| 中文摘要 | 第1-4页 |
| 英文摘要 | 第4-7页 |
| 一、前言 | 第7-20页 |
| ·干旱对玉米的影响 | 第7-8页 |
| ·玉米国内外的生产状况 | 第7页 |
| ·干旱是制约玉米生产的主要因素之一 | 第7-8页 |
| ·干旱对玉米的伤害 | 第8页 |
| ·玉米的抗旱研究 | 第8-13页 |
| ·玉米抗旱生理生化机制 | 第8-10页 |
| ·玉米对干旱、盐、冷等胁迫的交叉反应 | 第10页 |
| ·植物干旱诱导蛋白 | 第10-12页 |
| ·玉米抗旱指标 | 第12-13页 |
| ·玉米转基因研究 | 第13-19页 |
| ·玉米再生体系 | 第13-14页 |
| ·单子叶植物的遗传转化 | 第14-17页 |
| ·玉米转基因研究进展 | 第17-19页 |
| ·本研究工作的范围和意义 | 第19-20页 |
| 二、材料方法 | 第20-36页 |
| ·本实验所用细菌菌株、培养基及其它溶液的种类与组成 | 第20-24页 |
| ·菌株与质粒 | 第20-21页 |
| ·培养基及其溶液的种类与组成 | 第21-23页 |
| ·溶液的配制 | 第23-24页 |
| ·本实验所用的玉米品种 | 第24页 |
| ·基因克隆及分子操作 | 第24-33页 |
| ·质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·感受态细菌的制备 | 第25页 |
| ·质粒的热转化 | 第25页 |
| ·用三亲结合的方法向农杆菌导入目的质粒 | 第25-26页 |
| ·限制性内切酶反应与连接反应 | 第26页 |
| ·玉米RNA的提取纯化 | 第26-27页 |
| ·RA33G4全长cDNA的合成 | 第27-29页 |
| ·引物设计 | 第29-30页 |
| ·PCR反应 | 第30页 |
| ·凝胶电泳 | 第30-31页 |
| ·DNA片段浓度、大小测算 | 第31页 |
| ·从凝胶中回收目的DNA片段 | 第31页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第31-33页 |
| ·玉米组织培养和转化 | 第33-36页 |
| ·玉米生长调节剂的种类与配制 | 第33-34页 |
| ·玉米种子的取材与消毒 | 第34页 |
| ·丛生芽的诱导和植株再生 | 第34页 |
| ·转基因玉米植株的获得 | 第34-36页 |
| 三 结果与分析 | 第36-52页 |
| ·玉米RA33G4基因全长cDNA的克隆 | 第36-41页 |
| ·制备玉米总RNA | 第36页 |
| ·RA33G4 5′端序列的克隆 | 第36-37页 |
| ·RA33G4全长cDNA的序列及序列分析 | 第37-41页 |
| ·RA33G4表达载体的构建 | 第41-43页 |
| ·克隆RA33G4到pGEM-TEasy Vector | 第41-42页 |
| ·克隆RA33G4到pGSA 1252 | 第42-43页 |
| ·将pGSA1252-RA33G4质粒导入农杆菌LBA4404菌株中 | 第43页 |
| ·玉米再生体系的建立和遗传转化 | 第43-51页 |
| ·丛生芽的诱导和再生 | 第43-46页 |
| ·玉米的转化和筛选 | 第46-48页 |
| ·转基因植株的分子鉴定和RA33G4基因表达分析 | 第48-51页 |
| ·转基因植株的PCR检测 | 第48-49页 |
| ·转基因株系RA33G4基因表达分析 | 第49-51页 |
| ·转基因植株干旱抗性初步检测 | 第51-52页 |
| 四 讨论 | 第52-55页 |
| ·RA33G4基因 | 第52-53页 |
| ·建立良好的玉米基因转化受体系统 | 第53页 |
| ·农杆菌的恰当使用对转化的影响 | 第53-54页 |
| ·结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-60页 |
| 附录 | 第60-63页 |
| 致谢 | 第63-64页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第64页 |
