摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-9页 |
文献综述 | 第9-26页 |
第一章 转基因动物乳腺生物反应器的研究进展 | 第9-26页 |
·提高外源基因表达效率的辅助组件 | 第10-12页 |
·内含子对转基因动物基因表达效率的影响 | 第10-11页 |
·对抗“位置效应”的组件:绝缘子(isolator) | 第11页 |
·位点控制区(Locus Control Region,LCR) | 第11页 |
·核基质附着区(Matrix Attachment Regions,MARs) | 第11-12页 |
·外源基因整合拷贝数对其表达的影响 | 第12页 |
·目的基因 | 第12-14页 |
·基因转移技术 | 第14-17页 |
·显微注射法 | 第14页 |
·精子载体法 | 第14-15页 |
·胞内精子注射法(ICSI) | 第15页 |
·胚胎干细胞介导法 | 第15-16页 |
·逆(反)转录病毒介导法 | 第16页 |
·受体介导的基因转移 | 第16-17页 |
·体细胞核移植介导法 | 第17页 |
·基于人工染色体的表达载体 | 第17-19页 |
·体细胞基因打靶制备动物乳腺生物反应器 | 第19-23页 |
·体细胞基因打靶的技术优势 | 第19-20页 |
·体细胞基因打靶的策略 | 第20-22页 |
·体细胞核移植现存的技术难点 | 第22-23页 |
·体细胞基因打靶是制备乳腺生物反应器的必然趋势 | 第23页 |
·存在的问题与产业化前景 | 第23-24页 |
·催乳素分子结构和生物学功能 | 第24-26页 |
·基因及初始转录物 | 第24页 |
·蛋白质结构 | 第24页 |
·生物学功能 | 第24-26页 |
试验部分 | 第26-47页 |
第二章 山羊催乳素基因cDNA 的克隆及序列分析 | 第26-36页 |
·材料和方法 | 第26-33页 |
·材料 | 第26-28页 |
·试验方法 | 第28-33页 |
·试验结果 | 第33-35页 |
·催乳素基因cDNA 序列的扩增结果 | 第33页 |
·重组质粒酶切鉴定结果 | 第33-34页 |
·序列分析结果 | 第34-35页 |
·讨论 | 第35页 |
·结论 | 第35-36页 |
第三章 催乳素和t-PA 共表达载体的构建 | 第36-39页 |
·材料和方法 | 第36-38页 |
·材料 | 第36页 |
·试验方法 | 第36-38页 |
·结果 | 第38页 |
·重组质粒pPT 的鉴定结果 | 第38页 |
·讨论 | 第38页 |
·结论 | 第38-39页 |
第四章 催乳素和t-PA 乳腺共表达载体在细胞中的表达初探 | 第39-43页 |
·材料和方法 | 第39-40页 |
·材料 | 第39页 |
·试验方法 | 第39-40页 |
·结果 | 第40-41页 |
·细胞G418 抗性筛选 | 第40-41页 |
·转染后的成纤维细胞GFP 的检测 | 第41页 |
·阳性细胞的PCR 鉴定 | 第41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
·结论 | 第42-43页 |
第五章 AS-PCR 在异种核移植上的应用 | 第43-47页 |
·材料和方法 | 第43-44页 |
·材料 | 第43页 |
·工具酶及试剂 | 第43页 |
·PCR 模板的制备 | 第43-44页 |
·引物设计 | 第44页 |
·PCR 反应 | 第44页 |
·结果 | 第44-46页 |
·引物的特异性检测结果 | 第44-46页 |
·分析和讨论 | 第46-47页 |
总 结 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-54页 |
致 谢 | 第54-55页 |
个人简介 | 第55页 |