| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-19页 |
| 第一章 文献综述 | 第19-44页 |
| 一、利用条件性启动子调控基因转录来研究基因功能的系统 | 第20-24页 |
| 1、四环素操纵系统 | 第20-22页 |
| 2、阿拉伯糖操纵系统 | 第22-24页 |
| 二、利用条件性重组酶调控基因打靶来研究基因功能的系统 | 第24-29页 |
| 1. Cre/loxP和Flp/FRT 系统 | 第24-25页 |
| 2、条件性重组酶系统 | 第25-28页 |
| 3、系统特点 | 第28-29页 |
| 三、利用RNA 干扰（RNAI）来研究基因功能的系统 | 第29-32页 |
| 1、基本原理 | 第29页 |
| 2、系统特点 | 第29-32页 |
| 四、利用小分子控制蛋白降解来研究基因功能的系统 | 第32-36页 |
| 1、N端加尾调控蛋白稳定性的系统 | 第32-34页 |
| 2、利用小分子控制蛋白稳定性来研究蛋白功能的系统 | 第34-36页 |
| 五、利用小分子或温度控制蛋白剪切来研究基因功能的系统 | 第36-43页 |
| 1、蛋白剪切的机制与应用 | 第37-40页 |
| 2、利用小分子控制蛋白剪切研究基因功能的系统 | 第40-41页 |
| 3、利用温度控制蛋白剪切研究基因功能的系统 | 第41-43页 |
| 六、总结 | 第43-44页 |
| 第二章 基于蛋白内含肽的温敏表达系统 | 第44-74页 |
| 一、背景介绍 | 第44-45页 |
| 二、立题意义 | 第45页 |
| 三、技术策略 | 第45-46页 |
| 四、材料和方法 | 第46-59页 |
| 1、系统构建 | 第47-51页 |
| 2、系统检测 | 第51-54页 |
| 3、引物、菌株和质粒的列表与图示 | 第54-59页 |
| 五、结果与讨论 | 第59-72页 |
| 1、温敏T7 RNA 聚合酶的构建与体外活性检测 | 第59-60页 |
| 2、蛋白表达效率检测 | 第60-62页 |
| 3、细胞表型检测 | 第62-64页 |
| 4、定量PCR 检测 | 第64-65页 |
| 5、Western Blot 与β-半乳糖苷酶活性检测 | 第65-66页 |
| 6、目的基因表达终止效率检测 | 第66-67页 |
| 7、T7终止子的必需性检测 | 第67-70页 |
| 8、讨论 | 第70-72页 |
| 六、结论 | 第72-74页 |
| 第三章 基于重组酶的条件性基因敲除系统 | 第74-108页 |
| 一、背景介绍 | 第74页 |
| 二、立题意义 | 第74-75页 |
| 三、技术策略 | 第75-76页 |
| 四、材料和方法 | 第76-91页 |
| 1、系统构建 | 第76-81页 |
| 2、系统检测 | 第81-82页 |
| 3、肺炎衣原体AR39 核酸酶H 性质分析 | 第82-84页 |
| 4、引物、菌株和质粒的列表与图示 | 第84-91页 |
| 五、结果与讨论 | 第91-107页 |
| 1、系统效率检测 | 第91-93页 |
| 2、可行性检测——模式实验 | 第93-96页 |
| 3、肺炎衣原体AR39中两个核酸酶H基因的分析与鉴定 | 第96-103页 |
| 4、讨论 | 第103-107页 |
| 六、结论 | 第107-108页 |
| 第四章 总结与展望 | 第108-109页 |
| 第五章 参考文献 | 第109-122页 |
| 附录 1 主要试剂 | 第122-125页 |
| 附录 2 通用实验流程 | 第125-126页 |
| 致谢 | 第126-127页 |
| 攻读博士学位期间发表的学术论文目录 | 第127-129页 |
