页 |
| ·主要试剂 | 第36页 |
| ·病毒RNA的提取 | 第36页 |
| ·ARV P17蛋白基因的RT-PCR扩增 | 第36页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第36-37页 |
| ·P17蛋白的表达及最佳诱导条件的探索 | 第37页 |
| ·P17蛋白的可溶性分析 | 第37页 |
| ·表达产物的Western-blotting鉴定 | 第37页 |
| 2.结果分析 | 第37-39页 |
| ·RT-PCR扩增克隆与鉴定 | 第37-38页 |
| ·P17蛋白的诱导表达 | 第38页 |
| ·P17蛋白可溶性分析及Western-blotting检测 | 第38-39页 |
| 3 分析及讨论 | 第39-40页 |
| 试验研究之三 禽呼肠孤病毒δ3、δ2结构蛋白和δNS、P17非结构蛋白的纯化 | 第40-44页 |
| 1.材料和方法 | 第40-41页 |
| ·质粒 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40页 |
| ·各重组蛋白的大量诱导表达 | 第40-41页 |
| ·各重组蛋白的提取及纯化 | 第41页 |
| ·蛋白质浓度,纯度的检测及保存 | 第41页 |
| 2.结果 | 第41-42页 |
| ·四个重组蛋白的表达 | 第41-42页 |
| ·重组蛋白的纯化 | 第42页 |
| ·蛋白质浓度计算 | 第42页 |
| 3 分析及讨论 | 第42-44页 |
| 实验研究之四 禽呼肠孤病毒δ_3和δ_2重组蛋白作为ELISA检测抗原的研究 | 第44-54页 |
| 1.材料和方法 | 第44-47页 |
| ·血清 | 第44-45页 |
| ·抗原及抗体 | 第45页 |
| ·主要试剂 | 第45页 |
| ·δ_3和δ_2蛋白抗体ELISA检测方法的建立 | 第45-46页 |
| ·阴、阳临界值的确定 | 第46页 |
| ·特异性试验 | 第46页 |
| ·人工感染SPF鸡的敏感性试验 | 第46页 |
| ·重复性试验 | 第46-47页 |
| 2、结果 | 第47-52页 |
| ·间接ELISA方法最佳工作条件的确定 | 第47-49页 |
| ·ELISA程序确定 | 第49页 |
| ·间接ELISA阴、阳性临界值的确定 | 第49-50页 |
| ·特异性试验 | 第50-51页 |
| ·敏感性试验 | 第51页 |
| ·重复性试验 | 第51-52页 |
| 3.讨论及结论 | 第52-54页 |
| 实验研究之五 禽呼肠孤病毒δ NS和P17非结构蛋白作为ELISA鉴别诊断抗原的研究 | 第54-64页 |
| 1.材料和方法 | 第54-57页 |
| ·血清 | 第54-55页 |
| ·质粒、菌种及抗体 | 第55页 |
| ·主要试剂 | 第55页 |
| ·δ NS和P17蛋白ELISA检测方法的初步建立 | 第55-56页 |
| ·阴、阳临界值的确定 | 第56页 |
| ·特异性试验 | 第56页 |
| ·人工感染SPF鸡的敏感性试验 | 第56页 |
| ·重复性试验 | 第56-57页 |
| 2、结果与分析 | 第57-63页 |
| ·间接ELISA诊断方法最佳工作条件的确定 | 第57-59页 |
| ·ELISA程序确定 | 第59页 |
| ·间接ELISA阴、阳性临界值的确定 | 第59-60页 |
| ·特异性试验 | 第60-61页 |
| ·敏感性试验 | 第61-62页 |
| ·重复性试验 | 第62-63页 |
| 3.分析及讨论 | 第63-64页 |
| 结论 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-71页 |
| 附录 | 第71-73页 |
| 常用英文缩写 | 第71页 |
| 实验用主要溶液的配制 | 第71-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 个人简历 | 第74页 |
| 研究生期间发表的专业论文 | 第74页 |
