| 独创性声明 | 第1页 |
| 论文使用授权的说明 | 第3-6页 |
| 缩略词表 | 第6-7页 |
| 图表清单 | 第7-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| Abstract | 第9-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| Ⅰ 文献综述 | 第13-27页 |
| 1.γ-氨基丁酸研究进展 | 第13-18页 |
| 2.谷氨酸脱羧酶研究进展 | 第18-20页 |
| 3.植物基因克隆技术进展 | 第20-26页 |
| 4.本研究的目的和意义 | 第26-27页 |
| Ⅱ 水稻γ-氨基丁酸合成酶基因的克隆及其原核表达载体构建 | 第27-60页 |
| 1.材料 | 第27-28页 |
| 2.方法 | 第28-45页 |
| ·植物材料的处理 | 第28-29页 |
| ·总RNA的提取和检测 | 第29-30页 |
| ·RT-PCR获得目的基因的保守区域 | 第30-34页 |
| ·3’RACE获得目的基因的3’端 | 第34-36页 |
| ·5’RACE获得目的基因的5’端 | 第36-40页 |
| ·目的基因编码序列(ORF)的扩增 | 第40-41页 |
| ·原核表达载体pETgad的构建 | 第41-45页 |
| ·pET载体的制备 | 第41-42页 |
| ·目的基因小片段的制备 | 第42-44页 |
| ·原核表达载体的构建 | 第44-45页 |
| 3.结果与分析 | 第45-57页 |
| ·RNA抽提 | 第45页 |
| ·水稻γ-氨基丁酸合成酶基因全长cDNA的克隆 | 第45-50页 |
| ·RT—PCR | 第45-46页 |
| ·3’RACE扩增 | 第46-47页 |
| ·5’RACE扩增 | 第47-48页 |
| ·水稻γ-氨基丁酸合成酶基因编码序列的扩增 | 第48-50页 |
| ·水稻γ-氨基丁酸合成酶基因的序列分析 | 第50-55页 |
| ·原核表达载体(pETgad)的构建 | 第55-57页 |
| 4.讨论 | 第57-58页 |
| ·材料的选择与处理 | 第57-58页 |
| ·γ-氨基丁酸合成酶基因 | 第58页 |
| ·原核表达 | 第58页 |
| 5.本文小结 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-65页 |
| 附录1 pMD18-T载体的物理图谱 | 第65-66页 |
| 附录2 pET-28a-c(+)载体的物理图谱 | 第66-67页 |
| 附录3 γ-氨基丁酸合成酶基因的原核表达载体的构建示意图 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |