| 独创性声明 | 第1页 |
| 学位论文版权使 | 第2-7页 |
| 摘要 | 第7-10页 |
| Abstract | 第10-14页 |
| 第1章 文献综述 | 第14-28页 |
| ·几丁质的结构及分布 | 第14-16页 |
| ·几丁质的结构、特征 | 第14-16页 |
| ·几丁质的分布 | 第16页 |
| ·几丁质酶的种类、分布及作用 | 第16-19页 |
| ·几丁质酶的种类 | 第17-18页 |
| ·几丁质酶的分布 | 第18-19页 |
| ·几丁质酶在含几丁质生物新陈代谢中所发挥的作用 | 第19页 |
| ·几丁质酶抑制物的研究现状 | 第19-25页 |
| ·几丁质酶抑制物来源 | 第20页 |
| ·几丁质酶抑制物的种类及抑制机理 | 第20-24页 |
| ·几丁质酶抑制物的新功能的开发和研究 | 第24-25页 |
| ·几丁质酶抑制物应用于生产时存在的问题及应用前景 | 第25页 |
| ·弹性蛋白酶研究状况 | 第25-26页 |
| ·弹性蛋白酶的来源 | 第25页 |
| ·弹性蛋白酶的作用 | 第25页 |
| ·弹性蛋白酶作为几丁质酶抑制物所具有的优势 | 第25-26页 |
| ·化学农药造成的危害,微生物农药的优势 | 第26-28页 |
| ·化学农药的危害 | 第26页 |
| ·微生物农药的优势 | 第26-27页 |
| ·微生物来源几丁质酶抑制物的作为生物农药所具有的优势 | 第27-28页 |
| 第2章 引言 | 第28-32页 |
| ·研究背景与意义 | 第28页 |
| ·微生物来源几丁质酶抑制物的研究目的和意义 | 第28页 |
| ·几丁质酶抑制物应用于生产实际时所遇到的实际困难与问题 | 第28页 |
| ·主要研究内容 | 第28-29页 |
| ·几丁质酶抑制物产生菌的筛选鉴定 | 第28-29页 |
| ·活性成分的分离纯化 | 第29页 |
| ·目的菌株生产几丁质酶抑制物培养条件的优化 | 第29页 |
| ·几丁质酶抑制物编码相关基因的克隆分析及表达研究 | 第29页 |
| ·抑制机理的初步探索 | 第29页 |
| ·技术路线 | 第29-30页 |
| ·本论文的创新点 | 第30-32页 |
| 第3章 几丁质酶抑制物产生菌的分离筛选 | 第32-44页 |
| ·材料 | 第32-33页 |
| ·实验仪器与设备 | 第32页 |
| ·化学试剂 | 第32-33页 |
| ·实验方法 | 第33-37页 |
| ·土壤样品的采集处理 | 第33页 |
| ·菌种的分离培养 | 第33-34页 |
| ·胶体几丁质制备方法 | 第34页 |
| ·家蚕几丁质粗酶制备方法 | 第34页 |
| ·几丁质酶活性检测方法 | 第34-35页 |
| ·几丁质酶抑制物产生菌筛选方法 | 第35页 |
| ·氨基葡萄糖标准曲线的制作 | 第35-37页 |
| ·几丁质酶抑制活性发酵液抑制酶谱的检测分析 | 第37页 |
| ·结果与分析 | 第37-42页 |
| ·初筛试验结果 | 第38页 |
| ·复筛试验结果 | 第38-39页 |
| ·目的菌株几丁质酶抑制活性发酵液抑制酶谱的研究结果 | 第39-42页 |
| ·小结 | 第42-44页 |
| 第4章 几丁质酶抑制物产生菌的菌种鉴定 | 第44-58页 |
| ·材料 | 第44页 |
| ·实验菌株 | 第44页 |
| ·主要使用仪器 | 第44页 |
| ·试剂 | 第44页 |
| ·主要使用培养基 | 第44页 |
| ·方法 | 第44-47页 |
| ·经典鉴定方法 | 第44-45页 |
| ·16S rRNA基因分析 | 第45-47页 |
| ·结果与分析 | 第47-55页 |
| ·菌株形态学特征 | 第48-49页 |
| ·菌株生理生化特征 | 第49-50页 |
| ·1237~#菌株16S rRNA基因扩增、测序分析 | 第50-55页 |
| ·小结 | 第55-58页 |
| 第5章 几丁质酶抑制活性成分的分离纯化及性质研究 | 第58-76页 |
| ·材料 | 第58-59页 |
| ·供试菌种 | 第58页 |
| ·实验仪器设备 | 第58-59页 |
| ·试剂 | 第59页 |
| ·培养基 | 第59页 |
| ·方法 | 第59-65页 |
| ·几丁质酶抑制活性的检测与计算方法 | 第59页 |
| ·活性发酵液的制备方法 | 第59页 |
| ·活性发酵液中几丁质酶抑制活性成分理化性质的初步探索 | 第59-60页 |
| ·几丁质酶抑制活性成分的分离纯化 | 第60-63页 |
| ·弹性蛋白酶活检测方法 | 第63页 |
| ·猪胰腺弹性蛋白酶对家蚕几丁质酶活性的影响 | 第63页 |
| ·活性物质纯品对家蚕生长的影响 | 第63页 |
| ·活性物质纯品与几丁质酶作用前后的碱性Native-PAGE和SDS-PAGE电泳 | 第63页 |
| ·Native-PAGE的考马斯亮兰染色 | 第63-65页 |
| ·结果与分析 | 第65-74页 |
| ·几丁质酶抑制活性成分理化性质初探结果 | 第65-66页 |
| ·活性物质的分离纯化 | 第66-70页 |
| ·纯化活性样品的电泳转膜、N-端10个氨基酸测序 | 第70-71页 |
| ·弹性蛋白酶活性检测结果 | 第71页 |
| ·猪胰腺弹性蛋白酶对家蚕几丁质酶的作用 | 第71-72页 |
| ·Chi-Elastase对家蚕生长的影响 | 第72页 |
| ·Chi-Elastase与几丁质酶作用前后的SDS-PAGE及Native-PAGE结果 | 第72-74页 |
| ·小结 | 第74-76页 |
| 第6章 Chi-Elastase生产条件的优化 | 第76-88页 |
| ·材料 | 第76页 |
| ·供试菌株 | 第76页 |
| ·主要药品和试剂 | 第76页 |
| ·培养基 | 第76页 |
| ·方法 | 第76-78页 |
| ·菌种培养方法 | 第76页 |
| ·几丁质酶抑制物活性检测方法 | 第76-77页 |
| ·Pseudomonas.sp 1237~#菌株生长曲线的绘制 | 第77页 |
| ·单因素实验设计 | 第77-78页 |
| ·正交实验方法 | 第78页 |
| ·结果与分析 | 第78-86页 |
| ·Pseudomonas sp.1237~#菌株生长曲线 | 第78-79页 |
| ·单因素选择结果 | 第79-82页 |
| ·正交实验结果及回归分析 | 第82-86页 |
| ·小结 | 第86-88页 |
| 第7章 Chi-Elastase编码基因的克隆分析及表达研究 | 第88-100页 |
| ·材料 | 第88页 |
| ·供试菌种与设备 | 第88页 |
| ·试剂及培养基 | 第88页 |
| ·方法 | 第88-92页 |
| ·Chi-Elastase N-端10个氨基酸序列分析研究 | 第88页 |
| ·Chi-Elastase前体蛋白编码基因的克隆分析 | 第88-89页 |
| ·Chi-Elastase成熟蛋白编码序列的表达研究 | 第89-91页 |
| ·表达产物的活性检测 | 第91-92页 |
| ·结果与分析 | 第92-99页 |
| ·Chi-Elastase N-端10个氨基酸序列比对分析结果 | 第92页 |
| ·Chi-Elastase前体蛋白编码基因克隆研究结果 | 第92-94页 |
| ·Chi-Elastase成熟蛋白编码序列的表达研究结果 | 第94-98页 |
| ·表达产物的活性检测 | 第98-99页 |
| ·小结 | 第99-100页 |
| 第8章 Chi-Elastase特异性水解家蚕几丁质酶机理的初探 | 第100-112页 |
| ·假单胞菌弹性蛋白酶序列分析及作用特性 | 第100-101页 |
| ·假单胞菌弹性蛋白酶二级结构分析 | 第100页 |
| ·假单胞菌弹性蛋白酶三级结构分析 | 第100-101页 |
| ·家蚕几丁质酶与其它3种酶序列的比较分析 | 第101-110页 |
| ·几种酶氨基酸序列的选取 | 第101-103页 |
| ·几种酶氨基酸序列的比对分析 | 第103-106页 |
| ·四种几丁质酶二级结构分析比较 | 第106-108页 |
| ·四种几丁质酶三级结构分析比较 | 第108-110页 |
| ·结论 | 第110-112页 |
| 第9章 主要研究结论 | 第112-114页 |
| 参考文献 | 第114-122页 |
| 攻读博士学位期间发表论文及参研课题情况 | 第122-124页 |
| 致谢 | 第124页 |
