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甜菜碱对肥育猪脂肪代谢及其关键酶基因表达的影响与机理研究

主要英文缩略词第1-10页
摘要第10-14页
ABSTRACT第14-18页
引言第18-20页
第一篇 文献综述第20-58页
 第一章 猪脂肪代谢及其调控研究进展第20-32页
   ·脂肪组织发育规律第20-21页
   ·脂肪的合成与分解及其转运第21-25页
     ·脂肪的合成第21-23页
     ·脂肪的分解、氧化及其转运第23-25页
   ·脂肪代谢的调控第25-32页
     ·遗传选育第25-26页
     ·激素对脂肪代谢的调控第26-29页
     ·营养调控第29-30页
     ·免疫调控第30-32页
 第二章 甜菜碱在养猪生产中的应用研究进展第32-56页
   ·甜菜碱的理化性质第33-34页
   ·甜菜碱在动物体内的代谢第34-36页
   ·甜菜碱的功能第36-39页
     ·甜菜碱的转甲基作用第36-37页
     ·甜菜碱调节渗透压的作用第37页
     ·甜菜碱的诱食作用第37-38页
     ·甜菜碱的抗应激作用第38-39页
     ·甜菜碱对维生素的稳定作用第39页
   ·甜菜碱在养猪生产中的应用第39-51页
     ·甜菜碱对猪生长性能的影响第39-45页
     ·甜菜碱对猪胴体组成的影响第45-50页
     ·甜菜碱对肉质的影响第50-51页
     ·甜菜碱对(早期)断奶仔猪腹泻的影响第51页
     ·甜菜碱对(妊娠)母猪繁殖性能的影响第51页
   ·甜菜碱的作用机理第51-56页
     ·甜菜碱与蛋白质、氨基酸代谢第51-52页
     ·甜菜碱与脂肪代谢第52-54页
     ·甜菜碱对生长调控轴激素的影响第54页
     ·甜菜碱与猪肉品质第54-55页
     ·甜菜碱与营养物质消化吸收第55-56页
 第三章 本研究的目的、意义及主要内容第56-58页
第二篇 试验研究第58-130页
 第四章 FAS、L-CPT I、M-CPT I 和 β-actin 基因片断的克隆第58-76页
   ·基因克隆策略第58-59页
   ·试验材料第59-61页
     ·动物材料第59页
     ·菌种与载体第59页
     ·仪器设备和试剂第59-60页
     ·引物第60页
     ·培养基及主要试剂的配制第60-61页
   ·试验方法第61-67页
     ·总 RNA 的提取第61页
     ·RNA 含量的测定第61-62页
     ·反转录第62页
     ·PCR 反应第62-63页
     ·PCR 产物电泳,检测目的条带是否与设计大小相符第63页
     ·PCR 产物的割胶回收第63-64页
     ·割胶回收的 PCR 产物与 pUCm-T Vector 连接第64页
     ·感受态细胞的制备与目的 DNA 的热激转化第64-65页
     ·重组克隆的筛选、重组质粒的提取与鉴定第65-66页
     ·重组 DNA 核苷酸序列测定分析第66-67页
   ·试验结果第67-73页
     ·FAS、L-CPT I、M-CPT I 和 β-actin 基因 RT-PCR 产物电泳结果第67-68页
     ·PCR 产物克隆及重组质粒鉴定第68-69页
     ·重组质粒测序结果第69-73页
   ·讨论第73-76页
 第五章 半定量 RT-PCR 法测定 FAS、L-CPT I 和 M-CPT I mRNA 丰度的条件优化第76-86页
   ·试验材料第76页
     ·动物材料第76页
     ·仪器设备和试剂第76页
     ·主要试剂的配制第76页
   ·试验方法第76-79页
     ·总 RNA 的提取第76页
     ·RNA 含量的测定第76-77页
     ·反转录第77页
     ·PCR 反应第77-79页
     ·琼脂糖凝胶电泳第79页
   ·试验结果第79-82页
     ·Mg~(2+) 浓度对 FAS、L-CPT I、M-CPT I 和 β-actin 基因扩增效率的影响第79-80页
     ·循环数对 FAS、L-CPT I、M-CPT I 和 β-actin 基因扩增效率的影响第80-82页
   ·讨论第82-86页
 第六章 饲养试验和屠宰试验第86-120页
   ·试验材料第86-87页
   ·试验方法第87-95页
     ·饲养试验第87页
     ·动态采血第87页
     ·屠宰试验第87页
     ·样品收集与保存第87-88页
     ·肝脏和背最长肌粗蛋白、粗脂肪含量的测定第88页
     ·肝脏和背最长肌游离肉碱、酸不溶肉碱含量的测定第88页
     ·肝脏和背最长肌线粒体 CPT I 活性的测定第88-89页
     ·肝脏和背最长肌线粒体 CPT I mRNA 丰度的测定第89-90页
     ·皮下脂肪激素敏感脂酶活性的测定第90-91页
     ·皮下脂肪脂蛋白脂酶活性的测定第91页
     ·皮下脂肪 NADPH 生成酶活性的测定第91-92页
     ·皮下脂肪乙酰-CoA 羧化酶活性的测定第92页
     ·皮下脂肪 FAS 活性的测定第92-93页
     ·皮下脂肪 FAS mRNA 丰度的测定第93-94页
     ·血清生化指标的测定第94页
     ·血清激素水平的测定第94页
     ·皮下脂肪 cAMP 含量的测定第94-95页
     ·统计分析第95页
   ·试验结果第95-106页
     ·生长性能第95页
     ·胴体组成第95-96页
     ·内脏器官相对重量第96-97页
     ·肝脏和背最长肌粗蛋白、粗脂肪含量第97页
     ·肝脏和背最长肌游离肉碱、酸不溶肉碱含量及其比值第97-98页
     ·肝脏和背最长肌线粒体 CPT I 活性第98页
     ·肝脏和背最长肌线粒体 CPT I mRNA 丰度第98-99页
     ·血清甘油三酯、胆固醇、游离脂肪酸含量及脂肪酶活性第99-100页
     ·皮下脂肪激素敏感脂酶和脂蛋白脂酶活性第100页
     ·皮下脂肪组织脂肪生成酶活性第100-101页
     ·皮下脂肪 FAS mRNA 丰度第101-102页
     ·生长激素脉冲分泌模式及其特征第102-104页
     ·血清激素水平第104-105页
     ·皮下脂肪 cAMP 含量第105-106页
     ·血清其它生化指标第106页
   ·讨论第106-120页
     ·甜菜碱对肥育猪生长性能的影响第106页
     ·甜菜碱对肥育猪胴体组成和内脏器官的影响第106-107页
     ·甜菜碱对肥育猪蛋白质代谢的影响第107-109页
     ·甜菜碱对肥育猪脂肪代谢的影响及其调控机理第109-116页
     ·甜菜碱对肥育猪生长激素脉冲分泌模式的影响第116-117页
     ·甜菜碱对肥育猪 IGF-I 分泌的影响第117-118页
     ·甜菜碱对肥育猪 TSH、FT_3、FT_4 和胰岛素分泌的影响第118-119页
     ·其它第119-120页
 第七章 细胞培养试验第120-130页
   ·试验材料第120-121页
     ·仪器设备和试剂第120页
     ·试剂的配制第120-121页
   ·试验方法第121-123页
     ·试验取材第121页
     ·猪原代肝细胞的分离获取第121-122页
     ·试验分组第122页
     ·取样及指标测定第122页
     ·统计分析第122-123页
   ·试验结果第123-125页
     ·生化指标第123-124页
     ·CPT I 活性第124-125页
   ·讨论第125-130页
     ·肝细胞的分离方法第125-126页
     ·原代培养肝细胞的活性分析第126-128页
     ·甜菜碱对原代培养猪肝细胞线粒体 CPT I活性的影响第128-130页
第三篇 提示及创新点第130-132页
 提示第130页
 创新点第130-132页
参考文献第132-158页
攻博期间发表的与学位论文相关的文章第158-160页
致谢第160页

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