反义磷脂酶Dγ基因转化大麦及其变异体的分析
| 英文缩略表 | 第1-8页 |
| 中文摘要 | 第8-9页 |
| 英文摘要 | 第9-12页 |
| 1 引言 | 第12-26页 |
| ·农杆菌介导单子叶植物遗传转化研究进展 | 第13-19页 |
| ·农杆菌介导的转化机理 | 第14页 |
| ·根癌农杆菌介导的单子叶植物遗传转化 | 第14-15页 |
| ·转基因的遗传表达 | 第15-19页 |
| ·外源基因在植物体内的整合 | 第15-16页 |
| ·转基因植株的遗传行为 | 第16页 |
| ·影响转化效率的因素 | 第16-18页 |
| ·转基因面临的安全问题 | 第18-19页 |
| ·磷脂酶D(PLD)基因 | 第19-26页 |
| ·磷脂酶 D 的发现 | 第19-20页 |
| ·PLD 基因的结构特点 | 第20-21页 |
| ·PLD 的调控——激活与抑制 | 第21-23页 |
| ·PLD 在植物信号转导中的作用 | 第23-24页 |
| ·进展与展望 | 第24-26页 |
| 2 材料与方法 | 第26-38页 |
| ·实验材料 | 第26-30页 |
| ·植物材料 | 第26页 |
| ·农杆菌菌株和质粒 | 第26页 |
| ·细菌培养基 | 第26-27页 |
| ·植物培养基 | 第27页 |
| ·试剂 | 第27-29页 |
| ·抗生素 | 第27页 |
| ·花粉压片试剂保存液 | 第27页 |
| ·植物基因组 DNA 提取液 | 第27-28页 |
| ·农杆菌质粒提取试剂 | 第28-29页 |
| ·电泳缓冲液配制 | 第29页 |
| ·Southern 杂交试剂 | 第29页 |
| ·酶与生化试剂 | 第29页 |
| ·PCR 引物 | 第29页 |
| ·仪器 | 第29-30页 |
| ·实验方法 | 第30-38页 |
| ·农杆菌介导法转基因 | 第30-31页 |
| ·转化时期花粉压片观察 | 第30页 |
| ·含反义PLDlγ基因农杆菌的活化与培养 | 第30-31页 |
| ·幼穗注射法处理大麦 | 第31页 |
| ·选择性抗生素(卡那霉素)敏感性试验 | 第31-32页 |
| ·转化植株的分子检测 | 第32-36页 |
| ·碱法提取少量质粒DNA | 第32页 |
| ·植物基因组DNA 的提取 | 第32-33页 |
| ·PCR 检测及电泳分析 | 第33-35页 |
| ·PCR 反应体系 | 第33-34页 |
| ·PCR 反应程序 | 第34页 |
| ·电泳检测 | 第34-35页 |
| ·PCR—Southern 检测 | 第35-36页 |
| ·转基因株系的耐盐性鉴定 | 第36页 |
| ·盆钵实验 | 第36页 |
| ·培养基实验 | 第36页 |
| ·转基因株系的抗旱性鉴定 | 第36页 |
| ·转基因株系的质膜透性测定 | 第36-38页 |
| ·幼苗培养方法 | 第36-37页 |
| ·质膜透性测定 | 第37-38页 |
| 3 结果与分析 | 第38-54页 |
| ·农杆菌介导转基因 | 第38-39页 |
| ·受体转化时期的选择确定 | 第38页 |
| ·转化植株及其后代的获得 | 第38-39页 |
| ·转化后代的卡那初步筛选 | 第39-40页 |
| ·转化后代的分子生物学检测 | 第40-42页 |
| ·PCR 检测 | 第40-41页 |
| ·PCR—Southern 杂交检测 | 第41-42页 |
| ·转基因株系的耐盐性测定 | 第42-45页 |
| ·培养基筛选 | 第42-43页 |
| ·盆钵筛选 | 第43-45页 |
| ·转基因株系的抗旱性测定 | 第45-48页 |
| ·转基因株系的质膜透性测定 | 第48-51页 |
| ·盐胁迫处理细胞质膜透性的变化 | 第48-50页 |
| ·干旱胁迫处理对细胞质膜透性变化的影响 | 第50-51页 |
| ·转基因株系田间农艺性状鉴定 | 第51-54页 |
| 4. 讨论 | 第54-58页 |
| ·受体转化时期的选择确定 | 第54页 |
| ·根癌农杆菌菌株对转化的影响 | 第54页 |
| ·农杆菌介导转化方法的优化 | 第54-55页 |
| ·生物基因表达的反义调控 | 第55-56页 |
| ·外源基因在转基因植株中的遗传传递 | 第56-57页 |
| ·进一步研究设想 | 第57-58页 |
| 5. 结论 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69-70页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第70页 |
