| 前言 | 第1-12页 |
| 英文缩写 | 第12-14页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-35页 |
| 1 T 细胞的发育分化 | 第14-29页 |
| ·胸腺的形态学特征 | 第14-15页 |
| ·T 细胞在胸腺中的分化与发育 | 第15-17页 |
| ·T 细胞的种类及外周分布 | 第17-19页 |
| ·Notch 信号通路与淋巴细胞发育 | 第19-26页 |
| ·Notch 的发现、结构及分布 | 第19-20页 |
| ·Notch 信号通路及其作用机制 | 第20-22页 |
| ·Notch 信号通路与T 细胞发育 | 第22-23页 |
| ·Notch 信号通路与B 细胞发育 | 第23-26页 |
| ·T 细胞体外发育体系及研究现状 | 第26-29页 |
| 2 调节性T 细胞与免疫抑制剂 | 第29-32页 |
| 3 本课题研究的理论意义及实用价值 | 第32-35页 |
| 第二章 材料与方法 | 第35-50页 |
| 1 主要试剂及器材 | 第35-37页 |
| ·试剂 | 第35-36页 |
| ·器材 | 第36页 |
| ·主要仪器 | 第36-37页 |
| 2 实验动物及分组 | 第37页 |
| 3 实验方法 | 第37-50页 |
| ·质粒的转化与鉴定 | 第37-38页 |
| ·质粒的高纯度提取 | 第38-39页 |
| ·真核细胞转染 | 第39-41页 |
| ·RT-PCR | 第41页 |
| ·Western blot | 第41-44页 |
| ·流式细胞仪分选细胞 | 第44页 |
| ·流式细胞仪检测细胞表型 | 第44-45页 |
| ·免疫磁珠分选术 | 第45-47页 |
| ·细胞增殖的测定 | 第47-48页 |
| ·小鼠外周血淋巴细胞分离 | 第48-49页 |
| ·几种实验用细胞的培养 | 第49-50页 |
| 第三章 实验结果 | 第50-74页 |
| 1 建立稳定表达Delta-like 1 蛋白的517-DLL1 细胞系 | 第50-53页 |
| ·517 细胞中Delta-like 1 基因表达检测 | 第50页 |
| ·检测MSCV-IRES-GFP(MIG)和MIG-Delta-like 1 质粒转染效率 | 第50-51页 |
| ·荧光纤维镜下观察含有质粒的病毒感染517 细胞的效率 | 第51-52页 |
| ·517-DLL1 细胞系中Delta-like 1 表达检测 | 第52-53页 |
| 2 培养体系的摸索 | 第53-56页 |
| ·分选C57 小鼠CD4~+ CD8~+ 胸腺细胞 | 第53-54页 |
| ·CD4~+ CD8~+ 胸腺细胞在不同培养体系中培养3 d 后细胞表型检测 | 第54-56页 |
| 3 517-DLL1 细胞体内功能实验 | 第56-65页 |
| ·裸鼠体内注射517-DLL1 细胞30 d 后外周血T 细胞检测 | 第56-58页 |
| ·裸鼠体内注射517-DLL1 细胞80 d 后外周血T 细胞检测 | 第58页 |
| ·裸鼠体内注射517-DLL1 细胞80 d 后淋巴节与脾脏中T 细胞检测 | 第58-63页 |
| ·裸鼠体内注射517-DLL1 细胞80 d 后脾脏细胞混合淋巴细胞培养 | 第63-65页 |
| 4 CD4~+CD25~-T 细胞培养 | 第65-66页 |
| 5 免疫抑制剂CsA 对正常小鼠正常小鼠体内CD4~+ CD25~+ T 细胞的影响 | 第66-74页 |
| ·应用CsA 后外周血中CD4~+ CD25~+ T 细胞的变化 | 第66页 |
| ·应用CsA 后脾、淋巴结和胸腺中CD4~+ CD25~+ T 的变化 | 第66-72页 |
| ·应用CsA 后CD4~+ CD25~+ T 细胞表型变化 | 第72-73页 |
| ·应用CsA 后mRNA 和蛋白质水平上FoxP3 的变化 | 第73页 |
| ·应用CsA 后检测脾脏CD4~+ CD25~+ T 细胞功能 | 第73-74页 |
| 第四章 讨论 | 第74-86页 |
| 1 方法学问题 | 第75-78页 |
| ·真核细胞表达外源基因的方法学 | 第75-76页 |
| ·免疫磁珠分选方法学 | 第76-78页 |
| 2 T 细胞培养体系的探索 | 第78-80页 |
| 3 517-DLL1 细胞在裸鼠体内具有的功能 | 第80-82页 |
| 4 CD4~+ CD25~-T 细胞在培养体系中功能的变化 | 第82-83页 |
| 5 免疫抑制剂CsA 对正常小鼠正常小鼠体内CD4~+ CD25~+ T 细胞的影响 | 第83-86页 |
| 结论 | 第86-88页 |
| 参考文献 | 第88-96页 |
| 作者简历 | 第96-98页 |
| 中文摘要 | 第98-104页 |
| Abstract | 第104-110页 |
| 致谢 | 第110页 |
