| 一．前言 | 第1-23页 |
| 1．天然蛋白类蛋白酶抑制剂概述 | 第9-13页 |
| 1．1 命名 | 第9-10页 |
| 1．2 分类 | 第10-11页 |
| 1．3 蛋白酶抑制剂的作用机制 | 第11-12页 |
| 1．4 蛋白酶抑制剂的应用 | 第12-13页 |
| 2．丝氨酸蛋白酶抑制剂概述 | 第13-20页 |
| 2．1 Serpin的结构 | 第13-14页 |
| 2．2 Serpin的作用机制 | 第14-15页 |
| 2．3 Serpin的功能及其应用前景 | 第15-19页 |
| 2．4 Serpin的来源 | 第19-20页 |
| 3．菜豆概述 | 第20-22页 |
| 3．1 菜豆的分类 | 第20-22页 |
| 3．2 菜豆蛋白酶抑制剂分离纯化研究概况 | 第22页 |
| 4．选题意义 | 第22-23页 |
| 二．实验部分 | 第23-50页 |
| 1．材料与试剂 | 第23页 |
| 1．1 材料 | 第23页 |
| 1．2 主要试剂 | 第23页 |
| 2．主要仪器 | 第23-24页 |
| 3．方法 | 第24-28页 |
| 3．1 蛋白质浓度的测定 | 第24页 |
| 3．2 抑制剂抑制胰蛋白酶活性的测定 | 第24-25页 |
| 3．3 花豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备 | 第25-26页 |
| 3．4 花豆胰蛋白酶抑制剂的分离纯化 | 第26页 |
| 3．5 常规聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE) | 第26页 |
| 3．6 明胶-聚丙烯酰胺凝胶电泳(Geltin-PAGE)及活性染色 | 第26页 |
| 3．7 SDS-PAGE及相对分子量的测定 | 第26-27页 |
| 3．8 抑制剂等电点的测定 | 第27页 |
| 3．9 抑制剂纯品热稳定性 | 第27页 |
| 3．10 变性剂处理对胰蛋白酶抑制剂活性的影响 | 第27页 |
| 3．11 还原剂二硫苏糖醇处理对胰蛋白酶抑制剂活性的影响 | 第27页 |
| 3．12 抑制剂抑制类型的测定 | 第27页 |
| 3．13 抑制剂紫外吸收光谱测定 | 第27-28页 |
| 3．14 抑制剂内源荧光光谱分析 | 第28页 |
| 4．结果 | 第28-45页 |
| 4．1 粗提物的制备 | 第28-31页 |
| 4．2 胰蛋白酶抑制剂的分离纯化 | 第31-34页 |
| 4．3 胰蛋白酶抑制剂纯度的鉴定及相对分子量的测定 | 第34-36页 |
| 4．4 胰蛋白酶抑制剂等电点的测定 | 第36-37页 |
| 4．5 抑制类型分析 | 第37页 |
| 4．6 胰蛋白酶抑制剂热稳定性及内源荧光分析 | 第37-41页 |
| 4．7 二硫苏糖醇对抑制剂活性的影响及内源荧光分析 | 第41-42页 |
| 4．8 变性剂对抑制剂活性的影响及内源荧光分析 | 第42-45页 |
| 4．9 PVTI的紫外光谱 | 第45页 |
| 5．讨论 | 第45-50页 |
| 5．1 关于紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂粗提物的制备 | 第45-46页 |
| 5．2 关于紫花芸豆胰蛋白酶抑制剂 | 第46页 |
| 5．3 关于活性染色电泳测定抑制剂活性的分析 | 第46-47页 |
| 5．4 不同处理对PVTI活性、内源荧光的影响以及结构和构象的分析 | 第47-50页 |
| 参考文献 | 第50-56页 |
| 致谢 | 第56页 |
