| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-14页 |
| 引言 | 第14-22页 |
| 1 苹果遗传转化研究 | 第14-16页 |
| ·苹果遗传转化研究主要进展 | 第14-15页 |
| ·影响苹果遗传转化效率的因素 | 第15-16页 |
| ·转化方法 | 第15页 |
| ·叶片再生能力 | 第15页 |
| ·菌株类型 | 第15页 |
| ·农杆菌侵染条件 | 第15-16页 |
| ·存在问题 | 第16页 |
| 2 外源基因在转基因植物中的表达 | 第16-18页 |
| ·转化方法对外源基因表达的影响 | 第16-17页 |
| ·拷贝数对外源基因表达的影响 | 第17页 |
| ·外源基因和内源基因的同源性对基因表达的影响 | 第17页 |
| ·启动子对外源基因表达的影响 | 第17-18页 |
| ·环境因子对外源基因表达的影响 | 第18页 |
| 3 转基因安全性评价 | 第18-20页 |
| ·转基因植物的食用安全性 | 第18-19页 |
| ·转基因植物的生态环境安全性 | 第19-20页 |
| ·基因漂流 | 第19-20页 |
| ·对生物多样性的影响 | 第20页 |
| ·对非靶生物的影响 | 第20页 |
| 4 本项研究的背景、内容和目的 | 第20-22页 |
| 第一章 外源CpTI基因在苹果转化株系中的表达研究 | 第22-56页 |
| 1 材料与方法 | 第23-35页 |
| ·试验材料 | 第23页 |
| ·供试材料 | 第23页 |
| ·试剂及主要仪器设备 | 第23页 |
| ·试验方法 | 第23-35页 |
| ·npt Ⅱ基因的检测 | 第23页 |
| ·外源CpTI基因的PCR检测 | 第23-25页 |
| ·利用荧光原位杂交技术对外源CpTI基因在苹果染色体初步定位 | 第25-29页 |
| ·转基因株系抗虫性检测 | 第29-30页 |
| ·外源CpTI基因在mRNA水平表达研究 | 第30-34页 |
| ·转基因植株叶片蛋白毛细管区带电泳 | 第34-35页 |
| 2 结果与分析 | 第35-52页 |
| ·外源基因在常规离体继代培养植株中的稳定性 | 第35-36页 |
| ·npt Ⅱ基因的卡那霉素抗性检测 | 第35页 |
| ·外源CpTI基因的PCR检测 | 第35-36页 |
| ·外源CpTI基因在苹果细胞核上的杂交 | 第36-37页 |
| ·苹果染色体制片技术体系的建立 | 第36页 |
| ·荧光原位杂交技术参数筛选 | 第36-37页 |
| ·苹果FISH体系的初步建立 | 第37页 |
| ·外源CpTI基因在苹果细胞核上的杂交 | 第37页 |
| ·转基因植株抗虫株系的筛选 | 第37-45页 |
| ·不同转化株系抗虫性分析 | 第37-41页 |
| ·不同转化株系对棉铃虫体内类胰凝乳蛋白酶活力的影响 | 第41-45页 |
| ·外源CpTI基因在转化株系mRNA水平表达 | 第45-51页 |
| ·RNA的提取及cDNA第一链的合成 | 第45页 |
| ·RT-PCR检测外源基因在苹果组培苗中的表达 | 第45-46页 |
| ·目的基因的克隆、测序和同源性比较 | 第46-51页 |
| ·毛细管区带电泳对转化株系蛋白质表达检测 | 第51-52页 |
| 3 讨论 | 第52-54页 |
| ·外源基因在转化株系中的稳定性 | 第52页 |
| ·植物荧光原位杂交技术探讨 | 第52-53页 |
| ·外源基因在不同转化株系中的表达 | 第53页 |
| ·外源基因在不同水平表达的相关性 | 第53-54页 |
| 4 小结 | 第54-56页 |
| 第二章 苹果转基因株系特性研究 | 第56-74页 |
| 1 材料与方法 | 第58-62页 |
| ·试验材料 | 第58页 |
| ·试验内容及方法 | 第58-62页 |
| ·花粉的采集与贮藏 | 第58页 |
| ·苹果花粉畸形率测定 | 第58页 |
| ·苹果花粉离体萌发率测定 | 第58页 |
| ·苹果单花药花粉量测定 | 第58-59页 |
| ·苹果单花不同开放阶段内源激素的测定 | 第59页 |
| ·苹果花粉结构观察 | 第59页 |
| ·苹果花粉萌发动态观察 | 第59页 |
| ·转基因嘎拉果实npt Ⅱ酶活性测定 | 第59-60页 |
| ·转基因苹果嘎拉果实蛋白质毛细管区带电泳 | 第60页 |
| ·外源基因在转化株系F_1代中的表现 | 第60-62页 |
| 2 结果与分析 | 第62-70页 |
| ·花粉萌发率、畸形率和花粉量 | 第62页 |
| ·转基因苹果花粉对Kan抗性研究 | 第62-63页 |
| ·外源基因对单花不同开放阶段内源激素的影响 | 第63-64页 |
| ·转基因苹果花粉形态观察 | 第64页 |
| ·转基因苹果花粉萌发动态观察 | 第64页 |
| ·转基因嘎拉果实npt Ⅱ酶活性测定 | 第64-65页 |
| ·果实蛋白质毛细管区带电泳 | 第65-68页 |
| ·外源CpTI基因在转化株系F_1代中的表现 | 第68-70页 |
| ·转化株系F_1代植株的获得 | 第68页 |
| ·卡那霉素抗性鉴定杂交后代分离规律 | 第68-69页 |
| ·转化株系后代外源基因的分子检测 | 第69-70页 |
| 3 讨论 | 第70-73页 |
| ·转基因苹果花粉特性 | 第70页 |
| ·关于转基因苹果果实安全性的探讨 | 第70-71页 |
| ·外源基因在苹果转化株系F_1代中的表现 | 第71-73页 |
| 4 结论 | 第73-74页 |
| 第三章 外源基因在砧穗间传导特性研究 | 第74-82页 |
| 1 材料与方法 | 第75-76页 |
| ·试验材料 | 第75页 |
| ·试验方法 | 第75-76页 |
| ·嫁接方法 | 第75页 |
| ·培养方法 | 第75页 |
| ·统计方法 | 第75-76页 |
| 2 结果与分析 | 第76-79页 |
| ·组培苗质量对苹果微嫁接成活的影响 | 第76页 |
| ·不同植物生长调节剂对苹果微嫁接成活的影响 | 第76页 |
| ·接穗叶片数对苹果微嫁接成活的影响 | 第76-77页 |
| ·不同品种对苹果微嫁接成活率的影响 | 第77页 |
| ·外源基因对苹果微嫁接亲和力的影响 | 第77-78页 |
| ·转基因砧木外源npt Ⅱ基因对接穗卡那霉素抗性的影响 | 第78页 |
| ·转基因接穗外源npt Ⅱ基因对砧木卡那霉素抗性的影响 | 第78-79页 |
| 3 讨论 | 第79-81页 |
| ·影响苹果试管微嫁接成活率的因素 | 第79页 |
| ·nptⅡ标记基因在苹果砧木基因转化中的利用 | 第79-81页 |
| 4 结论 | 第81-82页 |
| 参考文献 | 第82-92页 |
| 图版 | 第92-97页 |
| 博士期间发表论文 | 第97-98页 |
| 作者简介 | 第98-99页 |
| 致谢 | 第99-100页 |
| 附录 | 第100-125页 |
