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催乳素和t-PA乳腺共表达载体构建和细胞表达研究

摘要第1-5页
ABSTRACT第5-9页
文献综述第9-26页
 第一章 转基因动物乳腺生物反应器的研究进展第9-26页
   ·提高外源基因表达效率的辅助组件第10-12页
     ·内含子对转基因动物基因表达效率的影响第10-11页
     ·对抗“位置效应”的组件:绝缘子(isolator)第11页
     ·位点控制区(Locus Control Region,LCR)第11页
     ·核基质附着区(Matrix Attachment Regions,MARs)第11-12页
     ·外源基因整合拷贝数对其表达的影响第12页
   ·目的基因第12-14页
   ·基因转移技术第14-17页
     ·显微注射法第14页
     ·精子载体法第14-15页
     ·胞内精子注射法(ICSI)第15页
     ·胚胎干细胞介导法第15-16页
     ·逆(反)转录病毒介导法第16页
     ·受体介导的基因转移第16-17页
     ·体细胞核移植介导法第17页
   ·基于人工染色体的表达载体第17-19页
   ·体细胞基因打靶制备动物乳腺生物反应器第19-23页
     ·体细胞基因打靶的技术优势第19-20页
     ·体细胞基因打靶的策略第20-22页
     ·体细胞核移植现存的技术难点第22-23页
     ·体细胞基因打靶是制备乳腺生物反应器的必然趋势第23页
   ·存在的问题与产业化前景第23-24页
   ·催乳素分子结构和生物学功能第24-26页
     ·基因及初始转录物第24页
     ·蛋白质结构第24页
     ·生物学功能第24-26页
试验部分第26-47页
 第二章 山羊催乳素基因cDNA 的克隆及序列分析第26-36页
   ·材料和方法第26-33页
     ·材料第26-28页
     ·试验方法第28-33页
   ·试验结果第33-35页
     ·催乳素基因cDNA 序列的扩增结果第33页
     ·重组质粒酶切鉴定结果第33-34页
     ·序列分析结果第34-35页
   ·讨论第35页
   ·结论第35-36页
 第三章 催乳素和t-PA 共表达载体的构建第36-39页
   ·材料和方法第36-38页
     ·材料第36页
     ·试验方法第36-38页
   ·结果第38页
     ·重组质粒pPT 的鉴定结果第38页
   ·讨论第38页
   ·结论第38-39页
 第四章 催乳素和t-PA 乳腺共表达载体在细胞中的表达初探第39-43页
   ·材料和方法第39-40页
     ·材料第39页
     ·试验方法第39-40页
   ·结果第40-41页
     ·细胞G418 抗性筛选第40-41页
     ·转染后的成纤维细胞GFP 的检测第41页
     ·阳性细胞的PCR 鉴定第41页
   ·讨论第41-42页
   ·结论第42-43页
 第五章 AS-PCR 在异种核移植上的应用第43-47页
   ·材料和方法第43-44页
     ·材料第43页
     ·工具酶及试剂第43页
     ·PCR 模板的制备第43-44页
     ·引物设计第44页
     ·PCR 反应第44页
   ·结果第44-46页
     ·引物的特异性检测结果第44-46页
   ·分析和讨论第46-47页
总 结第47-48页
参考文献第48-54页
致 谢第54-55页
个人简介第55页

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