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采用噬菌体展示技术淘选玉米赤霉烯酮模拟表位的研究

前言第1-11页
1 综述第11-20页
   ·玉米赤霉烯酮的研究进展第11-16页
     ·玉米赤霉烯酮的毒性研究第11-13页
     ·玉米赤霉烯酮的产生菌株及其污染和防控第13-14页
     ·玉米赤霉烯酮的检测分析方法第14-16页
   ·噬菌体展示技术及其研究进展第16-20页
2 材料与方法第20-44页
   ·ZEN全抗原的合成与鉴定第20-22页
     ·主要试剂及溶液第20页
     ·主要仪器第20页
     ·试验原理第20-22页
     ·合成步骤第22页
   ·单克隆抗体的制备第22-34页
     ·试验动物第22-23页
     ·仪器设备第23页
     ·试剂及其配置第23-25页
     ·单克隆抗体制备第25-32页
       ·动物免疫第25页
       ·动物免疫效果分析第25-27页
       ·骨髓瘤细胞悬液的制备第27页
       ·脾细胞的制备第27-28页
       ·饲养细胞的制备第28页
       ·细胞融合第28-29页
       ·ELISA基本条件的建立第29页
       ·杂交瘤细胞的筛选第29-30页
       ·阳性杂交瘤细胞的克隆化第30页
       ·单克隆细胞的冻存与复苏第30-31页
       ·单克隆抗体的大量制备第31页
       ·单克隆抗体的纯化第31-32页
     ·ZEN单克隆抗体特性的鉴定第32-34页
       ·单克隆抗体类型及亚型鉴定第32-33页
       ·SDS-PAGE测定纯化单克隆抗体的纯度第33页
       ·单克隆抗体的效价测定第33页
       ·间接竞争 ELISA的标准曲线的建立第33-34页
       ·单克隆抗体特异性的鉴定第34页
   ·玉米赤霉烯酮模拟表位的淘选第34-41页
     ·仪器设备第34-35页
     ·试剂及其配置第35-36页
     ·第一轮淘选第36-37页
     ·噬菌体滴度的测定第37页
     ·噬菌体的扩增和纯化第37-38页
     ·第二轮淘选第38-39页
     ·第三轮淘选第39-40页
     ·噬菌斑的扩增和纯化第40-41页
   ·玉米赤霉烯酮模拟表位的鉴定第41-44页
     ·间接 ELISA方法检测与抗体结合的阳性噬菌体克隆第41-42页
     ·间接竞争 ELISA淘选 ZEN的模拟表位第42页
     ·噬菌体克隆 DNA模板的快速纯化、测序第42-43页
     ·以ZEN模拟表位建立间接竞争 ELISA标准曲线第43-44页
3 结果第44-56页
   ·ZEN全抗原的合成与鉴定第44-46页
   ·ZEN单克隆抗体的制备第46-49页
     ·动物免疫效果分析第46-48页
       ·采用间接 ELISA测定多克隆抗体效价第46页
       ·采用间接竞争 ELISA进行多克隆抗体的特异性分析第46-48页
     ·细胞融合结果第48-49页
     ·间接ELISA最佳反应条件第49页
     ·阳性杂交瘤细胞的筛选与克隆第49页
     ·单抗腹水效价的测定与纯化第49页
   ·抗 ZEN单克隆抗体的鉴定第49-51页
     ·单克隆抗体的类别和亚型鉴定第49-50页
     ·单克隆抗体特异性的鉴定第50-51页
     ·间接竞争 ELISA标准曲线的建立第51页
   ·ZEN模拟表位的淘选结果第51-54页
     ·亲和淘选结果第51-52页
     ·间接 ELISA与间接竞争 ELISA淘选结果第52-54页
   ·ZEN模拟表位的鉴定结果第54-56页
     ·阳性克隆 DNA模板的快速纯化、测序第54页
     ·ZEN模拟表位建立间接竞争 ELISA标准曲线第54-56页
4 讨论第56-60页
   ·抗 ZEN单克隆抗体的制备第56-58页
   ·ZEN模拟表位的淘选第58-60页
5 小结第60-61页
致谢第61-62页
个人简历第62-63页
参考文献第63-70页
附录一第70页

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