| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 缩略词表 | 第7-8页 |
| 目录 | 第8-12页 |
| 第一章 重组Arresten的外源表达 | 第12-45页 |
| 1 文献综述 | 第12-17页 |
| ·血管生成与肿瘤相关性研究 | 第12-13页 |
| ·血管生成 | 第12页 |
| ·血管生成与肿瘤相关性 | 第12-13页 |
| ·血管生成抑制因子的研究 | 第13-15页 |
| ·Arresten的研究进展 | 第15-17页 |
| ·Arresten的发现 | 第15页 |
| ·Arresten的作用机制 | 第15-16页 |
| ·Arresten的外源表达 | 第16-17页 |
| ·本实验的研究目的与意义 | 第17页 |
| 2 材料与方法 | 第17-29页 |
| ·实验试剂、菌株及溶液配制 | 第17-19页 |
| ·质粒载体与菌株 | 第17页 |
| ·工具酶与试剂 | 第17-18页 |
| ·溶液配制 | 第18-19页 |
| ·重组质粒的测序 | 第19页 |
| ·Arrestern在大肠杆菌中的表达及纯化 | 第19-27页 |
| ·引物的设计 | 第19页 |
| ·Arrestern基因的PCR扩增 | 第19-20页 |
| ·PCR纯化产物的双酶切 | 第20页 |
| ·pET22b(+)线性载体的获得 | 第20-21页 |
| ·DNA片段与线性载体的连接 | 第21页 |
| ·CaCl_2法制备大肠杆菌感受态 | 第21-22页 |
| ·DNA连接产物的转化 | 第22-23页 |
| ·重组质粒的筛选与鉴定 | 第23-25页 |
| ·Arresten在E.coli BL21(DE3)中的表达及鉴定 | 第25页 |
| ·外源蛋白的大量表达及纯化 | 第25-27页 |
| ·Arresten在真核细胞中的表达 | 第27-29页 |
| ·真核表达载体的构建 | 第27-28页 |
| ·重组质粒转染HEK293A细胞 | 第28-29页 |
| 3 结果与讨论 | 第29-41页 |
| ·Arresten在大肠杆菌中的表达 | 第29-33页 |
| ·目的基因的扩增 | 第29-30页 |
| ·重组质粒的检测 | 第30-31页 |
| ·Arresten在E.coli BL21(DE3)中的表达 | 第31-32页 |
| ·Western-Blot鉴定表达产物 | 第32-33页 |
| ·Arresten在哺乳动物细胞中的表达 | 第33-39页 |
| ·目的片段的PCR扩增 | 第33页 |
| ·重组质粒的检测 | 第33-38页 |
| ·HEK293A细胞转染 | 第38-39页 |
| ·小结 | 第39页 |
| ·讨论 | 第39-40页 |
| ·预计今后开展的工作 | 第40页 |
| ·本实验的创新点 | 第40-41页 |
| 4 参考文献 | 第41-45页 |
| 第二章 多甲氧基黄酮对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞胰岛素分泌的影响 | 第45-70页 |
| 1 研究背景与意义 | 第45-50页 |
| ·PMFs的发现及构效关系 | 第45-47页 |
| ·PMFs的发现 | 第45页 |
| ·多甲氧基黄酮的构效关系 | 第45-47页 |
| ·PMFs的生物学活性 | 第47-50页 |
| ·抗肿瘤活性 | 第47-48页 |
| ·抗炎活性 | 第48页 |
| ·抗氧化活性 | 第48页 |
| ·抗动脉粥样硬化活性 | 第48-49页 |
| ·抗糖尿病活性 | 第49-50页 |
| ·本课题的研究目的与意义 | 第50页 |
| 2 材料与方法 | 第50-56页 |
| ·材料 | 第50-51页 |
| ·细胞系 | 第50页 |
| ·试剂及其他材料 | 第50-51页 |
| ·方法 | 第51-56页 |
| ·PMFs的制备与含量测定 | 第51-52页 |
| ·大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞的培养 | 第52页 |
| ·PMFs对大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞的毒性实验 | 第52-53页 |
| ·PMFs对胰岛素分泌的影响作用 | 第53页 |
| ·PMFs对胰岛素基因表达的影响 | 第53-56页 |
| 3 结果与讨论 | 第56-70页 |
| ·结果 | 第56-61页 |
| ·PMFs的制备 | 第56页 |
| ·大鼠胰岛β细胞系INS-1细胞倍增时间的测定 | 第56-57页 |
| ·PMFs对INS-1细胞的毒性实验 | 第57-58页 |
| ·PMFs对INS-1细胞胰岛素分泌的影响 | 第58-59页 |
| ·PMFs对INS-1细胞胰岛素mRNA表达的影响 | 第59-60页 |
| ·PMFs对INS-1细胞PDX1 mRNA表达的影响 | 第60-61页 |
| ·小结 | 第61-62页 |
| ·讨论 | 第62-64页 |
| ·今后可以深入开展的工作 | 第64页 |
| ·本研究的创新点 | 第64-65页 |
| 4 参考文献 | 第65-70页 |
| 硕士学位期间取得的科研成果 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |
