| 摘要 | 第1-6页 |
| Abstract | 第6-8页 |
| 前言 | 第8-10页 |
| 文献综述 | 第10-27页 |
| 1. 噬菌体抗体库技术及其研究进展 | 第10-21页 |
| ·噬菌体抗体库技术的产生 | 第10-11页 |
| ·噬菌体展示技术载体系统的发展 | 第11-14页 |
| ·噬菌体抗体库的类型 | 第14-17页 |
| ·噬菌体抗体库的构建 | 第17-18页 |
| ·噬菌体抗体库的筛选 | 第18-20页 |
| ·噬菌体抗体库技术的应用 | 第20-21页 |
| 2. 米尔比霉素肟化物及小分子酶联免疫分析 | 第21-27页 |
| ·米尔比霉素肟化物 | 第21-22页 |
| ·小分子酶联免疫分析 | 第22-27页 |
| 第一章 米尔比霉素肟化物人工抗原的合成及动物免疫 | 第27-36页 |
| 引言 | 第27页 |
| 1 材料与方法 | 第27-32页 |
| ·试验材料 | 第27-28页 |
| ·人工抗原的合成及鉴定 | 第28-30页 |
| ·动物免疫 | 第30页 |
| ·ELISA法测定抗体效价及灵敏度 | 第30-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-34页 |
| ·偶联物的紫外扫描鉴定 | 第32-33页 |
| ·不连续体系SDS-PAGE鉴定 | 第33页 |
| ·抗体效价及工作浓度测定 | 第33-34页 |
| ·米尔比霉素肟化物标准抑制曲线 | 第34页 |
| 3. 讨论 | 第34-36页 |
| ·人工抗原的合成 | 第34-35页 |
| ·多克隆抗体效价及灵敏度的测定 | 第35-36页 |
| 第二章 抗体V_H、V_L基因的扩增及ScFv基因的构建 | 第36-46页 |
| 引言 | 第36页 |
| 1 材料与方法 | 第36-42页 |
| ·试验材料 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| ·主要试剂 | 第37页 |
| ·脾细胞总RNA提取 | 第37-38页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第38页 |
| ·抗体重链可变区(V_H)和轻链可变区(V_L)基因片段的扩增 | 第38-41页 |
| ·V_H和V_L基因扩增产物的纯化及定量 | 第41页 |
| ·ScFv基因的构建 | 第41-42页 |
| 2. 试验结果 | 第42-45页 |
| ·RNA的纯度及浓度 | 第42-43页 |
| ·可变区基因V_H、V_L的克隆及定量 | 第43-44页 |
| ·ScFv基因的构建及扩增 | 第44-45页 |
| 3. 讨论 | 第45-46页 |
| 第三章 ScFv噬菌体抗体库的构建 | 第46-56页 |
| 引言 | 第46页 |
| 1. 材料与方法 | 第46-52页 |
| ·工具酶及试剂 | 第46-47页 |
| ·ScFv基因的双酶切 | 第47-48页 |
| ·ScFv基因与pCANTAB5E载体的连接 | 第48-49页 |
| ·E.coli TG1感受态细胞的制备 | 第49-50页 |
| ·连接产物的转化 | 第50页 |
| ·重组质粒的提取 | 第50-51页 |
| ·转化子的鉴定 | 第51-52页 |
| ·噬菌体单链抗体表面展示文库的构建 | 第52页 |
| 2. 结果与分析 | 第52-54页 |
| ·转化子的PCR鉴定 | 第52-53页 |
| ·重组质粒的测序确证 | 第53-54页 |
| ·噬菌体抗体库库容量 | 第54页 |
| 3. 讨论 | 第54-56页 |
| 全文总结 | 第56-57页 |
| 附录 | 第57-61页 |
| 参考文献 | 第61-67页 |
| 致谢 | 第67页 |