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不同转基因结构调控稻米直链淀粉含量的研究

中文摘要第1-7页
英文摘要第7-10页
符号说明第10-12页
前言第12-18页
1 材料与方法第18-27页
   ·实验材料第18-20页
     ·供试水稻品种或亲本第18页
     ·转化水稻所用的菌株及双元载体第18-20页
   ·质粒DNA 的提取、纯化第20页
   ·培养基第20-22页
   ·水稻愈伤组织的诱导及培养第22页
   ·根癌农杆菌的培养及其介导的水稻共转化第22-23页
     ·双菌体共转化中根癌农杆菌的培养第22页
     ·水稻受体材料的侵染及其与根癌农杆菌的共培养第22页
     ·抗性愈伤组织的筛选及植株再生第22-23页
   ·转基因水稻植株中潮霉素抗性的检测第23页
   ·转基因水稻植株总DNA 的PCR 分析第23-24页
     ·水稻植株叶片总DNA的提取第23页
     ·PCR 扩增第23-24页
   ·转基因水稻植株总DNA的Southern杂交分析第24页
     ·大量总DNA的提取第24页
     ·32P 标记的DNA 探针的制备第24页
     ·Southern 杂交分析第24页
   ·水稻成熟种子中GBSS 蛋白表达量分析第24-25页
     ·水稻成熟种子中GBSS 蛋白的提取第24页
     ·GBSS蛋白的SDS-PAGE第24-25页
   ·水稻成熟种子中直链淀粉含量(AC)的测定第25-26页
     ·样品前处理第25页
     ·大量测定第25页
     ·单粒测定第25-26页
   ·水稻成熟种子中胶稠度和糊化温度的测定第26页
   ·水稻成熟种子淀粉粘滞性谱(RVA)分析第26页
   ·稻米籽粒扫描电镜观察第26页
   ·田间性状调查第26-27页
2 结果与分析第27-59页
   ·无选择标记转反义Wx 基因水稻的选育及其品质表现第27-40页
     ·无选择标记转基因水稻的筛选及其分子鉴定第27-29页
     ·纯合转基因水稻的选育及其品质表现第29-30页
     ·转基因水稻中内源Wx基因的表达第30-31页
     ·转反义Wx 基因水稻成熟种子的RVA 谱分析第31-36页
     ·转反义Wx 基因对水稻籽粒外观的影响第36-37页
     ·转反义Wx 基因对水稻种子胚乳中淀粉粒结构的影响第37页
     ·转反义Wx 基因水稻纯合体田间农艺性状调查第37-40页
   ·转正义Wx 基因水稻的选育及其品质表现第40-50页
     ·转正义Wx基因水稻植株纯系成熟种子的品质分析第40-41页
     ·含正义Wx基因的转基因水稻中内源Wx基因的表达第41-42页
     ·转正义Wx基因水稻成熟种子的RVA谱分析第42-45页
     ·转正义Wx 基因对稻米粒重的影响第45-46页
     ·转正义Wx 基因稻米表观形态第46-48页
     ·转正义Wx基因水稻种子胚乳中的淀粉粒结构第48-50页
   ·同步转Wx-cDNA 和Sbe 基因RNA 干扰结构对稻米品质的影响第50-59页
     ·转基因水稻植株的获得第50-51页
     ·共转化T_0代水稻植株的PCR 分析第51-53页
     ·T_0代转基因水稻植株总DNA 的Southern 杂交分析第53-54页
     ·T_0代共转化植株成熟种子胚乳中的直链淀粉含量分析第54-57页
     ·无选择标记共转化水稻植株的PCR鉴定第57-59页
3 小结与讨论第59-66页
   ·与淀粉合成相关基因导入水稻后对稻米胚乳中直链淀粉含量的影响第59-62页
     ·反义Wx 基因第59-60页
     ·正义Wx基因第60页
     ·分支酶基因和Wx-cDNA第60-62页
   ·转基因水稻种子中的直链淀粉含量改变后对稻米其它特性的影响第62-64页
   ·无抗性选择基因转基因水稻植株的获得第64-66页
参考文献第66-71页
附录第71-73页
致谢第73页

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