中文摘要 | 第1-10页 |
ABSTRACT | 第10-12页 |
符号说明 | 第12-13页 |
前言 | 第13-28页 |
1.Western blot在蛋白质研究中的应用及发展 | 第13-20页 |
2.单分子检测 | 第20-24页 |
3.ITO导电玻璃在光学及生物检测方面的应用 | 第24-27页 |
4.展望 | 第27-28页 |
第一章 全内反射荧光显微术在导电玻璃上检测溶液中单个荧光标记抗体分子 | 第28-49页 |
·引言 | 第28-29页 |
·实验部分 | 第29-33页 |
·仪器 | 第29-30页 |
·材料与试剂 | 第30页 |
·实验步骤 | 第30-33页 |
·ITO导电玻璃的制作 | 第30页 |
·ITO导电玻璃的洗涤 | 第30-31页 |
·全内反射状态的调节 | 第31-32页 |
·全内反射状态下检测单个Alexa488标记的羊抗鼠IgG分子 | 第32-33页 |
·小池的制作 | 第32-33页 |
·单分子成像 | 第33页 |
·结果与讨论 | 第33-48页 |
·ITO导电玻璃镀膜时间的选择 | 第33页 |
·背景荧光的消除 | 第33-37页 |
·ITO导电玻璃的预漂白 | 第34-35页 |
·缓冲溶液的过滤 | 第35-36页 |
·缓冲溶液的预漂白 | 第36-37页 |
·ITO上单个Alexa488标记的羊抗鼠IgG分子的检测 | 第37-48页 |
·单分子检测中信噪比的计算方法 | 第37页 |
·单分子证明 | 第37-38页 |
·图像选取范围的选择 | 第38页 |
·激光功率的选择 | 第38-41页 |
·曝光时间的选择 | 第41-43页 |
·单分子成像 | 第43页 |
·单分子计数检测羊抗鼠IgG溶液浓度 | 第43-48页 |
·结论 | 第48-49页 |
第二章 全内反射荧光显微术检测固定在硅烷化的ITO导电玻璃上的单个小鼠IgG抗原分子 | 第49-68页 |
·引言 | 第49页 |
·实验部分 | 第49-52页 |
·仪器 | 第49页 |
·材料与试剂 | 第49-50页 |
·实验步骤 | 第50-52页 |
·转印膜荧光背景的检测 | 第50页 |
·保湿盒的制作 | 第50-51页 |
·ITO导电玻璃的硅烷化 | 第51-52页 |
·硅烷化前的洗涤 | 第51页 |
·ITO导电玻璃的活化 | 第51页 |
·硅烷化的方法 | 第51-52页 |
·全内反射荧光显微术检测硅烷化的ITO导电玻璃上单个小鼠IgG分子 | 第52页 |
·全内反射状态的调节 | 第52页 |
·检测固定在硅烷化的ITO导电玻璃上的单个小鼠IgG分子 | 第52页 |
·结果与讨论 | 第52-67页 |
·转印膜的荧光背景 | 第52-54页 |
·ITO导电玻璃硅烷化不同时间对小鼠IgG分子吸附的影响 | 第54-56页 |
·全内反射荧光显微术检测硅烷化的ITO导电玻璃上单个小鼠IgG分子 | 第56-67页 |
·荧光背景的消除 | 第56页 |
·激光功率的选择 | 第56页 |
·曝光时间的选择 | 第56-57页 |
·小鼠IgG固定在硅烷化的ITO导电玻璃上的最佳时间的选择 | 第57-58页 |
·BSA封闭液的最佳封闭时间 | 第58-60页 |
·TBS缓冲液最佳漂洗时间的选择 | 第60-61页 |
·荧光标记抗体与目标抗原的最佳孵育时间的选择 | 第61-63页 |
·荧光标记抗体与目标抗原结合的最佳浓度比例的选择 | 第63-65页 |
·全内反射荧光显微术检测固定在硅烷化的导电玻璃上的单个小鼠IgG分子 | 第65-67页 |
·结论 | 第67-68页 |
第三章 应用ITO导电玻璃的电转印技术初步探讨 | 第68-81页 |
·引言 | 第68-69页 |
·实验部分 | 第69-76页 |
·仪器 | 第69页 |
·材料与试剂 | 第69-70页 |
·实验步骤 | 第70-76页 |
·聚丙烯酰胺凝胶电泳进样 | 第70-73页 |
·凝胶槽的制作 | 第70-71页 |
·聚丙烯酰胺凝胶的制备 | 第71-72页 |
·电泳进样 | 第72-73页 |
·电转印检测凝胶中的样品 | 第73-76页 |
·ITO导电玻璃的硅烷化 | 第73页 |
·电转印装置中电极的制作 | 第73页 |
·电转印装置的制作 | 第73-75页 |
·改进的电转印方法转印凝胶中Alexa488标记的羊抗鼠IgG | 第75-76页 |
·结果与讨论 | 第76-79页 |
·电转印使用的最佳电压 | 第76-77页 |
·电转印的转印效率 | 第77-79页 |
·结论 | 第79-81页 |
参考文献 | 第81-91页 |
致谢 | 第91-92页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第92页 |