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基于ITO的单分子检测及其应用于电转印技术的初步探讨

中文摘要第1-10页
ABSTRACT第10-12页
符号说明第12-13页
前言第13-28页
 1.Western blot在蛋白质研究中的应用及发展第13-20页
 2.单分子检测第20-24页
 3.ITO导电玻璃在光学及生物检测方面的应用第24-27页
 4.展望第27-28页
第一章 全内反射荧光显微术在导电玻璃上检测溶液中单个荧光标记抗体分子第28-49页
   ·引言第28-29页
   ·实验部分第29-33页
     ·仪器第29-30页
     ·材料与试剂第30页
     ·实验步骤第30-33页
       ·ITO导电玻璃的制作第30页
       ·ITO导电玻璃的洗涤第30-31页
       ·全内反射状态的调节第31-32页
       ·全内反射状态下检测单个Alexa488标记的羊抗鼠IgG分子第32-33页
         ·小池的制作第32-33页
         ·单分子成像第33页
   ·结果与讨论第33-48页
     ·ITO导电玻璃镀膜时间的选择第33页
     ·背景荧光的消除第33-37页
       ·ITO导电玻璃的预漂白第34-35页
       ·缓冲溶液的过滤第35-36页
       ·缓冲溶液的预漂白第36-37页
     ·ITO上单个Alexa488标记的羊抗鼠IgG分子的检测第37-48页
       ·单分子检测中信噪比的计算方法第37页
       ·单分子证明第37-38页
       ·图像选取范围的选择第38页
       ·激光功率的选择第38-41页
       ·曝光时间的选择第41-43页
       ·单分子成像第43页
       ·单分子计数检测羊抗鼠IgG溶液浓度第43-48页
   ·结论第48-49页
第二章 全内反射荧光显微术检测固定在硅烷化的ITO导电玻璃上的单个小鼠IgG抗原分子第49-68页
   ·引言第49页
   ·实验部分第49-52页
     ·仪器第49页
     ·材料与试剂第49-50页
     ·实验步骤第50-52页
       ·转印膜荧光背景的检测第50页
       ·保湿盒的制作第50-51页
       ·ITO导电玻璃的硅烷化第51-52页
         ·硅烷化前的洗涤第51页
         ·ITO导电玻璃的活化第51页
         ·硅烷化的方法第51-52页
       ·全内反射荧光显微术检测硅烷化的ITO导电玻璃上单个小鼠IgG分子第52页
         ·全内反射状态的调节第52页
         ·检测固定在硅烷化的ITO导电玻璃上的单个小鼠IgG分子第52页
   ·结果与讨论第52-67页
     ·转印膜的荧光背景第52-54页
     ·ITO导电玻璃硅烷化不同时间对小鼠IgG分子吸附的影响第54-56页
     ·全内反射荧光显微术检测硅烷化的ITO导电玻璃上单个小鼠IgG分子第56-67页
       ·荧光背景的消除第56页
       ·激光功率的选择第56页
       ·曝光时间的选择第56-57页
       ·小鼠IgG固定在硅烷化的ITO导电玻璃上的最佳时间的选择第57-58页
       ·BSA封闭液的最佳封闭时间第58-60页
       ·TBS缓冲液最佳漂洗时间的选择第60-61页
       ·荧光标记抗体与目标抗原的最佳孵育时间的选择第61-63页
       ·荧光标记抗体与目标抗原结合的最佳浓度比例的选择第63-65页
       ·全内反射荧光显微术检测固定在硅烷化的导电玻璃上的单个小鼠IgG分子第65-67页
   ·结论第67-68页
第三章 应用ITO导电玻璃的电转印技术初步探讨第68-81页
   ·引言第68-69页
   ·实验部分第69-76页
     ·仪器第69页
     ·材料与试剂第69-70页
     ·实验步骤第70-76页
       ·聚丙烯酰胺凝胶电泳进样第70-73页
         ·凝胶槽的制作第70-71页
         ·聚丙烯酰胺凝胶的制备第71-72页
         ·电泳进样第72-73页
       ·电转印检测凝胶中的样品第73-76页
         ·ITO导电玻璃的硅烷化第73页
         ·电转印装置中电极的制作第73页
         ·电转印装置的制作第73-75页
         ·改进的电转印方法转印凝胶中Alexa488标记的羊抗鼠IgG第75-76页
   ·结果与讨论第76-79页
     ·电转印使用的最佳电压第76-77页
     ·电转印的转印效率第77-79页
   ·结论第79-81页
参考文献第81-91页
致谢第91-92页
学位论文评阅及答辩情况表第92页

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